豬流感的研究進(jìn)展

陳君彥李海燕孫彩霞關(guān)平原

（1.金宇保靈生物藥品有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特 010030；2.北京華都詩(shī)華生物制品有限公司，北京 102600；3.呼和浩特市動(dòng)物疫病防控防控中心，內(nèi)蒙古呼和浩特 010020；4.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018）

豬流感的研究進(jìn)展

陳君彥1李海燕2孫彩霞3關(guān)平原4

（1.金宇保靈生物藥品有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特 010030；2.北京華都詩(shī)華生物制品有限公司，北京 102600；3.呼和浩特市動(dòng)物疫病防控防控中心，內(nèi)蒙古呼和浩特 010020；4.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018）

豬流感（Swine Inf1uenza，SI）是由正粘病毒科流感病毒屬的豬流感病毒（Swine Inf1uenza Virus，SIV）引起的一種急性、高度接觸傳染性的豬呼吸道疾病。SIV不僅危害豬群，而且同時(shí)具有感染人和禽的潛力。因此，豬流感具有重要的獸醫(yī)和人類公共衛(wèi)生學(xué)意義，而疫苗免疫是預(yù)防和控制豬流感暴發(fā)的有效措施和主動(dòng)性戰(zhàn)略，亦是切斷“禽-豬-人”的種間傳播鏈的根本手段。

豬流感；豬流感病毒

豬流感（Swine Influenza，SI）是由豬流感病毒（Swine Influenza Virus，SIV）引起豬的一種急性、高度接觸傳染性、群發(fā)性呼吸道疾病，是豬的主要免疫抑制病之一；臨床以突發(fā)、高熱、咳嗽、呼吸困難、反復(fù)發(fā)作、衰竭為特征，發(fā)病率高達(dá)100%。該病一旦發(fā)生，傳播迅速，可直接引起患豬死亡，引起妊娠母豬流產(chǎn)或產(chǎn)弱仔，并使患豬生產(chǎn)性能下降，肉料比降低，在集約化養(yǎng)豬場(chǎng)中普遍存在且難以根除，而且還可引起呼吸道細(xì)菌和病毒繼發(fā)或混合感染，使疫情更為嚴(yán)重，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。同時(shí)，豬在“禽-豬-人”的流感種間傳播過(guò)程中，起著中間宿主及多重宿主的作用。豬是人源、禽源和豬源流感病毒的惟一共同易感宿主，它能將流感病毒傳播給人或鳥(niǎo)類。通過(guò)監(jiān)測(cè)SI的動(dòng)態(tài)變化可以預(yù)測(cè)人流感的發(fā)展趨勢(shì)。因此，研究SI 具有更加深遠(yuǎn)的公共衛(wèi)生學(xué)意義。由于本病的流行和危害日益嚴(yán)重，因此對(duì)SIV的研究已成為國(guó)內(nèi)外獸醫(yī)界、醫(yī)學(xué)界和微生物學(xué)界的熱點(diǎn)之一。

1 豬流感世界流行性

豬流感是一種世界性分布的疾病。目前已發(fā)生的SIV至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N2、H3N6、H4N6、H5N1和H9N2［7］等8種不同血清亞型［1］，廣泛流行于豬群中的主要有古典型H1N1、類禽型H1N1和類人型H3N2豬流感［2-6］。

