蕎麥過(guò)敏癥臨床特征及致敏蛋白

湯　蕊，陳　適，孫勁旅

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科，北京 100730)

蕎麥屬于蓼科植物，在我國(guó)有悠久的種植史。蕎麥在我國(guó)分布極廣，著名的產(chǎn)地有四川的涼山地區(qū)、內(nèi)蒙古、西北及東北等地，且其用途廣泛。人工栽培的蕎麥主要有4種：甜蕎(F.esculentumMoench)、苦蕎[F.tataricum(L.)Gaertn]、翅蕎(F.emarginatumMtissner)和米蕎(Fagopyrumspp)。其中甜蕎和苦蕎是主要的栽培種。甜蕎亦稱普通蕎麥，為中國(guó)北方地區(qū)栽培的主要蕎麥品種。本文所提及的蕎麥主要指甜蕎。蕎麥有豐富的營(yíng)養(yǎng)，含有以賴氨酸為主的必需氨基酸、以淀粉為主的碳水化合物和鐵、錳、鋅等微量元素。此外，蕎麥還含有豐富的膳食纖維，其膳食纖維的含量是一般精制大米的10倍，特別適合慢性非傳染性疾病患者食用[1]。所以近來(lái)食用蕎麥的人群越來(lái)越多，蕎麥越來(lái)越普遍地成為流行的健康食品。蕎麥不僅可用于食用，其谷殼還可作為枕芯的填充物。蕎麥枕是用蕎麥殼做枕芯的枕頭，由于蕎麥殼獨(dú)特的構(gòu)造，具有透氣性良好、永不變形、可塑性強(qiáng)和冬暖夏涼等特點(diǎn)，據(jù)《本草綱目》記載，蕎麥殼枕有明目、清熱安神、促進(jìn)睡眠等作用。所以，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，無(wú)論是飲食，還是日常生活，人們與蕎麥接觸的機(jī)會(huì)越來(lái)越多。

蕎麥過(guò)敏癥臨床特征

發(fā)病率

1909年美國(guó)人Smith首先報(bào)道了蕎麥過(guò)敏癥，當(dāng)時(shí)仍稱為“蕎麥毒性”[2]。對(duì)某些特殊體質(zhì)的患者，攝食或通過(guò)呼吸道及接觸蕎麥可能引起過(guò)敏。蕎麥過(guò)敏癥的流行病學(xué)調(diào)查目前僅有日本學(xué)者曾經(jīng)報(bào)道，Takahashi等[3]觀察到在日本兒童及青少年人群中約有0.22%對(duì)蕎麥過(guò)敏。意大利學(xué)者在11個(gè)變態(tài)反應(yīng)門診觀察了多中心蕎麥過(guò)敏癥占全部來(lái)診過(guò)敏性疾病的比例，為3.6%[4]。北京協(xié)和醫(yī)院曾觀察到，在來(lái)診的過(guò)敏性疾病患者中，蕎麥過(guò)敏的比例也為3.6%[5]。所以，蕎麥過(guò)敏癥在我國(guó)并不十分罕見(jiàn)。

易患人群

蕎麥過(guò)敏癥多發(fā)于兒童，北京協(xié)和醫(yī)院曾觀察發(fā)現(xiàn)約60%的蕎麥過(guò)敏癥患者為兒童[5]。Nakamura[6]也曾分析169例蕎麥過(guò)敏患者，約86%為兒童。蕎麥過(guò)敏癥患者中少年兒童比例較高可能與兒童的消化道黏膜屏障不健全有關(guān)。但也有報(bào)道提示，食物過(guò)敏雖常見(jiàn)于兒童，但隨著年齡增長(zhǎng)，消化系統(tǒng)逐步成熟，一些兒童患者可逐步自愈，這也可能是成人少見(jiàn)蕎麥過(guò)敏的原因之一[7]。正因?yàn)槭w麥過(guò)敏癥好發(fā)于兒童，且兒童自制力差、對(duì)疾病的敘述能力差、抗病能力也差，因此危害較大，更應(yīng)注意本病。

發(fā)病機(jī)制及臨床表現(xiàn)

蕎麥過(guò)敏癥的發(fā)病機(jī)制以Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)為主。在特定抗原的刺激下，B淋巴細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞并產(chǎn)生針對(duì)該抗原的特異性IgE(special IgE，sIgE)，這種sIgE能和分布于呼吸道、消化道黏膜、皮下疏松結(jié)締組織、血管周圍的肥大細(xì)胞上的sIgE受體結(jié)合，使機(jī)體致敏。若機(jī)體再次接觸相同抗原，這些抗原可與相關(guān)細(xì)胞表面的sIgE結(jié)合，使細(xì)胞釋放組胺、5-羥色胺等生物活性物質(zhì)，作用于皮膚、血管、呼吸道、消化道等效應(yīng)器官。

