雙歧三聯(lián)活菌對肝硬化患者腸粘膜屏障功能及細胞免疫功能的影響

郭 梅 李雪梅

雙歧三聯(lián)活菌對肝硬化患者腸粘膜屏障功能及細胞免疫功能的影響

郭 梅 李雪梅

目的觀察雙歧三聯(lián)活菌輔助治療對肝硬化患者腸粘膜屏障功能及細胞免疫功能的影響。方法60例肝硬化患者入院后均予以對癥支持治療，根據(jù)數(shù)字表法隨機分為2組，對照組(n=30)僅采用對癥支持治療，觀察組(n=30)在對照組治療基礎(chǔ)上加用雙歧三聯(lián)活菌膠囊治療。比較兩組治療前后血漿內(nèi)毒素、降鈣素原(PCT)、二胺氧化酶(DAO)等腸粘膜屏障功能指標及CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等細胞免疫功能指標的變化。結(jié)果兩組治療后血漿內(nèi)毒素及PCT、DAO等腸粘膜屏障功能指標的表達水平較治療前均明顯下降(P＜0.05)，且觀察組較對照組降低更為顯著(P＜0.05);兩組治療后CD4+等T淋巴細胞亞群水平及CD4+/CD8+均明顯升高(P＜0.05)，且觀察組較對照組升高更為顯著(P＜0.05)，而兩組治療前后CD8+等T淋巴細胞亞群水平變化比較無顯著差異性(P＞0.05)。結(jié)論雙歧三聯(lián)活菌可降低肝硬化患者血漿內(nèi)毒素水平，恢復腸道黏膜屏障功能，增強細胞免疫功能，值得臨床推廣應(yīng)用。

雙歧三聯(lián)活菌;肝硬化;腸粘膜屏障功能;細胞免疫

多數(shù)肝硬化患者發(fā)展至晚期階段常易出現(xiàn)自發(fā)性細菌性腹膜炎，分析原因與腸黏膜通透性程度顯著性升高，腸黏膜屏障保護系統(tǒng)受到嚴重損害，以及免疫防御系統(tǒng)能力明顯下降之間存在著密切的相關(guān)性關(guān)系［1－2］。近些年較多研究證實［3－4］，雙歧三聯(lián)活菌等微生態(tài)制劑具有屏障保護、營養(yǎng)支持、改善肝腸臟器生理功能、增強機體免疫防御能力及抗腫瘤細胞等多種藥理作用。因此本研究擬觀察雙歧三聯(lián)活菌輔助治療對肝硬化患者腸粘膜屏障功能及細胞免疫功能的影響?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料

60例肝硬化患者均為本院感染科和消化內(nèi)科2014年6月－2016年1月期間住院治療的患者，根據(jù)既往病史、影像學檢查(肝臟CT或磁共振)及實驗室檢查均符合相關(guān)診斷［5］。上述患者根據(jù)數(shù)字表法隨機分為2組，對照組(n=30):男24例，女6例，平均年齡為(52.1±8.2)歲，肝硬化病程為(9.7±3.1)年，Child－Pugh分級為B級20例，C級10例，病原類型為乙肝20例，丙肝7例，酒精性3 例;觀察組(n=30):男25例，女5例，平均年齡為(51.2±8.5)歲，肝硬化病程為(9.4±3.6)年，Child－Pugh分級為B級18例，C級12例，病原類型為乙肝21例，丙肝5例，酒精性4例。兩組在性別、年齡、肝硬化病程、Child－Pugh分級及病原類型等方面比較無顯著差異性(P＞0.05)。所有患者及家屬均知曉本研究內(nèi)容并簽署知情同意書，本研究方案已通過醫(yī)院倫理委員會批準。

1．2 治療方法

所有患者入院后均予以護肝降酶(異甘草酸鎂150 mg+5%葡萄糖溶液250 mL，1次/日)、利尿(呋塞米20 mg，靜推，1次/日)、通便(乳果糖口服液15 mL，口服，2次/日)、糾正機體水電解質(zhì)酸堿平衡紊亂、靜脈滴注補充20%人血白蛋白50 mL及維生素(脂溶性維生素，維生素C)等對癥支持治療，觀察組在此治療基礎(chǔ)上加用雙歧三聯(lián)活菌膠囊，2次/日，2～4粒/次，口服，兩組療程均為4周。比較兩組治療前后血漿內(nèi)毒素、腸粘膜屏障功能及細胞免疫功能指標的變化。

1．3 檢測方法

1．3．1 腸黏膜屏障功能檢測 采用化學發(fā)光法檢測血清降鈣素原(PCT)表達水平(試劑盒購自武漢佰奧達生物科技有限公司)，采用活性比色法檢測血清二胺氧化酶(DAO)表達水平(試劑盒購自廈門慧嘉生物科技有限公司)，由專人按照試劑盒說明書進行檢測。

1．3．2 血清內(nèi)毒素表達水平檢測 采用鱟試劑動態(tài)比濁法(試劑盒購自湛江海洋生物制品廠)對兩組患者治療前后血清內(nèi)毒素表達水平進行檢測，最低測定限為0．03 EU/mL。

1．3．3 細胞免疫功能檢測 采用流式細胞儀檢測CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T淋巴細胞亞群指標對兩組患者治療前后細胞免疫功能變化予以評估。

1．4 統(tǒng)計學方法

本研究數(shù)據(jù)資料均采用SPSS 16．0統(tǒng)計學軟件予以分析和處理，計量資料使用±s表示，兩組比較采用t檢驗，計數(shù)資料使用率表示，兩組比較采用卡方檢驗，以P＜0．05表示有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2．1 兩組治療前后血漿內(nèi)毒素及腸粘膜屏障功能變化比較