1.1 H1N1亞型毒株引起的豬流感

H1N1亞型引起的SI已有近百年的歷史，美國(guó)于1918年首次報(bào)道SI［8］，當(dāng)時(shí)，人群中正流行著H1N1亞型引起的20世紀(jì)最具災(zāi)難性的流感，全球約20億人染病，2100萬(wàn)人死亡，而豬群所表現(xiàn)的臨床癥狀和病理變化與當(dāng)時(shí)人群中流行的流感有許多相似之處，所以倍受人們關(guān)注，但直到1931年才分離并鑒定了第一株SIV［9-14］。A/Swine/Iowa/15/31（H1N1），即古典型H1N1 SIV的代表株（Shope R E，1931b），該毒株與引起人流感的病毒都來(lái)源于共同的祖先—AIV（Kanegae y et al，1994），并有很高的相關(guān)性。古典型H1N1 SIV以地方流行性存在于美國(guó)和歐洲，病毒學(xué)及血清學(xué)研究表明，美國(guó)豬群中自1918年發(fā)生SI以后，幾乎每年都有經(jīng)典SIV引起的SI，在美國(guó)屠宰的肥豬中25%-30%呈現(xiàn)抗流感病毒抗體陽(yáng)性，2年或2年以上的種豬中抗體陽(yáng)性率高達(dá)45%，在美國(guó)北部豬場(chǎng)，平均陽(yáng)性率為51%。

1940～1960年，英國(guó)、捷克斯洛伐克、西德等歐洲國(guó)家報(bào)道了豬群中存在抗H1N1 SIV抗體，但此后近20年時(shí)間里，SIV好象在歐洲這些國(guó)家中銷(xiāo)聲匿跡了，直到1976年［15］，經(jīng)典H1N1 SIV首次從意大利北部豬場(chǎng)中分離到，這些病毒分離株與當(dāng)時(shí)流行于美國(guó)的經(jīng)典SIV有非常近的相關(guān)性，推測(cè)是從美國(guó)進(jìn)口豬時(shí)傳入的（Nardelli L et al，1976），但這次疫情只限于意大利北部，并沒(méi)有在歐洲其他國(guó)家傳播開(kāi)，經(jīng)典SI很快被類禽SI所取代。類禽H1N1 SIV引起的SI于1979年在比利時(shí)和法國(guó)暴發(fā)［16］，與經(jīng)典H1N1 SIV相比，類禽H1N1 SIV表現(xiàn)出更高的選擇優(yōu)勢(shì)，具有更強(qiáng)的侵襲力和更高的致病力。20世紀(jì)70年代，類禽H1N1 SIV逐漸蔓延到亞洲，傳入了中國(guó)臺(tái)灣、香港、日本和馬來(lái)西亞等地，但都沒(méi)有引起嚴(yán)重的大暴發(fā)。

1.2 H3N2亞型毒株引起的SI

流行于世界范圍內(nèi)豬群中的H3N2亞型SI都是由類人H3N2亞型毒株引起的，繼1968年“香港流感”流行之后，1969年在臺(tái)灣豬群中首次發(fā)生（Kundin W D，1970），1970年在香港的豬群中也分到了H3N2亞型SIV，此后的15年時(shí)間里，都沒(méi)有引起感染豬流感的大暴發(fā)，但大量的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，68年香港流感H3N2毒株及其變異株迅速傳到了歐、美的豬群中，并且在世界范圍包括中國(guó)在內(nèi)的豬群中存在了數(shù)年之久，但都沒(méi)有引起豬呼吸道疾病的暴發(fā)和流行。1984年，歐洲大陸首次報(bào)道了類人H3N2亞型毒株引起的臨床SI的暴發(fā)，幾乎整個(gè)歐洲大陸的豬群都表現(xiàn)高水平的抗體。

