青海道地藥材麻花艽有效成分與生態(tài)因子相關(guān)性研究*

李永平，王樹林，李向陽，曹寧麗，灑玉萍，保善錄

(青海大學(xué)，青海 西寧 810001)

青海道地藥材麻花艽有效成分與生態(tài)因子相關(guān)性研究*

李永平，王樹林，李向陽，曹寧麗，灑玉萍，保善錄

(青海大學(xué)，青海 西寧 810001)

目的 考察青海道地藥材麻花艽主產(chǎn)地生態(tài)因子對其主要有效成分含量的影響，探討生態(tài)因子與麻花艽品質(zhì)的相關(guān)性，確定影響麻花艽根莖中有效成分含量的主導(dǎo)生態(tài)因子。方法 對青海境內(nèi)野生麻花艽的野生資源、生態(tài)環(huán)境進行調(diào)查分析，利用高效液相色譜法檢測麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量，采用相關(guān)分析、逐步多元回歸分析法判斷麻花艽有效成分與生態(tài)因子的相關(guān)性。結(jié)果 野生麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量與產(chǎn)地海拔、日照時數(shù)、年降水量、相對濕度呈顯著性正相關(guān)。結(jié)論 一定范圍內(nèi)，海拔、日照時數(shù)、相對濕度、降雨量與麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量呈顯著性正相關(guān)。日照時數(shù)、相對濕度是綜合影響青海境內(nèi)麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷含量的主導(dǎo)因子。其他生態(tài)因子與麻花艽有效成分含量無顯著關(guān)系。

青海 麻花艽 有效成分 生態(tài)因子 相關(guān)性分析

麻花艽(GentianastramineaMaxim.)為龍膽科龍膽屬秦艽組植物[1-2]，也是《中華人民共和國藥典》[3]規(guī)定的秦艽主要品種之一，廣泛分布于青海的大部分地區(qū)，四川的川西北地區(qū)，甘肅、西藏、寧夏的部分地區(qū)。麻花艽分布區(qū)域之廣泛、貯藏量之大，藥材質(zhì)量之優(yōu)異，已使麻花艽成為秦艽的主要品種和主要藥源之一。麻花艽是青海省主要的道地藥材之一。但是近年來由于過度采挖，生態(tài)環(huán)境破壞，麻花艽的分布面積不斷縮小，資源蘊藏量急劇下降，1987年被國務(wù)院《中國野生藥材資源保護管理條例》列為Ⅲ級保護植物，2005年被收入《中國瀕危物種紅色名錄》。麻花艽的人工栽培要考慮藥材的道地性[4]，植物的生長既要受到自身遺傳物質(zhì)調(diào)控，又要受到植物的周圍環(huán)境生態(tài)因子的影響與調(diào)控[5]。本研究通過考察青海道地藥材麻花艽主產(chǎn)地生態(tài)因子對其主要有效成分含量的影響，探討生態(tài)因子與麻花艽品質(zhì)的相關(guān)性，確定影響麻花艽根莖中有效成分含量的主導(dǎo)生態(tài)因子。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀、紫外檢測器(安捷倫1260色譜儀)；TP310酸度計(北京時代新維)；etrex海拔儀(GARMIN)；KDN-PC02定氮儀(中科譜創(chuàng))；TU-1810紫外分光光度計(普析通用)；FA1004型電子天平(上海良平)；TH-86-150-WA超低溫冰箱(北京天寒)；FP6410火焰光度計(上海欣益)；龍膽苦苷、獐牙菜苦苷對照品 (中國藥品生物制品鑒定所提供)。

1.1.2 樣品

在查閱文獻(歷代本草；中藥資源普查資料；主要藥材市場的市場報告資料；《中國植物志》、《青海植物志》、《青海經(jīng)濟植物志》等著作；維普、萬方等數(shù)據(jù)庫；中藥材天地網(wǎng)、中國藥材市場、中藥材信息等網(wǎng)站)的基礎(chǔ)上實地走訪考查，確定麻花艽在青海境內(nèi)的分布，制定采樣計劃，根據(jù)青海境內(nèi)麻花艽分布區(qū)的生態(tài)環(huán)境，依據(jù)采樣區(qū)的地形地貌、生境、氣候等進行采樣地歸類，選擇10個天然居群進行采樣，詳細拍照、記錄樣地生境、經(jīng)緯度、海拔等信息，每個天然居群采集10個樣品的根莖和土壤樣品進行檢測。

1.2 方法

對青海境內(nèi)野生麻花艽的野生資源、生態(tài)環(huán)境進行調(diào)查分析，利用高效液相色譜法檢測麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量，采用相關(guān)分析、逐步多元回歸分析法判斷麻花艽有效成分與生態(tài)因子的相關(guān)性。

1.2.1 土壤養(yǎng)分常規(guī)八項的分析方法

將土壤樣品風(fēng)干、磨細、過篩，采用GB7173-87、GB9837-88、GB9836-88、GB7849-87、GB12297-90、NY/T889-2004、NY/T1121.6-2006、NY/T1377-2007標準分別測定土壤樣品中全N(半微量開氏法)、全P(酸溶—鉬銻抗比色法)、全K(高氯酸-氫氟酸消解火焰光度法)、堿解N(擴散吸收法)、速效P(碳酸氫鈉浸提—鉬銻抗比色法)、速效K(乙酸銨溶液浸提—火焰光度計法)、有機質(zhì)含量(重鉻酸鉀氧化法)及pH值(pH計電位測定法)。

