延芍利膽片的利膽解痙與胃腸動力作用

余 娜， 朱克儉， 李勇敏（.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長沙4008；.湖南省中醫(yī)藥研究院，湖南長沙40006）

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延芍利膽片的利膽解痙與胃腸動力作用

余 娜1， 朱克儉2*， 李勇敏2
（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長沙410208；2.湖南省中醫(yī)藥研究院，湖南長沙410006）

摘要：目的 觀察延芍利膽片（白芍、延胡索、當(dāng)歸等）對大鼠、小鼠和家兔的利膽解痙與胃腸動力作用。方法以復(fù)方膽通片、曲匹布通片為對照藥，采用導(dǎo)管引流與膽囊稱重兩種方法，觀察延芍利膽片對健康大鼠、小鼠膽汁分泌量的影響。采用嗎啡致Oddis括約肌痙攣模型，阿托品為對照藥，觀察該制劑對家兔膽總管括約肌阻抗、括約肌張力以及膽汁流量的影響。以復(fù)方膽通片為對照藥，觀察該制劑對小鼠腸炭末推進(jìn)率與胃中甲基橙殘留率的影響。結(jié)果延芍利膽片能有效增加大鼠、小鼠、家兔的膽汁流量，降低家兔膽總管括約肌阻抗與肌張力，并能降低小鼠的腸推進(jìn)率，抑制小鼠胃排空運動。結(jié)論 延芍利膽片具有良好的利膽解痙作用，并具有一定的健脾功效。

關(guān)鍵詞：延芍利膽片；利膽解痙；胃腸動力

KEY W 0 RDS：Yanshao Lidan Tab1ets；cho1agogic and spasmo1ytic functions；gastrointestina1moti1ity

延芍利膽片由白芍、延胡索、當(dāng)歸、白術(shù)、茵陳、川楝子、冬葵子、茯苓、澤瀉、雞內(nèi)金、梔子、瓦楞子、甘草13味藥組成，功能舒肝利膽，清熱祛濕，理氣健脾，用于肝膽失和，濕熱留滯所致上腹脹痛，右肩背痛，腹脹食少，口苦，苔膩等癥，以及慢性膽囊炎有上述見癥者。為探討該制劑主要藥效學(xué)作用，本實驗對其利膽解痙、健脾功效進(jìn)行了研究，茲報道如下。

1 材料

1.1 動物 ICI系清潔級小鼠，體質(zhì)量18～24 g（上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，合格證號SCXK［滬］2011-0002）；SD系清潔級大鼠，體質(zhì)重180～220 g（上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，合格證號SCXK［滬］2011-0002）；豚鼠，雌雄各半，體質(zhì)量350～450 g；家兔，雌雄不拘，體質(zhì)量（1.999±0.212）kg，由湖南農(nóng)大實驗動物養(yǎng)殖場提供。

1.2 藥物及試劑 延芍利膽片（批號20110508），由湖南省中醫(yī)藥研究院制劑研究室提供。陽性藥物為復(fù)方膽通片（批號110502），廣東省永康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；曲匹布通片（批號110904），湖南千金湘江藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；硫酸阿托品片（批號120104），三九企業(yè)集團(tuán)三九萬榮藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。鹽酸嗎啡注射液（批號110401），每支10 mg/mL，購自沈陽第一制藥廠。

1.3 儀器 751G-W分光光度計，上海分析儀器廠生產(chǎn)；CO2培養(yǎng)箱，型號MAIK II/IT400/ IT600，日本Yamato科學(xué)株式會社生產(chǎn)；倒置顯微鏡，型號CKX31-A12PHP，日本O1ympus公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 對大鼠、小鼠膽汁流量的影響

2.1.1 大鼠分組給藥與膽汁流量測定［1-2］SD系清潔級大鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量（198.1± 13.3）g，隨機分成空白對照組（蒸餾水10 mL/kg），復(fù)方膽通片組（0.6 g/kg，為臨床等效劑量的2倍），曲匹布通片組（0.02 g/kg，為臨床等效劑量的2倍），延芍利膽片低、中、高劑量組（3.0、6.0、12.0 g生藥/kg，分別相當(dāng)于臨床等效劑量的1、2、4倍）。每組測10個數(shù)據(jù)，膽汁引流不出或不順的動物由下一只作補充。所有動物禁食16 h，戊巴比妥鈉40 mL/kg麻醉，大鼠背部固定，打開腹腔，分離膽總管，結(jié)扎靠近腸乳頭端，向肝臟方向插入充滿生理鹽水的頭皮針，結(jié)扎，確定有膽汁流出后，固定導(dǎo)管，收集膽汁。手術(shù)穩(wěn)定30 min后，收集30 min內(nèi)膽汁流量作為給藥前（0 min）膽汁流量；在胃與十二指腸結(jié)合處按上述分組注射給予相應(yīng)藥物10 mL/kg，記錄給藥后30、60、90 min內(nèi)膽汁流量。