長(zhǎng)期以來(lái)，美國(guó)豬群中幾乎每年都有經(jīng)典SI的流行，從其血清學(xué)調(diào)查結(jié)果看，抗經(jīng)典H1N1亞型SIV抗體陽(yáng)性率1976～1977年為21%，1987～1989年為30%，在同一時(shí)期，豬群中抗H3N2亞型SIV抗體陽(yáng)性率分別為1.4%和1.1%，而且，1998年以前，很少?gòu)呢i群中分離到H3N2亞型SIV（Hinshaw V S et al，1978；Chambers T M et al，1991；Webby R J et al，2000）。1998年，美國(guó)卡羅萊納州、明尼蘇達(dá)州、愛(ài)荷華州和德克薩斯州接種了H1N1亞型SI疫苗的四個(gè)豬場(chǎng)暴發(fā)了嚴(yán)重的SI，研究表明，其病原為H3N2人-豬雙重組病毒株和人-豬-禽三重組病毒株，母豬發(fā)病嚴(yán)重，有3%-4%的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)，產(chǎn)仔率降低5～10%，斷奶前仔豬死亡率高達(dá)4～5%；23個(gè)州的4382份血清樣品中抗三重組病毒株抗體陽(yáng)性率為20.5%，抗經(jīng)典H1N1 SIV抗體陽(yáng)性率為28.3%；到1999年，從俄克拉荷馬州、伊利諾斯州、科羅拉多州、威斯康星州及北卡羅萊納州又分離出三重組H3N2 SIV，血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，該病毒引起的SI幾乎遍及整個(gè)美國(guó)（Webby R J et al，2000），由此說(shuō)明，該病毒對(duì)豬有很好的適應(yīng)性并很快在豬群中傳播開(kāi)。

1.3 其他亞型毒株引起的SI

除H1N1和H3N2亞型引起的SI外，由其他亞型毒株引起的SI也時(shí)有報(bào)道，如日本（1978和1980）、法國(guó)（1987、1994）、英國(guó)（1994）報(bào)道了由H1N1和H3N2 毒株進(jìn)行基因重排后產(chǎn)生的新亞型毒株H1N2引起的SI；英國(guó)（1992）和美國(guó)（1994）則報(bào)道了H1N7引起的SI；1985年，哈薩克斯坦又報(bào)道了H3N6引起的SI；1999年，普遍流行于水鳥(niǎo)中的H4N6 AIV，首次從北美中東部安大略湖自然感染的豬體中分離到（Stephen C，2000）；而20世紀(jì)末被世界各國(guó)頻繁報(bào)道的H9N2毒株，1999年，不僅從中國(guó)大陸和中國(guó)香港的人群中分離到，而且從香港的豬體中也分到了該亞型病毒。這些亞型引起的SI，除了日本和英國(guó)由H1N2亞型引起的SI在豬群中廣為傳播并造成豬呼吸道病的地方性流行外，其他亞型毒株都沒(méi)有引起豬-豬的進(jìn)一步傳播，造成大范圍的SI流行。

1.4 國(guó)內(nèi)研究概況

與歐美先進(jìn)國(guó)家相比，我國(guó)對(duì)豬流感的研究起步很晚。1999～2003年，李海燕等對(duì)我國(guó)東北、西北、華中、華東、華南及西南地區(qū)等20個(gè)省市豬群進(jìn)行調(diào)查和毒株檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，近年我國(guó)豬群中大范圍存在H1和H3亞型SI感染，血清學(xué)和病毒學(xué)同時(shí)證實(shí)H9N2亞型病毒在我國(guó)豬群中存在。從2000-2003年收集和送檢的樣品中，分離鑒定了45株H3N2亞型、25株H1N1亞型和8株H9N2亞型。我國(guó)的豬流感在中國(guó)大陸可謂“老病新面貌”大范圍擴(kuò)散蔓延，疫情復(fù)雜而不容樂(lè)觀！

2 豬流感及豬流感病毒

2.1 豬流感病毒

豬流感病毒（SIV）為正粘病毒科（Orthomyxoviridae）流感病毒屬（Influenzavirus）的成員。SIV有3種血清型，即A型、B型和C型，其血清亞型目前已發(fā)現(xiàn)的至少有8種，即H1N1、H1N2、H1N7、H3N2、H3N6、H4N6、H5N1和H9N2。

