微小RNA在自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)病中的作用

劉歡，宋守君，薛海波（濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濱州256600）

微小RNA在自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)病中的作用

劉歡，宋守君，薛海波
（濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濱州256600）

自身免疫性甲狀腺疾病是一種器官特異性自身免疫性疾病，主要包括格雷夫斯病和自身免疫性甲狀腺炎。微小RNA是一種大小為19～25個堿基的非編碼RNA，在免疫功能和自身免疫中發(fā)揮重要作用。近年來研究出現(xiàn)，微小RNA在自身免疫性甲狀腺疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，miRNAs異常表達(dá)可能參與格雷夫斯病和自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)病。通過對微小RNA的研究，將為自身免疫甲狀腺疾病的防治提供重要依據(jù)。

自身免疫性甲狀腺疾??；格雷夫斯病；自身免疫性甲狀腺炎；微小RNA

自身免疫性甲狀腺疾?。ˋITD）是一種器官特異性自身免疫性疾病，甲狀腺淋巴細(xì)胞浸潤和甲狀腺自身抗體產(chǎn)生是其主要特征。AITD主要包括格雷夫斯?。℅D）和自身免疫性甲狀腺炎（AIT），AITD確切病因和發(fā)病機(jī)制尚不明了。微小RNA（miRNAs）是一種大小為19～25個堿基的內(nèi)源性非編碼RNA，miRNAs作為高度保守的調(diào)控RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)中發(fā)揮重要作用。超過30%的人類信使RNA（mRNA）受miRNAs的調(diào)控，此外，miRNAs還參與一系列的生物學(xué)過程，包括機(jī)體免疫功能、細(xì)胞凋亡、分化、發(fā)育、增殖和代謝［1］。近年來有研究報道，miRNAs在自身免疫性疾?。ˋID），如自身免疫性甲狀腺疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用［2］。因此，對miRNAs的深入研究可為了解疾病的發(fā)病機(jī)制和臨床治療提供新的思路和證據(jù)?，F(xiàn)就微小RNA在AITD發(fā)病中作用的研究進(jìn)展綜述如下。

1 miRNAs異常表達(dá)在AID發(fā)生中的作用

miRNAs是一種大小為19～25個堿基的非編碼RNA，miRNAs作為高度保守的調(diào)控RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)中發(fā)揮重要作用。超過30%的人類信使RNA（mRNA）受miRNAs調(diào)控。miRNAs通過與特定靶mRNA的3′非編碼區(qū)（3′UTR）結(jié)合，促進(jìn)mRNA的降解、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。miRNAs在諸多生物進(jìn)程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，如細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、器官發(fā)育和細(xì)胞增殖［3］。有研究［4］表明，近1/3的蛋白質(zhì)編碼基因受miRNAs的調(diào)節(jié)。近年來有研究證明，miRNAs對免疫系統(tǒng)亦有調(diào)節(jié)作用［5］。miR-142通過對樹突狀細(xì)胞（DCs）中白細(xì)胞介素6（IL-6）的負(fù)性調(diào)控參與固有免疫的調(diào)節(jié)［6］。對于miR-142有缺陷的小鼠，其細(xì)胞增殖、凋亡減少，分泌干擾素γ （IFN-γ）和IL-17的能力下降。這種缺陷可使小鼠移植物抗宿主?。℅VHD）的發(fā)病率顯著降低。實驗證明在小鼠體內(nèi)，應(yīng)用特異性miR-142拮抗劑后，小鼠GVHD的發(fā)病率顯著降低，由此我們可以認(rèn)為，以miR-142為靶點(diǎn)可作為改善T細(xì)胞介導(dǎo)的GVHD新方法［7］。此外，miR-26a、miR-34a、miR-145、miR-1et-7b可通過調(diào)節(jié)IFN-β的表達(dá)，增強(qiáng)機(jī)體固有免疫能力［8］。在獲得性免疫方面，miRNAs通過調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的分化參與獲得性免疫的調(diào)節(jié)［9］。Luo等［10］研究發(fā)現(xiàn)，miR-181a和miR-155通過抑制多種磷酸酶活性，升高穩(wěn)態(tài)水平的磷酸化介質(zhì)、降低T細(xì)胞受體（TCR）信號閾值，參與T淋巴細(xì)胞的分化。細(xì)胞凋亡是T細(xì)胞生長過程中去除不必要細(xì)胞克隆的一種免疫耐受機(jī)制，miR-let-7i可通過與胰島素樣生長因子1受體（IGF1R）結(jié)合抑制T細(xì)胞凋亡［11］。在B淋巴細(xì)胞分化方面，miR-34a可通過抑制Foxp1的表達(dá)阻止B淋巴細(xì)胞由祖B細(xì)胞（pro-B）向前B細(xì)胞（pre-B）的轉(zhuǎn)化［12］；miR-155可調(diào)控成熟B淋巴細(xì)胞向生發(fā)中心B細(xì)胞的分化［13］?？紤]到多數(shù)免疫性疾病以女性為主，Dai等［5］發(fā)現(xiàn)，性激素，尤其是雌激素可調(diào)控miRNAs在自身免疫性炎癥反應(yīng)中的作用。miRNAs異常表達(dá)可致機(jī)體獲得多種疾病，如糖尿病、腫瘤、AID等［14，15］。而在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病等AID中具有相同miRNAs（miR-155和miR-146a）的異常表達(dá)，由此可以認(rèn)為miRNAs的異常表達(dá)可能與自身免疫性疾病的發(fā)生有關(guān)。

