肝纖維化的血清學(xué)診斷研究進(jìn)展*

劉婷　綜述，徐銘益　審校

肝纖維化的血清學(xué)診斷研究進(jìn)展*

劉婷綜述，徐銘益審校

肝纖維化是各種不同病因慢性肝病向終末期肝病進(jìn)展的必經(jīng)階段。近年來，肝纖維化的血清學(xué)診斷因其無創(chuàng)性和重復(fù)性好而得到廣泛的重視。肝纖維化的血清學(xué)診斷包括血清常規(guī)肝纖維化標(biāo)志物、血清診斷模型、組學(xué)和基因?qū)W等方法，而兩種或兩種以上的血清學(xué)診斷方法和模型的聯(lián)合應(yīng)用將有助于提高肝纖維化及肝硬化的診斷準(zhǔn)確性，從而試圖避免臨床肝活檢。

肝纖維化；血清學(xué)標(biāo)志物；診斷

【Abstract】Liver fibrosis is an inevitable process of chronic liver diseases with different causes which might lead to end-stage liver diseases.In recent years，the serologic diagnosis of liver fibrosis gets widely attention for its non-invasiveness and good repeatability.The serologic diagnosis of liver fibrosis includes conventional serologic markers，serologic diagnostic models，omics，genetics，and the joint application of two or more methods.

【Key words】Liver fibrosis；Serologic markers；Diagnosis

肝纖維化是各類致病因子持續(xù)作用下機(jī)體的“防御反應(yīng)”。正常肝細(xì)胞的變性壞死激活肝星狀細(xì)胞（Hepatic stellate cell，HSC）活化為成纖維樣細(xì)胞，細(xì)胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM）合成增多、降解減少，最終導(dǎo)致肝功能的降低，肝臟生理結(jié)構(gòu)被破壞。經(jīng)皮肝臟穿刺活組織檢查仍然是目前診斷肝纖維化的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但因其存在有創(chuàng)性、取樣誤差以及不同觀察者間的偏倚，尤其肝活檢無法用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)肝纖維化程度的變化及抗病毒療效評(píng)估，血清標(biāo)志物和影像學(xué)等無創(chuàng)性肝纖維化診斷技術(shù)便應(yīng)運(yùn)而生。這些技術(shù)包括生物性（血清標(biāo)志物）、物理性（影像學(xué)檢查）、生理性（呼氣試驗(yàn)）等[1]，其中血清標(biāo)志物可以對(duì)肝纖維化進(jìn)行早期診斷和動(dòng)態(tài)觀察。理想的肝纖維化血清學(xué)診斷分子應(yīng)具備以下特點(diǎn)：（1）對(duì)肝臟的特異性高；（2）不受肝、腎和網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞廓清的影響；（3）能反映細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解的動(dòng)力學(xué)平衡；（4）有助于診斷臨床顯著性肝纖維化并監(jiān)測(cè)其進(jìn)程和對(duì)治療的反應(yīng)；（5）易測(cè)定并具有良好的可重復(fù)性。

1　血清肝纖維化標(biāo)志物

肝纖維化血清標(biāo)志物主要分為間接和直接標(biāo)志物兩大類。間接標(biāo)志物包括血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（Aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（Alanine transamin ase，ALT）、凝血功能和血小板計(jì)數(shù)等，它們能反映肝功能的變化，但無法準(zhǔn)確地反映肝纖維化程度。