SIV基因組為單股負(fù)鏈分節(jié)段的RNA，由8或7個(gè)節(jié)段構(gòu)成，包括對(duì)抗原變異率高并與其致病性和宿主特異性密切相關(guān)的外部基因HA和NA；決定其型特異性的內(nèi)部基因NP、M，以及編碼非結(jié)構(gòu)蛋白的NS基因；還有病毒粒子中分子量最大與病毒復(fù)制有關(guān)的PB1、PB2、PA。在8個(gè)基因片段中，編碼病毒多聚酶的3個(gè)基因片段PB1、PB2、PA，與片段5編碼NP蛋白一起結(jié)合病毒RNA組成螺旋狀核糖核蛋白復(fù)合體（vRNP），以此來(lái)穩(wěn)定vRNA，使其免受RNase的作用，并以vRNP為核心構(gòu)成完整病毒粒子。核蛋白NP是一種單體磷酸化的多肽，是病毒核衣殼的主要蛋白成分；核蛋白具有型特異性，根據(jù)其抗原性的不同，可將流感病毒分為A、B、C三型。其中，HA是SIV囊膜纖突的主要成分之一，由節(jié)段4編碼，是典型的I型糖蛋白。在病毒吸附及穿膜的過(guò)程中起關(guān)鍵作用，它含有4個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)域：信號(hào)肽（前導(dǎo)序列）、胞漿域、跨膜域和胞外域。HA蛋白可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，為豬流感病毒中最為重要的保護(hù)性蛋白抗原。

2.2 豬流感病毒的抗原性變異

SIV主要以抗原性漂移和抗原性轉(zhuǎn)變兩種不同機(jī)制得以進(jìn)化和發(fā)展。

抗原漂移是由基因組的點(diǎn)突變等引起小幅度的變異，導(dǎo)致氨基酸的積累到達(dá)一定的程度或突變氨基酸正好改變了抗原決定簇，從而引起抗原性的改變；這類變異一般僅限于人流感病毒，而在禽類中發(fā)生的幾率要小一些。

抗原轉(zhuǎn)變是由較大幅度的改變（如重組等）導(dǎo)致新的毒株或亞型的形成。SIV遺傳進(jìn)化的這兩種機(jī)制對(duì)其跨越種間屏障起關(guān)鍵性的作用，奠定了豬及SIV在流感病毒種間傳播中不可替代的地位。

2.3 豬流感病毒的種間傳播

流感病毒HA是宿主特異性的主要決定因素，種間傳播的機(jī)制取決于HA序列上受體結(jié)合位點(diǎn)（主要是第226位氨基酸）與宿主細(xì)胞表面病毒受體的結(jié)合特性。已發(fā)現(xiàn)的流感病毒受體有兩種，即唾液酸α2，6半乳糖苷（SAα2，6Gal）和唾液酸α2，3半乳糖苷（SAα2，3 Gal），不同宿主細(xì)胞膜表面結(jié)合特性有很大差異，這就決定了一株流感病毒不能同時(shí)感染不同的宿主，如人流感病毒HA序列第226位氨基酸為亮氨酸（Leu），易于與存在于人上皮細(xì)胞表面的SAα2，6Gal特異性結(jié)合，AIV HA序列第226位氨基酸為谷氨酰胺（Gln），可特異性結(jié)合存在于禽上皮細(xì)胞表面的SAα2，3Gal；而SIV第226位氨基酸為蛋氨酸（Met），對(duì)SAα2，6Gal和SAα2，3Gal有相同的結(jié)合特異性；并且豬上皮細(xì)胞表面同時(shí)存在人和禽流感病毒受體SAα2，6Gal和SAα2，3Gal，而且豬流感病毒（SIV）受體結(jié)合位點(diǎn)同時(shí)具有與人、禽流感病毒結(jié)合的特性，由此決定了豬可被AIV和人流感病毒感染，同時(shí)SIV具有感染人和禽的潛力；因此，豬自然成為禽、豬、人流感病毒的共同易感宿主，成為流感病毒不同毒株基因重配或重排、產(chǎn)生新亞型毒株的活載體。

2.4 豬流感的公共衛(wèi)生意義

豬是禽、豬、人流感病毒唯一的共同易感宿主，SIV還具有感染禽和人的能力，因此，SI除了具有顯而易見(jiàn)的獸醫(yī)傳染病學(xué)和獸醫(yī)公共衛(wèi)生意義外，還具有深遠(yuǎn)的人類公共衛(wèi)生意義。