2.1.2 小鼠分組給藥與膽汁流量測定［3］另取

ICI系清潔級小鼠60只，雌雄各半，隨機分成空白對照組（蒸餾水10 mL/kg），復(fù)方膽通片組（1.0 g/kg），曲匹布通片組（0.03 g/kg，為臨床等效劑量的2倍），延芍利膽片低、中、高劑量組（4.3、8.6、17.2 g生藥/kg，分別相當(dāng)于臨床等效劑量的1、2、4倍）。所有動物禁食16 h，灌胃給予相應(yīng)藥物，1 h后頸動脈放血處死小鼠，分離膽囊與膽總管，結(jié)扎肝總管與靠近腸端的膽總管，將膽囊與肝總管、膽總管一起取出，剝離多余組織，稱重，剪開膽囊，清洗膽囊內(nèi)壁，濾紙吸干，再稱重，二者之差為小鼠1 h內(nèi)膽汁流量。

2.1.3 膽總管括約肌阻抗、張力值以及膽汁流量的測定［4-5］取家兔65只，體質(zhì)量（1.999± 0.212）kg，禁食16 h，3%戊比妥鈉麻醉，剖腹，結(jié)扎膽總管中部，兩根輸液管分別向上插入上段膽管記錄膽汁流量，向下插入下段膽管至壺腹部并經(jīng)三通管連接水壓計和注射器；取胃壁套管針插入十二指腸，外連導(dǎo)管以給藥用。注射器緩慢向下段膽總管注入生理鹽水，將水壓計預(yù)應(yīng)力升至300 mm H2O（1 mmH2O＝0.01 kPa），然后開放水壓計與膽總管通道，測記壓力自300 mmH2O降至200 mm H2O所耗時間（反映膽總管和Oddis括約肌的阻抗）；測定通道開放10 min，壓力穩(wěn)定時的最低通過壓（反映Oddis括約肌的張力值），同時測定10 min內(nèi)的膽汁流量。皮下注射鹽酸嗎啡0.3 mg/kg誘導(dǎo)Oddis括約肌痙攣，15 min后重復(fù)上述參數(shù)的測定。造模給藥25 min后各組分別給予同體積的生理鹽水、阿托品（0.02 g/kg）、延芍利膽片（1.6、3.2、6.4 g生藥/kg），30、60、90 min重復(fù)測定上述參數(shù)。

2.2 對小鼠腸推進(jìn)運動與胃排空的影響

2.2.1 分組 取ICI系小鼠50只，雌雄各半，隨機均分成空白對照組（10 mL/kg蒸餾水），復(fù)方膽通片組（1.0 g/kg，為臨床等效劑量的2倍），延芍利膽片低、中、高劑量組（4.3、8.6、17.2 g生藥/kg，分別相當(dāng)于臨床等效劑量的1、2、4倍）。另取ICI系小鼠50只，雌雄各半，按上述方法分組給藥。

2.2.2 炭末推進(jìn)率［6］50只小鼠分組灌胃相應(yīng)藥物6 d，禁食16 h，第2天取藥物與5%炭末加10%阿拉伯膠配成懸液，按10 mL/kg劑量灌胃，20 min后處死動物，測定炭末推進(jìn)率（%）。

2.2.3 甲基橙殘留率測定［7］另50只小鼠分組灌胃相應(yīng)藥物6 d后，禁食12 h，第7天皮下注射相應(yīng)藥物（除菌過濾處理）10 mL/kg，40 min后，每只小鼠灌胃0.1%甲基橙0.2 mL，20 min后處死動物，測定胃中甲基橙殘留率（%）。

3 結(jié)果

3.1 對大鼠、小鼠膽汁流量的影響 大鼠組與空白對照組比較，給藥30 min后，曲匹布通片組，延芍利膽片高劑量組膽汁流量明顯增加（P＜0.05）；60 min后，曲匹布通組，延芍利膽片中、高劑量組膽汁流量明顯增加（P＜0.05）；90 min后，延芍利膽片中劑量組膽汁流量仍有增加。與空白對照組比較，延芍利膽片高劑量組與曲匹布通片組膽汁流量在給藥60 min后，分泌增長有明顯差異（P＜0.05）。見表1～2。

表1 延芍利膽片對大鼠膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.1 Effect of Yanshao Lidan Tablets on bile floW in rats（±s，n＝10）