目前，應(yīng)用較多的直接標(biāo)志物有透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid，HA）、Ⅲ型前膠原氨基末端肽（Procollagen type III amino-terminal peptide，PIllNP）、I型和IV型膠原、層粘連蛋白（Laminin，LN）、基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinase，MMP）和金屬蛋白酶組織抑制劑（Tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP），金屬蛋白酶和解聚素復(fù)合物（Adisintegrin and metalloproteinase，ADAM）。已知的直接標(biāo)志物因其具有較多缺陷而無法成為理想的診斷肝纖維化的指標(biāo)：（1）反應(yīng)基質(zhì)代謝的速率并且在有明顯的炎癥活動(dòng)時(shí)趨于更高水平，因此在有輕微的炎癥出現(xiàn)時(shí)，大量的基質(zhì)沉積可能不會(huì)被檢測(cè)出來；（2）都沒有肝臟特異性；（3）受自身代謝、清除或分泌因素的影響等[2]。HA是反映肝臟ECM的最佳單項(xiàng)指標(biāo)，它能反映慢性丙型肝炎（Chronic hepatitis C，CHC）和酒精性肝?。ˋlcoholic liver disease，ALD）患者的肝纖維化程度。此外，肝細(xì)胞膜分泌一類調(diào)節(jié)基質(zhì)降解蛋白（MMP，TIMP和ADAM）與肝纖維化的發(fā)生和ECM降解密切相關(guān)，可用于評(píng)估肝纖維化程度[3～6]。Boeker et al提出血清TIMP-1預(yù)測(cè)早期肝硬化的靈敏度達(dá)100%，特異度為56%～75%[7]。但總體而言，單一血清標(biāo)志物的敏感性和特異性低，仍然沒有一項(xiàng)血清纖維化標(biāo)志物能準(zhǔn)確評(píng)估肝纖維化程度而應(yīng)用于臨床。

2　血清診斷模型的建立

為了提高血清學(xué)無創(chuàng)診斷的效率，近10年國(guó)內(nèi)外學(xué)者建立了多種基于血清多項(xiàng)指標(biāo)的診斷模型。應(yīng)用于慢性丙型肝炎肝纖維化的無創(chuàng)診斷模型主要有Fibrometer、APRI、Hepascore、FibroTest、Fibrospect、MP3、FPI、ELF、FIB-4、Fibroin dex、FibroSure等，在臨床上有充分立足點(diǎn)的無創(chuàng)性診斷模型有APRI和FibroTest，而分類準(zhǔn)確率較好（超過80%）的只有Fibrometers（82%）和Hepascore（92%）[8]。值得一提的是，聯(lián)合使用2～3種血清診斷模型可有效提高診斷準(zhǔn)確性。這些模型具備一些共同的特點(diǎn)：（1）受試者工作特征曲線下面積（Area under receiver operating characteristic，AUROC）大于0.8；（2）指標(biāo)易在臨床實(shí)踐中獲取；（3）先后經(jīng)臨床病理驗(yàn)證有一致性較高的診斷準(zhǔn)確性、敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值；（4）對(duì)判別有或無明顯纖維化（S0-1/S2-4）具有較可靠的參考價(jià)值。由于每個(gè)診斷模型選取的血清學(xué)指標(biāo)并不一致，因此在診斷效率中各有偏頗。研究表明，在明顯肝纖維化的診斷中，F(xiàn)ibroTest、Forns和Fibrometer的AUROC分別可達(dá)到0.89、0.91和0.89[9～11]；在肝硬化（S4期）的診斷中，F(xiàn)ibroTest、Hepascore和Fibrometer的AUROC分別可達(dá)到0.92、0.93和0.80～0.94[12]。