2.4.1 豬流感的獸醫(yī)公共衛(wèi)生

SI是規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)普遍存在且難以根除的豬群發(fā)性疾病，不僅可直接引起患豬死亡，而且使患豬生產(chǎn)性能下降，恢復(fù)緩慢，推遲上市，直接影響豬群健康狀態(tài)和豬的質(zhì)量，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)每年因動(dòng)物疫病死亡造成的直接經(jīng)濟(jì)損失為260～300億人民幣，而由于生產(chǎn)性能下降，飼料、人工浪費(fèi)及藥物消耗等所造成的直接經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)800多億人民幣。更值得重視的是，SIV是“豬呼吸道病綜合征”的原發(fā)性致病原，由于SIV對(duì)呼吸道上皮具有高度特異親嗜性而使呼吸道上皮管壁受損傷，導(dǎo)致胸膜肺炎放線桿菌、嗜血桿菌、巴氏桿菌、豬2型鏈球菌、豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）、豬呼吸-繁殖障礙綜合征病毒（PRRSV）等其他呼吸道細(xì)菌和呼吸道病毒的繼發(fā)或混合感染，使疫情更為復(fù)雜，病情加重，死亡率增高，由此引起的經(jīng)濟(jì)損失更是無(wú)法估量。

SIV不僅危害豬群，而且可引起禽類（如火雞）流感的發(fā)生。北美火雞和豬中都存在抗經(jīng)典SIV抗體，經(jīng)典SIV由感染豬傳入火雞并引起火雞臨床流感癥狀的出現(xiàn)在北美已多次報(bào)道（Mohan R et al，1981；Halvorson D A et al，1992）；流行于北美火雞和豬中的經(jīng)典SIV表現(xiàn)出很高的遺傳改變和基因重組率（Wright S M et al，1992），從火雞分出的經(jīng)典SIV在試驗(yàn)條件下可使豬感染并出現(xiàn)典型的SI臨床癥狀（Hinshaw V S et al，1983）。而流行于歐洲豬群中的類禽H1N1SIV表現(xiàn)出極高的突變率和進(jìn)化率，其HA的遺傳性和抗原性與AIV的HA有很近的相關(guān)性，故又能由豬反向傳給火雞，引起火雞呼吸道疾病和產(chǎn)蛋量下降為特征的流感的暴發(fā)，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失（Mohan et al，1981；Andral et al，1985；Ludwig et al，1994）［17-18］，這種豬--火雞的聯(lián)系首次表明SIV可引起禽類的感染和流感的發(fā)生。1999年，普遍流行于水鳥(niǎo)的H4N6 AIV全基因組傳入北美中東部安大略湖的豬群，這是首次從自然感染的豬體內(nèi)分離到H1和H3亞型以外的SIV。最近，從亞洲東南部豬群中分到禽源H9N2 SIV（Shortridge，1999，個(gè)人通訊），但未發(fā)現(xiàn)該毒株經(jīng)豬-豬的進(jìn)一步傳播，至于對(duì)豬和禽的潛在危害，目前還不清楚。

2.4.2 豬流感的人類公共衛(wèi)生意義

回顧人類流感史，不難發(fā)現(xiàn)，20世紀(jì)每次人流感大流行的前后都有SI的發(fā)生和流行。早期理論認(rèn)為，引起1918年“西班牙流感”大流行的H1N1毒株由豬傳遞給人；但從凍存的石蠟包埋的當(dāng)年人體標(biāo)本進(jìn)行的研究認(rèn)為，其基因組8個(gè)節(jié)段均來(lái)源于AIV，是否經(jīng)過(guò)豬體的基因重配過(guò)程，目前還沒(méi)發(fā)現(xiàn)有利的證據(jù)。大量的研究證實(shí)，引起1957年“亞洲流感”和1968年“香港流感”的H2N2和H3N2毒株都是重組病毒株，都經(jīng)過(guò)了豬體的基因重配過(guò)程。基于SI對(duì)人類的潛在威脅，在人體器官移植的研究中，作為人體器官移植供體的豬必須排除SI的感染。