表1 延芍利膽片對大鼠膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.1 Effect of Yanshao Lidan Tablets on bile floW in rats（±s，n＝10）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05

不同時間的膽汁流量/mL 0 min　30 min　60 min　90 min空白對照組　10　　—組別　　動物數(shù)/只　　劑量/ （g·kg-1）0.288±0.058　 0.298±0.060　 0.301±0.036　0.295±0.049復(fù)方膽通組　10　0.6　0.276±0.069　 0.339±0.073　 0.346±0.065　0.326±0.057曲匹布通組　10　0.02　 0.300±0.054　 0.364±0.064*　0.374±0.084*　0.361±0.097延芍利膽片低劑量組　10　3.0　0.294±0.053　 0.334±0.071　 0.330±0.057　0.311±0.086延芍利膽片中劑量組　10　6.0　0.281±0.049　 0.345±0.063　 0.361±0.055*　0.346±0.059*延芍利膽片高劑量組　10　12.0　0.290±0.038　 0.358±0.056*　0.377±0.095*0.339±0.060

表2 延芍利膽片對小鼠膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.2 Effect of Yanshao Lidan Tab lets on bile floW in m ice（±s，n＝10）

表2 延芍利膽片對小鼠膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.2 Effect of Yanshao Lidan Tab lets on bile floW in m ice（±s，n＝10）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05

組別　　動物數(shù)/只劑量/ （g·kg-1）膽汁流量/ mg空白對照組　10　　—8.91±2.31復(fù)方膽通組　10　1.0　10.28±3.31曲匹布通組　10　0.03　11.86±3.74*延芍利膽片低劑量組　10　4.3　10.70±3.98延芍利膽片中劑量組　10　8.6　11.02±3.41延芍利膽片高劑量組　10　17.2　12.14±3.63*

3.2 對家兔膽總管Oddis括約肌阻抗、肌張力以及膽汁流量的影響 與模型組比較，延芍利膽片各組膽總管括約肌阻抗與張力在給藥后呈明顯或顯著性下降（P＜0.05或P＜0.01），與硫酸阿托品作用相當(dāng)。延芍利膽片中、高劑量組家兔膽汁分泌顯著性增加（P＜0.01）。見表3～5。 3.3 對小鼠胃腸動力的影響 與空白組比較，延芍利膽片中、高劑量組炭末推進(jìn)率均明顯降低（P＜0.05），中劑量組最為明顯（P＜0.01）；延芍利膽中、高劑量組甲基橙殘留率均明顯增高（P＜0.05），以高劑量組最為明顯（P＜0.01）。見表6。

4 討論

慢性膽囊炎病位在肝膽，但常肝膽脾胃同時受累。膽為“中清之腑”，膽汁分泌通暢，膽汁中的成分就不會因積滯而凝聚，誘發(fā)炎癥。“悒郁動肝致病，久則延及脾胃”，肝郁犯胃則胃脹胃痛、嘔惡、嘈雜；克脾則腹脹、腹瀉、腹痛瀉等脾胃虛弱癥候。疏肝利膽健脾和胃是慢性膽囊炎的治療大法。延芍利膽片方以白芍、延胡索養(yǎng)血以柔肝體，理氣以利肝用，為君藥。當(dāng)歸養(yǎng)血、活血、止痛；茵陳利濕清熱；白術(shù)健脾燥濕。三藥增君藥之效，補君藥不足，同為臣藥。川楝子與延胡索合為金鈴子散，疏肝清熱，行氣止痛；冬葵子性滑利，功擅通利竅道；茯苓、澤瀉健脾利濕；梔子清泄肝膽；瓦楞子、雞內(nèi)金健胃、制酸。7藥共為佐藥。甘草調(diào)和諸藥，并與白芍合為“芍藥甘草湯”有緩急止痛之效，為佐使之藥。諸藥合和，針對慢性膽囊炎之肝郁脾虛、濕熱阻滯、肝膽脾胃不和之證，能疏肝利膽、理氣健脾、清熱除濕。

表3 延芍利膽片對家兔膽總管括約肌阻抗的影響（±s，n＝10）Tab.3 Effect of Yanshao Lidan Tablets on impedance of common bile duct sphincter in rabbits（±s，n＝10）

表3 延芍利膽片對家兔膽總管括約肌阻抗的影響（±s，n＝10）Tab.3 Effect of Yanshao Lidan Tablets on impedance of common bile duct sphincter in rabbits（±s，n＝10）