蕎麥過(guò)敏癥臨床表現(xiàn)多樣，若累及呼吸道，可引起打噴嚏、流鼻涕、鼻癢、鼻堵、眼癢、咳嗽、喘憋、胸悶、氣短、呼吸困難等；累及胃腸道，可引起腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等；累及皮膚，可引起風(fēng)團(tuán)、皮膚充血、水腫、斑丘疹等；若累及循環(huán)系統(tǒng)，可引起頭暈、暈厥、血壓下降等。蕎麥過(guò)敏癥的臨床癥狀表現(xiàn)輕重不一，預(yù)后也各有不同[8]。北京協(xié)和醫(yī)院曾觀察蕎麥過(guò)敏癥患者，發(fā)現(xiàn)其臨床以呼吸道癥狀、消化道癥狀以及皮膚表現(xiàn)為主，個(gè)別嚴(yán)重者表現(xiàn)為過(guò)敏性休克[5]，可在半小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)意識(shí)喪失、血壓下降，最終導(dǎo)致死亡[9]。

接觸途徑

蕎麥過(guò)敏癥患者可通過(guò)吸入、進(jìn)食、皮膚接觸三種途徑誘發(fā)，進(jìn)食蕎麥后均在半小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)癥狀，可引起皮膚、呼吸道、消化道、循環(huán)等多系統(tǒng)臨床表現(xiàn)，有引起過(guò)敏性休克危及生命的報(bào)道[5，9-10]。目前國(guó)內(nèi)外報(bào)道了多種包含蕎麥的食物及吸入物，包括：格雷派餅、匹薩餅、蕎麥枕頭、蕎麥面條。蕎麥和一些其他食物過(guò)敏原間存在交叉反應(yīng)，如花生、辣椒、谷物、乳膠，因此對(duì)蕎麥過(guò)敏的患者進(jìn)食其他交叉食物時(shí)需提高警惕[11-12]。

診斷標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于任何一種過(guò)敏性疾病，都要強(qiáng)調(diào)病史和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)合的診斷方法，蕎麥過(guò)敏癥也不例外[13]。實(shí)驗(yàn)室檢查包括以皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)及皮內(nèi)試驗(yàn)為代表的體內(nèi)試驗(yàn)和以血清特異性IgE檢測(cè)為代表的體外試驗(yàn)。因?yàn)轶w內(nèi)試驗(yàn)存在一定風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致哮喘、喉水腫、暈厥或休克等，故目前血清sIgE檢測(cè)更為常用。蕎麥過(guò)敏癥患者的診斷需要患者有蕎麥接觸史，患者癥狀出現(xiàn)與接觸蕎麥存在時(shí)間相關(guān)性，體外試驗(yàn)蕎麥sIgE檢查較正常值升高，并除外其他物質(zhì)過(guò)敏后診斷。當(dāng)然，如避免接觸蕎麥后不發(fā)病，再次接觸后再發(fā)病則可進(jìn)一步確立診斷。

蕎麥致敏蛋白組分

蕎麥致敏蛋白的檢測(cè)和鑒定是目前蕎麥過(guò)敏癥機(jī)制研究的熱點(diǎn)。食物過(guò)敏原大多數(shù)是糖蛋白，這些蛋白分子量常在10～70 000，等電點(diǎn)多為酸性，通常能耐受食品加工、加熱和烹調(diào)，并能抵抗消化道的消化分解作用。因?yàn)槭澄镌戏浅?fù)雜，且各地對(duì)食物的使用、種植、收獲、貯存和烹調(diào)方式不同，所以同一種食物的致敏蛋白組分在世界各地也會(huì)存有差異。

Matsumoto[14]通過(guò)免疫印跡-分子克隆法分離10 000的蕎麥致敏蛋白并明確其特征。作者通過(guò)免疫印跡的方法在14例蕎麥過(guò)敏患者和2例無(wú)蕎麥過(guò)敏患者中識(shí)別了蕎麥過(guò)敏原。在57%的蕎麥過(guò)敏患者中觀察到分子量為10 000的蛋白與IgE反應(yīng)明顯強(qiáng)于與IgG和IgA的反應(yīng)。進(jìn)一步的分子克隆試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)蕎麥的10 000致敏蛋白屬于2S白蛋白家族。