1976年1月，美國(guó)新澤西洲佛迪狄克斯1名新兵因感染豬源H1N1病毒而死于肺炎的事件，賦予SIV全新的公共衛(wèi)生意義；繼而，從其他5名士兵的身上也分到同樣的病毒，從血清學(xué)調(diào)查結(jié)果看，至少有500人已受到該病毒的感染（Hodder R A et al，1977；Top FH et al，1977）［20-21］，首次證實(shí)了在自然條件下，流感病毒確實(shí)可從豬傳播給人，從而開(kāi)始了人畜共患流感年代表上的里程碑（趙德明等，2000）［1，19］。已有的證據(jù)表明，SIV可周期性地傳入到人類，盡管其結(jié)果大部分都是良性的，但自1976年事件后，至少已有12人因感染SIV而死亡（Gaydos J C et al，1989；Paul A R et al，1989；Webster R G et al，1995），這些人生前都有與流感豬接觸的經(jīng)歷，顯然SIV具有感染人的能力，已報(bào)道的關(guān)于人類感染豬源流感病毒，在人-人的傳播傾向于自身限制，但毫無(wú)疑問(wèn)流感病毒不斷地在物種間傳播，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致致命性結(jié)果（Goldfield M et al，1977；Wentworth D E et al，1994、1997）。

這些研究顯然證實(shí)了感染豬的流感病毒具有感染人的潛力并能使與豬接觸的人員產(chǎn)生急性、致死性呼吸道疾病。SI不僅阻礙養(yǎng)豬業(yè)及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的持續(xù)發(fā)展，而且與人類及禽流感的發(fā)生與流行有著相當(dāng)密切的關(guān)系。因此，對(duì)SI的監(jiān)測(cè)作為預(yù)測(cè)和防止流感大暴發(fā)的最重要手段早已在歐美國(guó)家引起關(guān)注并達(dá)成共識(shí)；豬在“禽-豬-人”的種間傳播鏈中，扮演著流感病毒中間宿主及多重宿主的作用，在人和動(dòng)物流感的病原學(xué)、生態(tài)學(xué)及流行病學(xué)中占有舉足輕重的地位，具有重要的公共衛(wèi)生意義。

3 豬流感的分子流行病學(xué)

分子流行病學(xué)（Molecular epidemiology）是由傳統(tǒng)流行病學(xué)和現(xiàn)代分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、分子免疫學(xué)、分子微生物學(xué)等交叉融會(huì)而形成。由于分子流行病學(xué)日新月異的變化和發(fā)展，目前尚無(wú)明確界定的內(nèi)涵和外延。分子流行病學(xué)是在群體現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)研究中應(yīng)用分子生物學(xué)理論與技術(shù)，研究和應(yīng)用各種生物學(xué)標(biāo)志物，從分子基因水平研究病因、流行因素及防治措施。

分子流行病學(xué)的分子生物學(xué)研究方法有基因克隆和鑒定、基因探針的制備、核酸雜交技術(shù)、PCR擴(kuò)增技術(shù)、病毒基因組的限制性內(nèi)切圖譜（Wadell G et al，1980，1981）和寡核苷酸指紋圖譜、病毒核酸序列測(cè)定法、RNA節(jié)段電泳圖譜分析。其中以核酸體外擴(kuò)增技術(shù)和核酸序列測(cè)定法應(yīng)用最為廣泛。

我國(guó)分子流行病學(xué)在傳染病的研究中，主要應(yīng)用于快速診斷、基因分型、群體遺傳結(jié)構(gòu)分布、主要基因克隆、序列分析以及基因工程疫苗等方面。分子流行病學(xué)將使流行病學(xué)研究提高到一個(gè)嶄新的階段，為人類和動(dòng)物的疾病的防制展現(xiàn)了無(wú)限光明的前景。