兩組治療后血漿內(nèi)毒素及PCT、DAO等腸粘膜屏障功能指標的表達水平較治療前均明顯下降(P＜0．05)，且觀察組較對照組降低更為顯著(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組治療前后血漿內(nèi)毒素及腸粘膜屏障功能變化比較 (n=30，±s)

表1 兩組治療前后血漿內(nèi)毒素及腸粘膜屏障功能變化比較 (n=30，±s)

注:與治療前比較，1)P＜0．05;兩組治療后比較，2)P＜0．05

組別 內(nèi)毒素(EU/mL) PCT(ng/mL) DAO(KU/L)對照組治療前 0．38±0．13 6．12±1．85 10．02±2．79治療后 0．28±0．081) 4．61±1．441) 8．34±1．821)觀察組治療前 0．39±0．12 6．16±1．77 9．91±2．66治療后 0．21±0．071)2) 3．01±1．141)2) 6．14±1．351)2)

2．2 兩組治療前后細胞免疫功能變化比較

兩組治療后CD4+等T淋巴細胞亞群水平及CD4+/CD8+均明顯升高(P＜0．05)，且觀察組較對照組升高更為顯著(P＜0．05)，而兩組治療前后CD8+等T淋巴細胞亞群水平變化比較無顯著差異性(P＞0．05)，見表2。

表2 兩組治療前后細胞免疫功能變化比較 (n=30，±s)

表2 兩組治療前后細胞免疫功能變化比較 (n=30，±s)

注:與治療前比較，1)P＜0．05;兩組治療后比較，2)P＜0．05

對治療前 29．52±4．31 23．53±3．82 1．27±0．21治療后 33．9±4．221) 24．70±3．95 1．38±0．281)觀察組治療前 29．71±4．14 23．22±3．74 1．26±0．20治療后 37．80±4．521)2)23．71±4．18 1．62±0．251)2)

3 討論

雙歧三聯(lián)活菌制劑是一種臨床常用的微生態(tài)制劑，含有長型雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌等活菌成分，可有效調(diào)節(jié)肝硬化患者腸道菌群平衡狀態(tài)，減少腸道內(nèi)毒素的合成和分泌，其作用機制主要為:①有效降低腸道內(nèi)環(huán)境的PH值及通透性程度，提高腸道清除毒素的功能，抑制腸道對毒素的吸收［6－7］;②生物拮抗作用:長型雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌等活菌可與腸道其他厭氧菌完全覆蓋腸道黏膜組織的表面，從而形成一種生物屏障保護系統(tǒng)，通過大量吸收營養(yǎng)物質(zhì)而對致病菌產(chǎn)生拮抗作用［8］;③免疫防御保護功能:雙歧三聯(lián)活菌制劑可促進單核－巨噬細胞合成和分泌釋放大量的炎癥介質(zhì)細胞因子，進而刺激腸道黏液素的大量產(chǎn)生，同時還可顯著性增強腸道免疫防御功能，進而拮抗作用于致病菌［9］;④抑制腸道對毒素的吸收:迅速恢復腸黏膜屏障保護系統(tǒng)，從而明顯降低腸道對內(nèi)毒素的吸收［10］。林小萍等［11］研究認為恩替卡韋聯(lián)合雙歧三聯(lián)活菌膠囊比單獨應(yīng)用恩替卡韋可更顯著地改善乙肝肝硬化患者的腹脹癥狀。

PCT是無生理學活性功能的降鈣素前肽，當腸黏膜屏障保護系統(tǒng)受到嚴重損害，可分泌釋放大量內(nèi)毒素，進而導致PCT合成分泌量迅速升高，血清PCT表達水平顯著性升高，故血漿PCT表達水平可準確反映腸粘膜屏障功能損傷的嚴重程度［10］。DAO則是一種腸粘膜上皮細胞內(nèi)酶，當腸粘膜上皮受到嚴重損害時，DAO大量分泌和釋放入腸間隙和血液循環(huán)系統(tǒng)中，進而使得血清DAO表達水平迅速升高，故血漿DAO表達水平也可準確反映腸粘膜組織結(jié)構(gòu)與生理功能狀態(tài)的實驗室指標［11］。因此本研究選擇PCT、DAO作為判斷腸粘膜屏障功能狀態(tài)的實驗室指標，本研究結(jié)果顯示，觀察組血漿內(nèi)毒素及PCT、DAO等腸粘膜屏障功能指標較對照組降低更為顯著(P＜0．05)，由此可知雙歧三聯(lián)活菌可明顯減少內(nèi)毒素產(chǎn)生和吸收，有效改善腸道黏膜屏障保護功能。

近些年較多研究還發(fā)現(xiàn)［12－13］，雙歧三聯(lián)活菌膠囊本身還能激活腸黏膜上的免疫細胞，增強其腸黏膜局部防御功能。本研究結(jié)果顯示，觀察組CD4+等T淋巴細胞亞群水平及CD4+/CD8+較對照組升高更為顯著(P＜0．05)，提示雙歧三聯(lián)活菌可明顯糾正肝硬化患者T淋巴細胞亞群紊亂現(xiàn)象，明顯增加其細胞免疫功能。由此可知，雙歧三聯(lián)活菌可降低肝硬化患者血漿內(nèi)毒素水平，恢復腸道黏膜屏障功能，增強細胞免疫功能，值得臨床推廣應(yīng)用。

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R575．2

A

10．3969/j．issn．1671－332X．2016．09．009

郭 梅 李雪梅:武漢科技大學附屬天佑醫(yī)院 湖北武漢 430064

李雪梅