注：與模型對照組比較，**P＜0.01

30 min 　60 min 　90 min空白對照組　10　　—　40.4±6.7　 41.1±4.9**　38.9±8.4**　40.9±8.5**　39.0±6.3組別　　動物數(shù)/只劑量/ （g·kg-1）括約肌阻抗/s實驗前　　造模值**模型對照組　10　　—　39.5±6.4　 101.6±16.7　 98.8±16.6　 93.6±18.5　 86.7±17.6阿托品組　10　0.02　38.5±3.3　 101.6±14.2　 50.3±10.1**　50.0±8.9**　52.2±8.9**延芍利膽片低劑量組　10　1.6　39.7±7.6　 96.1±20.2　 67.7±12.2**　59.0±10.5**　62.4±11.2**延芍利膽片中劑量組　10　3.2　37.4±7.7　 95.8±18.8　 61.0±9.6**　48.4±9.3**　50.0±8.5**延芍利膽片高劑量組　10　6.4　36.6±6.2　 93.5±18.5　 52.5±9.0**　42.6±6.5**　44.6±7.2**

表4 延芍利膽片對家兔膽總管括約肌張力的影響（±s，n＝10，1 mm H20＝0.01 kPa）Tab.4 Effect of Yanshao Lidan Tablets on tension of common bile duct sphincter in rabbits（±s，n＝10，1 mmH20＝0.01 kPa）

表4 延芍利膽片對家兔膽總管括約肌張力的影響（±s，n＝10，1 mm H20＝0.01 kPa）Tab.4 Effect of Yanshao Lidan Tablets on tension of common bile duct sphincter in rabbits（±s，n＝10，1 mmH20＝0.01 kPa）

注：與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

30 min　60 min 　90 min空白對照組　10　　—　131.4±3.8　 131.8±4.7**133.4±5.3**133.4±6.8**　129.3±4.0組別　　動物數(shù)/只　　劑量/ （g·kg-1）括約肌張力/mmH2O實驗前　　造模值**模型對照組　10　　—　131.1±8.4　 158.4±13.6　 156.6±13.6　 153.6±13.1　 151.7±11.8阿托品組　10　0.02　 129.2±4.2　 160.5±6.9　 133.3±6.7**135.1±6.3**　136.3±6.9**延芍利膽片低劑量組　10　3.0　 132.3±6.7　 162.9±8.3　 148.3±10.2　 142.5±10.0*　144.2±11.4延芍利膽片中劑量組　10　6.0　 136.4±6.8　 163.5±11.9　 146.6±8.1　 141.1±8.1*　142.1±7.7*延芍利膽片高劑量組　10　12.0　 133.0±12.2　 158.8±8.8　 139.6±6.2**132.4±3.9**　133.6±4.8**

表5 延芍利膽片對家兔膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.5 Effect of Yanshao Lidan Tablets on bile floW in rabbits（±s，n＝10）

表5 延芍利膽片對家兔膽汁流量的影響（±s，n＝10）Tab.5 Effect of Yanshao Lidan Tablets on bile floW in rabbits（±s，n＝10）

注：與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與阿托品組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

30 min 　60 min 　90 min空白對照組　10　　—　1.36±0.17　 1.38±0.15**　1.37±0.18**　1.39±0.19**　1.40±0.18組別　　動物數(shù)/只　　劑量/ （g·kg-1）膽汁/［mL·（10 min）-1］實驗前　　造模值**模型對照組　10　　—　1.38±0.32　 0.87±0.20　 0.89±0.21　 0.95±0.22　 1.00±0.21阿托品組　10　0.02　 1.30±0.13　 0.80±0.22　 1.20±0.14**　1.14±0.09**　1.14±0.09延芍利膽片低劑量組　10　3.0　1.31±0.12　 0.87±0.22　 1.15±0.13　 1.24±0.12*　1.19±0.15延芍利膽片中劑量組　10　6.0　1.38±0.08　 0.96±0.18　 1.20±0.12**　1.32±0.08**▲▲1.31±0.07**▲▲延芍利膽片高劑量組　10　12.0　 1.44±0.28　 0.96±0.28　 1.32±0.30**　1.44±0.32**▲　1.43±0.32**▲

表6 延芍利膽片對小鼠腸炭末推進(jìn)率與胃甲基橙殘留率的影響（±s，n＝10）Tab.6 Effects of Yanshao Lidan Tablets on alvine charcoal propulsion rate and gastric residual rate of methyl orange in m ice（±s，n＝10）