4 豬流感的特異性診斷方法

隨著流感病毒研究的不斷深入和分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，各國(guó)獸醫(yī)界和醫(yī)學(xué)界在不斷研究流感的靈敏、快速、特異的診斷方法。近年來(lái)，國(guó)外對(duì)SIV 越來(lái)越關(guān)注，一方面是由于豬在禽流感和人流感傳播中發(fā)揮著重要的中間宿主的作用，具有重要的公共衛(wèi)生意義，另一方面，SIV 是豬急性呼吸道疾病、豬流產(chǎn)以及免疫抑制等問(wèn)題的一個(gè)主要誘因。如何對(duì)豬流感進(jìn)行及時(shí)準(zhǔn)確地診斷具有重要意義。

根據(jù)流行病學(xué)資料和臨床癥狀初步診斷為SI后，要進(jìn)行特異性診斷，以便與豬的其他呼吸道?。ㄘi支原體肺炎、豬繁殖與呼吸綜合征、豬傳染性胸膜肺炎、豬呼吸道病綜合征等）進(jìn)行鑒別。

豬流感流感病毒的檢測(cè)方法有病毒分離法、ELISA法、免疫熒光技術(shù)、RT-PCR、熒光RT-PCR等。病毒分離法是診斷豬流感病毒（SIV）感染的經(jīng)典方法一種經(jīng)典的檢測(cè)方法。ELISA法受病毒感染時(shí)間的限制，免疫熒光法易出現(xiàn)假陽(yáng)性，熒光RT-PCR要求實(shí)驗(yàn)條件高，不易推廣。PCR檢測(cè)技術(shù)日益普及，一些基于不同靶基因的RT-PCR檢測(cè)方法在國(guó)外相繼建立。Munch等建立了檢測(cè)禽流感的RT-PCR-ELISA法，該方法比RT-PCR敏感100倍，并可用于隱性感染的檢出。但對(duì)SIV的相應(yīng)檢測(cè)在國(guó)內(nèi)僅見(jiàn)一例報(bào)道，建立的套式RT-PCR法，其敏感性與RT-PCR-ELISA法相同，但比后者易于操作，該法也適用于SIV隱性感染的檢出。

5 豬流感疫苗

5.1 滅活疫苗（H1/H3亞型單、雙價(jià)滅活疫苗）

目前，應(yīng)用于豬流感免疫的疫苗主要是滅活疫苗。滅活疫苗被公認(rèn)可以減少畜群對(duì)流感的敏感性、降低攻毒后機(jī)體散播病毒的能力、也可使流感流行的范圍縮小，使疾病引起的損失降到最低。對(duì)于豬流感的免疫，理想的免疫效果是對(duì)各種不同亞型或者同一亞型不同來(lái)源的病毒的攻毒的完全保護(hù)。

5.2 基因工程疫苗

HA DNA疫苗，利用桿狀病毒系統(tǒng)表達(dá)HA和NA蛋白。核酸疫苗的使用受到成本、免疫途徑的限制，要在生產(chǎn)中大規(guī)模應(yīng)用，還需要進(jìn)行深入的研究。Larsen發(fā)現(xiàn)單純接種HA DNA疫苗只能刺激機(jī)體產(chǎn)生低水平的病毒特異性抗體，對(duì)攻毒的保護(hù)性也很差。但是在HA DNA免疫后四周用滅活疫苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫，機(jī)體產(chǎn)生高水平的病毒特異性血清抗體，并且對(duì)攻毒的保護(hù)明顯要優(yōu)于單純的用HA DNA疫苗進(jìn)行兩次免疫。

5.3 弱毒疫苗

病毒活載體疫苗尚在研究階段。

綜上所述，疫苗免疫是預(yù)防和控制豬流感暴發(fā)的有效措施和主動(dòng)性戰(zhàn)略，亦是切斷“禽-豬-人”的種間傳播鏈的根本手段，因此，研制豬流感疫苗具有重大意義。

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陳君彥，女，碩士，獸醫(yī)師，從事獸用生物制品研究與質(zhì)量監(jiān)測(cè)工作。