2 miRNAs異常表達(dá)在GD發(fā)病中的作用

GD又稱毒性彌漫性甲狀腺腫，是甲狀腺腺體本身產(chǎn)生甲狀腺激素過多而引起的甲狀腺毒癥，占臨床全部甲狀腺功能亢進(jìn)癥的80%～85%，是國內(nèi)外內(nèi)分泌領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。Yamada等［1］研究發(fā)現(xiàn)，在GD患者中miR-16、miR-22和miR-375表達(dá)顯著增加。miR-16通過轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）信號途徑調(diào)控炎癥因子和趨化因子的生成［16］，參與GD患者的炎癥反應(yīng)。miR-22與雌激素α受體（ER-α）mRNA結(jié)合，抑制雌激素信號傳導(dǎo)，而雌激素信號通過與ERα結(jié)合，可抑制自身抗原特異性T輔助（Th）細(xì)胞（包括Th1和Th17細(xì)胞）的炎癥反應(yīng)［17］。已有研究證明，Th17細(xì)胞與AID的發(fā)病及嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，包括AITD［18，19］。因此，高表達(dá)的血清miR-22水平可能與AITD患者炎癥反應(yīng)激活有關(guān)。miR-375可促進(jìn)胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素（TSLP）表達(dá)，參與固有免疫和Th2型免疫應(yīng)答［20，21］。TSLP刺激的樹突狀細(xì)胞可通過抗原特異性方式誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向Th2細(xì)胞的分化。此外，GD患者TSLP水平表達(dá)增加，并可促進(jìn)GD患者Th17細(xì)胞的分化，參與GD的發(fā)病過程［22］。Chen等［5］發(fā)現(xiàn)，miR-346與CD4+CXCR5+T細(xì)胞中原癌基因Bcl-6結(jié)合，參與GD的發(fā)病過程。miR-346是一種CD4+CXCR5+T細(xì)胞相關(guān)性miRNAs。miR-346的表達(dá)與原癌基因Bcl-6 mRNA水平和CD4+CXCR5+T細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)。超表達(dá)的miR-346可抑制Bcl-6 mRNA水平和CD4+CXCR5+T細(xì)胞表達(dá)。GD患者miR-346表達(dá)減少，并與甲狀腺自身抗體（促甲狀腺激素受體抗受體抗體、甲狀腺球蛋白抗體、甲狀腺過氧化物酶抗體）水平呈負(fù)相關(guān)。而在治療后的GD患者中miR-346表達(dá)明顯增加，由此我們認(rèn)為，miR-346水平可作為評價GD嚴(yán)重程度的指標(biāo)。另一方面，Li等［23］發(fā)現(xiàn)，在GD最常見的甲狀腺外表現(xiàn)，即Graves眼病（GO）中miR-155表達(dá)增加，miR-155可通過與細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1（SOCS1）和SHIP1基因結(jié)合，抑制TLR4/NF-kB信號傳導(dǎo)，促進(jìn)GO患者的炎癥反應(yīng)。不僅如此，miR-155還可通過與SOCS1結(jié)合參與Th17細(xì)胞分化，在AID中發(fā)揮重要作用［24］。