不同致病因素所致肝纖維化的病理特點(diǎn)各有不同，因此需根據(jù)不同病因選擇合適的診斷模型。國(guó)內(nèi)最常見的是在慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B，CHB）所進(jìn)行的研究。上海肝纖維化組模型（SLFG）在診斷HBeAg陽性的CHB患者明顯肝纖維化的AUROC可達(dá)到0.84，陽性預(yù)測(cè)值為91.1%，陰性預(yù)測(cè)值為51.6%，特異性為95.2%[13]。若將N-聚糖聯(lián)合SLFG應(yīng)用于進(jìn)展期肝纖維化的診斷，其AUROC可達(dá)0.90[14]。針對(duì)HBeAg陰性的CHB患者，我們課題組建立的模型（性別、年齡、PT、血小板、膽固醇和GGT）在診斷明顯肝纖維化患者的AUROC為0.86[15]。為了簡(jiǎn)化診斷模型，Zhou et al建立的S指數(shù)在診斷明顯肝纖維化患者的AUROC為0.81[16]。有研究將FibroTest和APRI聯(lián)合應(yīng)用于CHB的明顯肝纖維化診斷，可提高診斷效率，診斷準(zhǔn)確率可達(dá)97%[17]。CHC是病毒性肝炎所致肝纖維化的另一重要病因，一項(xiàng)以2000例CHC患者作為研究對(duì)象的大樣本診斷試驗(yàn)研究表明APRI聯(lián)合FibroTest的序貫診斷法可使50%明顯肝纖維化患者和80%肝硬化患者避免肝活檢[18]。此外，一項(xiàng)200例酒精性肝?。ˋlcoholic liver disease，ALD）隊(duì)列研究進(jìn)行了為期8年的隨訪，研究結(jié)果表明FibroTest、Fibrometer和Hepascore對(duì)疾病進(jìn)展、治療效果及預(yù)后評(píng)估均具有重要的價(jià)值[19]。非酒精性脂肪性肝?。∟on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是肝纖維化形成的另一重要致病因素。一項(xiàng)研究納入196例NAFLD患者為研究對(duì)象，研究結(jié)果表明ELF在區(qū)分嚴(yán)重肝纖維化患者（S3-4期）的AUROC可達(dá)0.90，區(qū)分明顯肝纖維化（S2-4期）患者AUROC為0.82，區(qū)分有無肝纖維化患者的AUROC為0.76[20]。ELF在預(yù)測(cè)原發(fā)性膽汁性膽管炎（Primary biliary cholangitis，PBC）患者肝硬化（Ishak評(píng)分5-6）和肝纖維化（Ishak評(píng)分3-6）中的AUROC分別為0.76和0.75[21]。在代謝性肝病中，以HA聯(lián)合轉(zhuǎn)鐵蛋白診斷肝硬化的敏感性和特異性高達(dá)100%[22]。

總體來說，無創(chuàng)血清學(xué)診斷模型的優(yōu)點(diǎn)有:（1）無創(chuàng)性；（2）血清學(xué)多指標(biāo)能更全面地反映患者的整體狀態(tài)，減少脂肪、體質(zhì)量、腹水等自身因素的干擾；（3）易于反復(fù)多次檢測(cè)，便于患者在治療過程中的復(fù)查和隨訪；（4）與肝組織活檢相比無論是風(fēng)險(xiǎn)性或者是費(fèi)用都更容易被患者所接受。但隨著國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)無創(chuàng)血清學(xué)模型的深入研究，缺點(diǎn)也逐漸顯現(xiàn)：（1）肝纖維化無創(chuàng)血清診斷模型的應(yīng)用缺乏統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)；（2）缺乏統(tǒng)一的選擇標(biāo)準(zhǔn)；（3）診斷的可靠性尚不明確；（4）計(jì)算比較繁瑣。

3　新的血清診斷標(biāo)志物探索性研究

3.1組學(xué)近十年來，組學(xué)在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中發(fā)揮著越來越重要的作用。（1）蛋白質(zhì)組學(xué)：我們課題組2013年采用蛋白質(zhì)組學(xué)的二維凝膠電泳聯(lián)合質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（Multiple reaction monitoring，MRM）定量檢測(cè)126例CHB患者血清，篩選出血清轉(zhuǎn)鐵蛋白分子等3個(gè)小分子蛋白在診斷明顯肝纖維化（≥S2期）的AUROC是0.848～0.966；診斷嚴(yán)重肝纖維化（≥S3期）的AUROC是0.785～0.875[23]；（2）糖組學(xué)：我們課題組2012年選取146例CHB患者，經(jīng)肝活組織病理學(xué)診斷明確肝纖維化程度，檢測(cè)血清N－糖組圖譜[24]，每份血清均可測(cè)得具有10個(gè)峰左右的糖組圖譜，將峰值量化，得到診斷肝纖維化的血清N－糖組峰標(biāo)記，通過觀察AUROC較高的峰出現(xiàn)的位置可以預(yù)測(cè)肝纖維化的程度。因此，血清糖組學(xué)可以作為一種非創(chuàng)傷性診斷方法，能高效預(yù)測(cè)CHB患者肝纖維化程度；（3）多肽組學(xué)：我們課題組2013年應(yīng)用血清多肽組學(xué)法篩選反映CHB患者肝臟炎癥分級(jí)的多肽診斷標(biāo)記物[25]。在126例CHB患者，采用液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）分離和篩選血清差異多肽峰。應(yīng)用MRM分析血清差異多肽分子m/z520.3離子與肝纖維化和炎癥程度及與病毒載量的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清DAK多肽分子m/z 520.3可作為CHB患者肝纖維化分期的診斷標(biāo)記物，但其在CHB人群中的診斷價(jià)值還需行大樣本研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