Tanaka[15]則通過(guò)CAP系統(tǒng)熒光酶聯(lián)免疫分析(CAP-FEIA)的方法也觀察到蕎麥的分子量16 000的蛋白是其致敏蛋白。他還進(jìn)一步指出16 000蛋白與過(guò)敏性休克相關(guān)。Choi[16]將16 000致敏蛋白的互補(bǔ)DNA在大腸桿菌中進(jìn)行克隆和表達(dá)，通過(guò)免疫電泳和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)證實(shí)該蛋白的致敏性。他還鑒定出，這種分子量為16 000蛋白由127個(gè)氨基酸組成，屬于2S白蛋白家族，與ImmunoCAP法測(cè)定蕎麥浸出液的sIgE相比，測(cè)定重組16 000蛋白的特異性IgE對(duì)蕎麥過(guò)敏癥的診斷意義更大。Satoh[17]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，起過(guò)敏原作用的為這種16 000蛋白中的第65位半胱氨酸殘基。

Park等[8]通過(guò)SDS-PAGE方法觀察到相對(duì)分子質(zhì)量為24 000、19 000、16 000、9 000蛋白可能為蕎麥過(guò)敏的主要過(guò)敏原成分，尤其相對(duì)分子質(zhì)量為19 000蛋白過(guò)敏原對(duì)于蕎麥過(guò)敏的患者最具特異性。Choi等[18]也報(bào)道相對(duì)分子質(zhì)量為19 000蛋白也是蕎麥的主要致敏蛋白。他將該蛋白采用cDNA克隆、在大腸桿菌中表達(dá)，指出這是一個(gè)由135個(gè)氨基酸組成的蛋白。并用ROC曲線法計(jì)算出這個(gè)蛋白sIgE檢測(cè)的敏感度為92.5%，特異度為86%。

Zhang等[19]采用SDS-PAGE和尺寸排阻色譜法觀察到相對(duì)分子質(zhì)量為24 000、34 000和56 000可能為蕎麥的致敏蛋白。

總之，目前的研究已發(fā)現(xiàn)蕎麥的多種致敏蛋白，分別為相對(duì)分子質(zhì)量10 000、16 000、19 000、24 000、34 000、40～50 000和 56 000片段(表1)。但上述研究還主要停留于一個(gè)或幾個(gè)蛋白質(zhì)的鑒定和發(fā)現(xiàn)，其病例數(shù)在2～20例。

基礎(chǔ)研究的目的是為了指導(dǎo)臨床實(shí)踐，才能服務(wù)更多患者。這也是轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的含義。雖然轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)概念提出的時(shí)間并不長(zhǎng)，但將基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的研究成果與臨床醫(yī)學(xué)相結(jié)合卻一直是學(xué)術(shù)界努力探索的目標(biāo)。對(duì)蕎麥致敏蛋白組分的研究，得到大量致敏蛋白組分，但這些致敏蛋白組分的具體作用，致敏蛋白組分間的相互關(guān)系以及致敏蛋白組分與臨床表現(xiàn)間的關(guān)系，目前尚不清楚。有些學(xué)者在這方面進(jìn)行了一定探索，但結(jié)果有限且有矛盾。Tanaka[15]觀察到16 000蛋白可能與過(guò)敏性休克表現(xiàn)相關(guān)。Cho等[20]也觀察了16 000和40～50 000蛋白與癥狀嚴(yán)重程度的關(guān)系，并報(bào)道40～50 000蛋白與癥狀嚴(yán)重程度相關(guān)(表1)。

表1　目前蕎麥致敏蛋白的研究Table 1　Stdy of sensitized protein in patients with buck wheat allergy

Mr:相對(duì)分子質(zhì)量

小　　結(jié)

蕎麥?zhǔn)俏覈?guó)常見(jiàn)的食物，蕎麥皮枕頭亦在國(guó)內(nèi)廣泛使用，接觸蕎麥人數(shù)日益增多，使蕎麥過(guò)敏的患者日漸增加，蕎麥過(guò)敏越來(lái)越受到臨床醫(yī)師和廣大過(guò)敏患者的重視。通過(guò)對(duì)蕎麥過(guò)敏癥發(fā)病率、易患人群、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、接觸途徑和診斷標(biāo)準(zhǔn)的總結(jié)及蕎麥主要致敏蛋白組分的研究，可以了解蕎麥過(guò)敏癥的臨床特征及目前蕎麥致敏蛋白的研究現(xiàn)狀，從而為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)，并有助于早期識(shí)別癥狀嚴(yán)重的患者，從而降低致死率和致殘率，保衛(wèi)人民健康。

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