3 miRNAs異常表達(dá)在HT發(fā)病中的作用

HT又稱為慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎，其特點(diǎn)是以自身甲狀腺組織為抗原的慢性自身免疫性疾病。HT的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，可能是在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，出現(xiàn)先天性免疫監(jiān)視缺陷，產(chǎn)生針對甲狀腺的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)［25］。Bernecker等［26］研究發(fā)現(xiàn)，HT患者miRNA-200a和miRNA-155表達(dá)水平較正常人顯著降低。CD4+T細(xì)胞中低表達(dá)的miRNA-200a可促進(jìn)Th1細(xì)胞相關(guān)炎癥因子的表達(dá)，損傷甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞，進(jìn)而影響甲狀腺功能。而CD8+T細(xì)胞中低表達(dá)的miRNA-200a和miRNA-155可促進(jìn)機(jī)體對甲狀腺自身抗原，主要是甲狀腺過氧化物酶（TPO）和甲狀腺球蛋白（TG）的病理識別，造成免疫功能紊亂，產(chǎn)生針對甲狀腺的細(xì)胞免疫反應(yīng)，導(dǎo)致甲狀腺濾泡上皮的破壞而致病。另一方面，T細(xì)胞分泌的炎癥因子可對甲狀腺自身抗原促甲狀腺激素受體基因（TSHR）和TPO產(chǎn)生免疫反應(yīng)，從而在HT發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。Dorris等［27］發(fā)現(xiàn)，miR-141可反饋性抑制轉(zhuǎn)化生長因子β （TGF-β）信號途徑中的TGF-β1和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白SMAD2的表達(dá)，參與IL-2（T細(xì)胞識別自身抗原和非自身抗原所必須）表達(dá)，進(jìn)而影響T細(xì)胞的增殖分化。Peng等［3］發(fā)現(xiàn)HT患者外周血單個核細(xì)胞（PBMCs）中IL-23R mRNA表達(dá)水平增加，并與甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）水平呈正相關(guān)。IL-23雖與Th17細(xì)胞的分化無關(guān)，但其可保持Th17細(xì)胞的生物活性和功能［28］，主要是誘導(dǎo)趨化因子和抗菌肽的表達(dá)，參與對細(xì)胞外微生物的防護(hù)和AID發(fā)病過程，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等［29，30］。近年來研究［31］表明，Th17細(xì)胞在HT發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用。IL-23與Th17間的關(guān)系可以證明，IL-23R與HT發(fā)病有關(guān)。而miR-125a-3p在HT患者中表達(dá)減少，并與TgAb水平呈負(fù)相關(guān)。miR-125a-3p是IL-23R相關(guān)性miRNA，與IL-23R mRNA 3′UTR結(jié)合，可抑制IL-23R的表達(dá)。因此，miR-125a-3p可能成為HT臨床診斷和治療的新靶點(diǎn)。

綜上所述，AITD是一種器官特異性自身免疫性疾病，其具體發(fā)病機(jī)制到目前尚不清楚。近年來隨著對miRNAs的研究，其在免疫功能、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖與分化和機(jī)體新陳代謝中的作用越來越受到人們的重視。miRNAs與AITD的關(guān)系近年來報道隨之增多，但其確切機(jī)制尚不明確。AITD尚包括如萎縮性甲狀腺炎（AT）、無痛性甲狀腺炎（PT）和產(chǎn)后甲狀腺炎（PPT）等其他甲狀腺疾病，因其發(fā)病率相對較低，尚未見microRNAs在AT、PT、PPT等發(fā)病中的相關(guān)研究報道，有待進(jìn)一步研究。因此，隨著對miRNAs研究的深入，相關(guān)分子機(jī)制越來越明了，將為AITD的發(fā)病機(jī)制、臨床診斷和治療提供重要的理論依據(jù)。

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山東省科技發(fā)展計劃（政策引導(dǎo)）項目（2011YD18063）；山東省高?？萍加媱濏椖浚↗11LF66）。

薛海波（E-mail：xuehaibo@sina.com）

2016-01-20）