3.2基因?qū)W肝纖維化的基因?qū)W研究也有助于基因診斷標(biāo)志物的篩選。（1）微小RNA（microRNA，miRNA）：近年來多個(gè)研究顯示，miRNA在肝臟疾病中呈差異性表達(dá)，提示miRNA可能參與調(diào)控肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展或轉(zhuǎn)歸。Venugopal et al[26]采用膽管結(jié)扎法建立大鼠肝纖維化模型，應(yīng)用mirVanaTMmiRNA分離試劑盒從HSC中分離得到包括miRNA在內(nèi)的總RNA，進(jìn)一步純化后進(jìn)行miRNA水平譜分析，發(fā)現(xiàn)在肝纖維化模型動(dòng)物肝星狀細(xì)胞miRNA-150和miRNA-194水平下調(diào)，而其水平升高可使α-SMA和Ⅰ型膠原表達(dá)下降，推測(cè)這2個(gè)miRNA可作為肝纖維化診斷及治療靶向標(biāo)志物。Guo et al[27]發(fā)現(xiàn)，在肝星狀細(xì)胞活化過程中有12個(gè)miRNA水平上調(diào)，9個(gè)miRNA水平下調(diào)，其中miR-15b和miR-16可直接誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡。Murakami et al[28]用CCl4進(jìn)行小鼠腹腔灌注建立肝纖維化模型，分別取4周、6周、8周小鼠肝組織進(jìn)行miRNA水平譜檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)miR-199a、miR-200a和miR-200b水平與肝纖維化分期呈一致性的改變，其水平升高可使肝星狀細(xì)胞中的纖維化相關(guān)基因的表達(dá)明顯增加，推測(cè)這些miRNA可作為肝纖維化診斷及治療的靶點(diǎn)。Ninomiya et al[29]在研究10例PBC患者、5例CHB患者、5例CHC患者、5例健康志愿者血清miRNA水平譜時(shí)發(fā)現(xiàn)，與健康對(duì)照組相比，PBC患者血清has-miR-505-3p、197-3p、500a-3p水平顯著降低。與病毒性肝炎患者相比，PBC患者血清has-miR-505-3p、139-5p和197-3p水平顯著降低，因此下調(diào)的血清has-miR-505-3p和miR-197-3p可以作為PBC臨床檢測(cè)的生物標(biāo)記物。雖然miRNA的研究近幾年取得很大的進(jìn)展，為肝纖維化的早期無創(chuàng)診斷提供了新思路，但miRNA水平譜檢測(cè)方法存在較大的差異性，包括生活環(huán)境、人種、遺傳等，均可導(dǎo)致極大的差異。因此，該研究距臨床應(yīng)用還有待大樣本驗(yàn)證其準(zhǔn)確性。（2）信使RNA（Messenger RNA，mRNA）：我們課題組在2013年報(bào)道了采用基因芯片技術(shù)對(duì)139例CHB患者的隊(duì)列肝組織mRNA基因水平譜檢測(cè)分析，也發(fā)現(xiàn)在肝纖維化組（S1～S4組）與無肝纖維化組（S0組）比較，存在多達(dá)1451個(gè)差異基因[30]。今后，我們將進(jìn)一步驗(yàn)證篩選肝纖維化相關(guān)分子，并進(jìn)行血清學(xué)驗(yàn)證。