表6 延芍利膽片對小鼠腸炭末推進(jìn)率與胃甲基橙殘留率的影響（±s，n＝10）Tab.6 Effects of Yanshao Lidan Tablets on alvine charcoal propulsion rate and gastric residual rate of methyl orange in m ice（±s，n＝10）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 　　動物數(shù)/只　　劑量/（g·kg-1）　　推進(jìn)率/%　　殘留率/%空白對照組　10　　—59.82±8.98　33.38±7.28復(fù)方膽通組　10　1.0　51.32±8.90*　40.24±7.20*延芍利膽片低劑量組　10　4.3　53.89±5.97　40.01±8.88延芍利膽片中劑量組　10　8.6　50.13±4.62**　42.68±9.28*延芍利膽片高劑量組　10　17.2　49.70±8.98*　43.02±7.64**

本研究設(shè)計了一系列實驗證實延芍利膽片利膽解痙和健脾作用。該制劑通利膽汁，促進(jìn)膽汁分泌排泄，加強膽囊收縮，松弛Oddis膽道括約肌，可有效緩解慢性膽囊炎腹痛腹脹、右肩背疼痛，口苦等癥狀，具有明顯的利膽解痙作用，符合慢性膽囊炎的治療大法。該方中白術(shù)、茯苓、雞內(nèi)金、甘草均具有健脾養(yǎng)胃之功效，可改善患者胃痛嘔惡嘈雜、腹痛腹瀉等癥。本研究顯示，該制劑抑制小鼠腸推進(jìn)率與胃排空，中劑量組效果最強。目前大部分文獻(xiàn)報道的健脾中藥復(fù)方對胃腸動力多呈促進(jìn)作用［8-11］，但也有部分文獻(xiàn)報道對腸推進(jìn)作用的抑制也是中藥健脾的可能作用機理之一［12-13］。主要原因是由于脾虛證存在多種情況的胃腸功能異常，不但存在胃腸運動功能的降低，還可能表現(xiàn)出腸運動功能亢進(jìn)，出現(xiàn)腹瀉、腸鳴等表現(xiàn)，且在不同脾虛階段呈現(xiàn)不同表現(xiàn)。另外，由于中藥復(fù)方的健脾機理較為復(fù)雜，對胃腸動力具有雙向調(diào)節(jié)作用［14］，且與藥物劑量、動物模型等多種因素相關(guān)。因此，可認(rèn)為延芍利膽片對小鼠腸推進(jìn)的抑制作用是其健脾的可能機制之一，但還需進(jìn)一步實驗佐證。

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Effects of Yanshao Lidan Tablets on cholagogic and spasmolytic functions and gastrointestinalmotility

YU Na1， ZHU Ke-jian2*， LIYong-min2

（I.College of Pharmacy，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 4IO2OS，China；2.Hunan Provincial Academy of Chinese Medicine，Changsha 4IOOO6，China）

ABSTRACT：AIM To investigate the effects of Yanshao Lidan Tab1ets（Paeoniae Radiχalba，Corydalis Rhizoma，Angelicae sinensis Radiχ，etc.）on the cho1agogic and spasmo1ytic functions and gastrointestina1moti1ity in rats，mice and rabbits.METH0DS Compared with Fufang Dantong Tab1ets and Trepibutone Tab1ets，the co1-1ected bi1e by bi1e drainage and weighing ga11b1adder as adopted to observe the effects of Yanshao 1idan Tab1ets on the bi1e f1ow in hea1thy rats and mice.Compared with atropine，the rabbitmode1made bymorphine-induced Oddis sphincter spasm was adopted to observe the effects of Yanshao Lidan Tab1ets on the impedance and tension of common bi1e duct sphincter and bi1e f1ow.Compared with Fufang Dantong Tab1ets，this drug was studied，and the a1-vine charcoa1propu1sion rate and gastric residua1 rate ofmethy1orange in mice weremeasured.RESULTS Yanshao Lidan Tab1ets effective1y increased the bi1e f1ow in rats，mice and rabbits，marked1y reduced the impedance and tension of common bi1e duct sphincter in rabbits，1essened the a1vine charcoa1propu1sion rate，and restrained the gastric emptyingmovement in mice.C0 NCLUSI0 N Yanshao Lidan Tab1ets has good cho1agogic and spasmo1ytic effects and certain benefit of invigorating sp1een.

*通信作者：朱克儉（1955—），男，研究員，博士生導(dǎo)師，從事中藥新藥開發(fā)研究。Te1：13974825670，E-mai1：zkjo0731@263.net

作者簡介：余 娜（1984—），女，講師，博士生，從事中藥學(xué)教學(xué)與科研工作。Te1：13755102945，E-mai1：yuna0525@163.com

基金項目：湖南省中醫(yī)藥科研計劃資助項目（2008035）

收稿日期：2015-08-18

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.005

中圖分類號：I285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）03-0495-05