1.2.2 龍膽苦苷和獐牙菜苦苷含量檢測方法

[6-7]，采用高效液相色譜(HPLC)法檢測麻花艽有效成分龍膽苦苷和獐牙菜苦苷的含量。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

利用SPSS13.0軟件行數(shù)據(jù)處理，有效成分與生態(tài)因子相關(guān)性分析采用相關(guān)性分析、逐步多元回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 麻花艽有效成分與生態(tài)因子的相關(guān)性分析

Table 1 The results of gentiana straminea active ingredients

Table 2 The measurement result of terrain factors

Table 3 The consult result of meteorological factors

Table 4 The test result of routine eight items of the soil nutrient in edaphic factors

Table 5 The connection between the effective component Gentiopicroside and swertiamarin in Gentiana

表1～5顯示，麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量與海拔、日照時數(shù)、相對濕度、降雨量呈顯著性正相關(guān)。

2.2 生態(tài)因子對麻花艽有效成分的逐步多元回歸分析

以不同產(chǎn)區(qū)麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷為因變量Y，以20個生態(tài)因子為自變量，對生態(tài)因子與麻花艽有效成分含量進行逐步多元回歸分析，得到龍膽苦苷與生態(tài)因子回歸方程為：

Y=-20.558+30.044X1+0.003X2

X1：相對濕度(%)t=5.536，P=0.001

X2：日照時數(shù)(小時/年)t=2.594，P=0.036

R=0.978，R2=0.956，

F=76.154，P<0.0001

獐牙菜苦苷與生態(tài)因子回歸方程：

Y=-1.208+1.498X1+0.00023X2

X1：相對濕度(%)t=4.692，P=0.002

X2：日照時數(shù)(小時/年)t=3.327，P=0.013

R=0.977，R2=0.955

F=73.552，P<0.0001

逐步多元回歸分析結(jié)果表明，相對濕度、日照時數(shù)是綜合影響青海境內(nèi)麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷含量的主導(dǎo)因子，而且它們之間存在顯著線性關(guān)系。其他生態(tài)因子與麻花艽有效成分含量無顯著關(guān)系。

3 討論

本研究通過對青海境內(nèi)野生麻花艽的野生資源、生態(tài)環(huán)境進行調(diào)查分析，利用高效液相色譜法檢測麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量，通過相關(guān)分析、逐步多元回歸分析結(jié)果表明，一定范圍內(nèi)，海拔、日照時數(shù)、相對濕度、降雨量與麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷的含量呈顯著性正相關(guān)。日照時數(shù)、相對濕度是綜合影響青海境內(nèi)麻花艽有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苦苷含量的主導(dǎo)因子。

古人曰“離其本土，則質(zhì)同而效異”，說明藥材的品質(zhì)形成與生態(tài)環(huán)境密切相關(guān)[8-10]， 青藏高原獨特的氣候特點(海拔高、氣溫低、日照長、太陽輻射強、降雨多、相對濕度大)適宜麻花艽的生長特性，成為麻花艽的道地產(chǎn)區(qū)。生態(tài)因子對麻花艽有效成分的影響是所有生態(tài)因子綜合影響的結(jié)果，其具體影響途徑有待進一步研究。

參考文獻

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[2]Ho Tingnong，Liu Shangwu.A worldwide monograph of Gen-tiana[M].Beijing：Science Press，2001，176-178.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010，253-254.

[4]黃林芳，付娟，陳士林.中藥材生態(tài)變異的學(xué)術(shù)探討[J].中草藥，2012，43(7)：1249-1258.

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[10]杜近義，胡國賦，秦際威.植物次生代謝產(chǎn)物的生態(tài)學(xué)意義[J].生物學(xué)雜志，1999，16(5)：9-10

A study on the correlation between the effective components of qinghai genuine medicinal materials and its ecological factors

Li YongPing，Wang ShuLin，Li XiangYang，Cao NingLi，Sa YuPing，Bao ShanLu

(Qinghai University，Xining，Qinghai 810001 China)

Objective The purpose of this study was to investigate the effect of the ecological factors of genuine medicinal materials Gentiana straminea in main producing areas of Qinghai Province on the content of its effective components.We aimed to discuss the correlation between its eco-factor and quality and determined the dominant eco-factor of the active constituent.Methods During the study，wild resource amount and ecological environmental condition of Gentiana straminea was surveyed and analyzed.Gentiopicroside and swertiamarin，the effective constituent of the herb，was detected with High Performance Liquid Chromatography(HPLC)method，while the relevance of Gentiana straminea was with correlation analysis and stepwise multivariate regression analysis method.Results The result showed a remarkable positive correlation between the content of the effective components of the herb and altitude，sunshine duration，annual precipitation，and relative humidity.Conclusion It came to a conclusion that there are some particular restrictions for the growth of Gentiana straminea.For example，the growth speed was accelerated with higher altitude，longer sunshine duration，increased annual precipitation，and raised relative humidity at certain range of scale.According to this，productivity as well as quality should be pursued when artificially cultivated，and proper and domestication should be concerned.This study provided a theoretical basis for the quality research，wildlife tending and artificial cultivation of Gentiana straminea.

QinghaiGentianastramineaEffective components Ecological factors Correlation analysis

*：國家科技支撐計劃(2001BA701A60-06)；青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院中青年科技項目(2013-KY-4) 李永平(1978～)，男，漢族，甘肅籍，副教授，碩士生導(dǎo)師

R28

A

10.13452/j.cnki.jqmc.2016.01.008

2015-06-07