4　未來的肝纖維化血清診斷標(biāo)志物

肝纖維化的診斷涉及病原學(xué)、臨床、生物化學(xué)、影像學(xué)和組織病理學(xué)等各方面的評(píng)定。目前，僅依靠某種或某幾類指標(biāo)或方法診斷肝纖維化顯然是不夠全面的，還不能滿足現(xiàn)今的臨床研究的需要。新一代基因組技術(shù)是評(píng)估肝纖維化動(dòng)態(tài)演變過程的新興工具。然而，應(yīng)用這種復(fù)雜的、相對(duì)昂貴的方法是比較困難的，限制了其在臨床上的應(yīng)用。分子病理學(xué)技術(shù)在建立的動(dòng)物模型中的持續(xù)發(fā)展使其成為識(shí)別肝纖維化新型生物標(biāo)志物的一種有前途的方法。例如，激活的膽管細(xì)胞和肝星狀細(xì)胞的表面受體代表可行的小分子成像目標(biāo)配體，有利于肝纖維化發(fā)生的定量，并且為生物標(biāo)志物評(píng)估提供了一種改進(jìn)的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)[31]。高通量基因分型技術(shù)的最新進(jìn)展和成本下降使得越來越多的全基因組相關(guān)研究被用于評(píng)估疾病的進(jìn)展。例如，肝硬化風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分中包括一種基于七個(gè)單核苷酸多態(tài)性的算法，并且在慢性丙型肝炎患者中與疾病進(jìn)展有關(guān)[32]。然而，在預(yù)測(cè)臨床因素或其他相對(duì)簡(jiǎn)單標(biāo)記與疾病進(jìn)展的關(guān)系存在臨界值差異，缺乏非白種CHC人群、其他慢性肝病、中間階段疾病和HIV/HCV合并感染患者的驗(yàn)證，限制了肝硬化風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分在臨床上的應(yīng)用。基因編碼的多態(tài)性與CHC患者肝纖維化進(jìn)展有關(guān)[33]，多個(gè)全基因組和候選基因的相關(guān)研究試圖確定NAFLD發(fā)病機(jī)制中基因組的作用。然而，在不同人群的NAFLD患者中，只有I148 M仍然與疾病嚴(yán)重度和進(jìn)展有關(guān)[34]。血漿蛋白分析有可能識(shí)別與翻譯后修飾相關(guān)的新型肽，有助于慢性肝病的新型生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)。復(fù)雜的血漿蛋白變化范圍、候選標(biāo)志物的應(yīng)用、成本問題、樣本表型的變化、損耗方法、技術(shù)再現(xiàn)性和高通量的能力仍然需要去解決。雖然迄今為止蛋白分析在幾項(xiàng)研究中已經(jīng)被評(píng)估，但是診斷的準(zhǔn)確性尚無明顯的提高[35]。

盡管在此領(lǐng)域已有不少的研究進(jìn)展，但現(xiàn)有的資料表明，肝纖維化非創(chuàng)傷性診斷方法或預(yù)測(cè)模型對(duì)組織學(xué)分期診斷尚未建立起一個(gè)等價(jià)體系，尚不能完全取代肝活檢，而兩種或兩種以上非創(chuàng)傷性診斷方法和模型的聯(lián)合應(yīng)用將有助于提高肝纖維化及肝硬化的診斷率，避免臨床肝活檢的需要。相信在不久的將來，用新的研究方法可探索出特異性強(qiáng)、能反映肝纖維化程度的血清學(xué)指標(biāo)，并建立起簡(jiǎn)便易行和準(zhǔn)確度高的診斷及評(píng)估體系，從而使慢性肝病肝纖維化的防治邁上新的臺(tái)階。

[1]Patel1K，BedossaP，CasteraL.Diagnosisofliverfibrosis: Present and future.Liver Dis，2015，35（2）:166-183.

[2]Baranova A，Lal P，Birerdinc A，et al.Non-invasive markers for hepatic fibrosis.BMC Gastroenterol，2011，11（12）:91-135.

[3]Benyon RC，Arthur MJ.ExtraceUular matrix degradation and the role of hepatic stellate ceas.Semin Liver Dis，2001，21（3）:373-384.

[4]Walsh KM，F(xiàn)letcher A，MacSween RN，et al.Basement membrane peptides as markers of liver disease in chronic hepatitis C.J Hepatol，2000，32（2）:325-330.

[5]Roderfeld M，Hemmann S，Roeb E.Mechanisms of fibrinolysis in chronic liver injury（with special emphasis on MMPs and TIMPs）.Z Gastroenterol，2007，45（1）:25-33.

[6]Schwettmann L，Wehmeier M，Jokovic D，et al.Hepatic expression of a disintegrin and metalloproteinase（ADAM）and ADAMs with thrombospondin motives（ADAM-TS）enzymes in patients with chronic liver disease.J Hepatol，2008，49（2）:243-250.

[7]Boeker KH，Haberkom CI，Michels D，et al.Diagnostic potential of circulating TIMP-l and MMP-2 as markers of liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C.Clin Chim Acta，2002，316（1-2）:7l-81.

[8]徐銘益，陸倫根.肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物及診斷模型的診斷價(jià)值.中華肝臟病雜志，2014，22（9）:647-649.

[9]Imbert-Bismut F，Ratziu V，Pieroni L，et al.Biochemical markers of liver fibrosis in patients with hepatitis C virus infection:A prospective study.Lancet，2001，357（9262）:1069-1075.

[10]Forns X，Ampurdanes S，Llovet JM，et al.Identification of chronic hepatitis C patients without hepatic fibrosis by a simple predictive model.Hepatoogy，2002，36（4 Pt 1）:986-992.

[11]Cales P，Oberti F，Michalak S，et al.A novel panel of blood markerstoassess thedegreeofliverfibrosis.Hepatology，2005，42（6）:1373-1381.

[12]Adams LA，Bulsara M，Rossi E，et al.Hepascore:An accurate validatedpredictorofliverfibrosisinchronichepatitisC infection.Clin Chem，2005，51（10）:1867-1873.

[13]ZengMD，LuLG，MaoYM，etal.Predictionofsignificant fibrosis in HBeAg-positive patients with chronic hepatitis B by a noninvasive model.Hepatology，2005，42（6）:1437-1445.

[14]Qu Y，Gao CF，Zhou K，et al.Serum N-glycomic markers in combinationwithpanelsimprovesthediagnosisofchronic hepatitis B.Ann Hepatol，2012，11（2）:202-212.

[15]WangY，XuMY，Zheng RD，etal.Predictionofsignificant fibrosis and cirrhosis in hepatitis B e-antigen negative patients with chronic hepatitis B using routine parameters.Hepatol Res，2013，43（5）:441-451.

[16]ZhouK，GaoCF，ZhaoYP，etal.Simplerscoreofroutine laboratory tests predicts liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B.J Gastroenterol Hepatol，2010，25（9）:1569-1577.

[17]Sebastiani G，VarioA，Guido M，etal.Sequentialalgorithms combining noninvasive markers and biopsy for the assessment of liver fibrosis in chronic hepatitis B.World J Gastroenterol，2007，13（4）:525-531.

[18]SebastianiG，HalfonP，CasteraL，etal.SAFEbiopsy:A validated methodfor large-scale stagingof liver fibrosis in chronic hepatitis C.Hepatology，2009，49（6）:1821-1827.

[19]Naveau S，Gaude G，Asnacios A，et al.Diagnostic and prognostic values of noninvasive biomarkers of fibrosis in patients with alcoholic liver disease.Hepatology，2009，49（1）:97-105.

[20]Guha IN，Parkes J，Roderick P，et al.Noninvasive markers of fibrosisinnonalcoholicfattyliverdisease:Validatingthe European Liver Fibrosis Panel and exploring simple markers. Hepatology，2008，47（2）:455-460.

[21]Mayo MJ，Parkes J，Adams-Huet B，et al.Prediction of clinical outcomes in primary biliary cirrhosis by serum enhanced liver fibrosis assay.Hepatology，2008，48（5）:1549-1557.

[22]Crawford DH，Murphy TL，Ramm LE，et al.Serum hyaluronic acidwithserumferritinaccuratelypredictscirrhosisand reduces the need for liver biopsy in C282Y hemochromatosis. Hepatology，2009，49（2）:418-425.

[23]XU MY，QU Y，JIA XF，et al.Serum proteomic MRM identify peptideions of transferrin as new fibrosis markers in chronic hepatitis B.Biomed Pharmacother，2013，67（7）:561-567.

[24]Qu Y，Gao CF，Zhou K，et al.Serum N-glycomic markers in combinationwithpanelsimprovesthediagnosisofchronic hepatitis B.Ann Hepatol，2012，11（2）:202-212.

[25]Xu MY，Jia XF，Qu Y，et al.Serum dihydroxyacetone kinase peptide m/z 520.3 as predictor of disease severity in patients with compensated chronic hepatitis B.J Transl Med，2013，11（9）:234.

[26]VenugopalSK，JiangJ，KimTH，etal.Liverfibrosiscauses downregulationofmiRNA-150andmiRNA-194inhepatic stellate cells，and their overexpression causes decreased stellate cellactivation.AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol，2010，298（1）:G101-G106.

[27]GuoCJ，PanQ，LiDG，etal.miR-15bandmiR-16are implicatedinactivationoftherathepaticstellatecell:An essential role for apoptosis.J Hepatol，2009，50（4）:766-778.

[28]Murakami Y，Toyoda H，Tanaka M，et al.The progression of liver fibrosis is related with overexpression of the miR-199 and 200 families.PLoS One，2011，6（1）:e16081.

[29]Ninomiya M，Kondo Y，F(xiàn)unayama R，et al.Distinct microRNAs expressionprofilebiliarycirrhosisandevaluationof miR-505-3PandmiR-197-3pasnovelbiomarkers.PLoS One，2013，8（6）:e66086.

[30]徐銘益，張啟迪，李鄭紅，等.慢性乙型肝炎肝纖維化患者肝組織基因表達(dá)譜和功能分類.肝臟，2013，18（7）：435-438.

[31]Schuppan D，Pinzani M.Anti-fibrotic therapy:lost in translation？J Hepatol，2012，56（1）:66-77.

[32]Trepo E，Potthoff A，Pradat P，et al.Role of a cirrhosis risk score for the early prediction of fibrosis progression in hepatitis C patients with minimal liver disease.J Hepatol，2011，55（1）:38-44. [33]Estrabaud E，Vidaud M，Marcellin P，et al.Genomics and HCV infection:progressionoffibrosisandtreatmentresponse.J Hepatol，2012，57（5）:1110-1125.

[34]Dongiovanni P，Donati B，F(xiàn)ares R，et al.PNPLA3 I148M polymorphism and progressive liver disease.World J Gastroenterol，2013，19（41）:6969-6978.

[35]Hannivoort RA，Hernandez-Gea V，F(xiàn)riedman SL.Genomics and proteomics in liver fibrosis and cirrhosis.Fibrogen Tissue Rep，2012，5（1）:1.

（收稿：2015-11-03）

（本文編輯：陳從新）

Serologic diagnosis of liver fibrosis

Liu Ting，Xu MingYi.
Department of Gastroenterology，F(xiàn)irst People’s Hospital，Jiao Tong University，Shanghai 200080

10.3969/j.issn.1672-5069.2016.01.036

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（No.81570547）；國(guó)家科技部十二五科研項(xiàng)目（No.2012ZX10002007-001-040& 2013ZX10002004-002-003）；醫(yī)院優(yōu)秀青年人才計(jì)劃項(xiàng)目（No. 061405）

200080上海市交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院消化科

劉婷，女，碩士研究生。主要從事肝纖維化、肝硬化和肝癌的臨床和基礎(chǔ)研究。E-mail:372778250@qq.com

徐銘益,E-mail:xumingyi2014@163.com