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    甲殼類疾病及其防治技術(shù)(1)
    ——蝦類疾?。ㄒ唬?/h1>
    2016-03-28 15:30:11汪建國(guó)
    漁業(yè)致富指南 2016年14期
    關(guān)鍵詞:蝦池對(duì)蝦淋巴

    ○汪建國(guó)

    (中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所研究員博導(dǎo))

    甲殼類疾病及其防治技術(shù)(1)
    ——蝦類疾?。ㄒ唬?/p>

    ○汪建國(guó)

    (中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所研究員博導(dǎo))

    (一)病毒性疾病

    1.白斑綜合征俗稱白斑病,是對(duì)蝦的嚴(yán)重傳染性疫病,20世紀(jì)90年代以來(lái)一直嚴(yán)重威脅著全世界對(duì)蝦的養(yǎng)殖安全。該病的特點(diǎn)是感染率高、發(fā)病急、死亡率高、死亡速度快。病蝦活力弱,部分瀕死蝦頭胸甲部位出現(xiàn)白色斑點(diǎn),白斑綜合征因此而得名,但亦可不出現(xiàn)白斑而蝦體變紅。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為一類動(dòng)物疫病,OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。

    【病原體】白斑綜合征病毒(Whitespot syndromevirus,WSSV)。

    【流行與危害】20世紀(jì)90年代初,該病首先出現(xiàn)于日本及我國(guó)臺(tái)灣、廣東、福建等地,隨后擴(kuò)散并遍及亞洲主要對(duì)蝦養(yǎng)殖國(guó)家和地區(qū)。幾年后蔓延到南北美洲,造成全球性的對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)損失。一般蝦池發(fā)病后2~3天,最多不足1周時(shí)間可致全池死亡。

    白斑綜合征病毒的宿主范圍非常廣泛。已知40多種對(duì)蝦和非對(duì)蝦甲殼動(dòng)物可感染該病毒,其中中國(guó)明對(duì)蝦最為易感,其他可被感染致病或成為病毒攜帶者的對(duì)蝦科生物有:斑節(jié)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、墨吉對(duì)蝦、長(zhǎng)毛對(duì)蝦、印度對(duì)蝦、桃紅對(duì)蝦、細(xì)角對(duì)蝦、白對(duì)蝦、褐對(duì)蝦、刀額新對(duì)蝦等。另外,羅氏沼蝦、海南沼蝦、埃氏沼蝦、藍(lán)氏沼蝦、脊尾白蝦、鼓蝦、克氏原螯蝦、哈氏美人蝦、龍蝦、蝦蛄、三疣梭子蟹、鋸緣青蟹、中華絨螯蟹、天津厚蟹、肉球近方蟹、日本大眼蟹、鱟等甲殼類動(dòng)物等也可被感染。

    在自然感染過(guò)程中,經(jīng)口和鰓感染是傳播的主要途徑,對(duì)蝦在幼體期易經(jīng)口和鰓感染從而使蝦苗攜帶病毒。此外,發(fā)病對(duì)蝦精巢、精莢、卵巢中都能檢測(cè)到病毒,因此受精卵可被污染從而造成垂直傳播。由于多種甲殼動(dòng)物都可攜帶該病毒,自然環(huán)境中病毒極易在動(dòng)物個(gè)體間進(jìn)行傳播,使白斑病的防治工作變得較為困難。

    【癥狀及病理變化】發(fā)病蝦厭食,空胃,行動(dòng)遲緩,彈跳無(wú)力,靜臥不動(dòng)或在水面兜圈。頭胸甲易剝離,殼與真皮分離,部分患病對(duì)蝦在頭胸和最后的尾節(jié)甲殼內(nèi)側(cè)可見(jiàn)白色斑點(diǎn);患病中國(guó)明對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦體色發(fā)紅,而患病斑節(jié)對(duì)蝦在瀕臨死亡時(shí)則顯示變藍(lán)現(xiàn)象。血淋巴混濁、不凝固,血淋巴細(xì)胞減少。甲殼上白斑的主要成分是碳酸鈣,是由于白斑綜合征病毒在上皮細(xì)胞內(nèi)的迅速增殖導(dǎo)致鈣、磷比顯著增高,使甲殼上形成了碳酸鈣的沉積。

    病毒侵害的主要組織和器官是甲殼下上皮組織、胃及后腸上皮組織、結(jié)締組織、觸角腺、造血組織、鰓、血淋巴器官。胃部壞死最嚴(yán)重,肝胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞、中腸上皮細(xì)胞、肌纖維細(xì)胞不被感染。

    感染早期,被侵害組織的少量細(xì)胞核略微膨大,核中出現(xiàn)嗜酸性著色區(qū)域,核仁邊移;隨著感染時(shí)間延續(xù),細(xì)胞核內(nèi)嗜酸性著色很快轉(zhuǎn)變?yōu)榇蟮氖葔A性包涵體,使細(xì)胞核顯著膨大,染色質(zhì)只在細(xì)胞核邊沿隱約可見(jiàn),大量細(xì)胞被侵染。

    病毒粒子在細(xì)胞核中復(fù)制和裝配,成熟病毒粒子聚集于細(xì)胞核中,最后細(xì)胞解體,病毒粒子再感染周圍細(xì)胞。在肌纖維之間的結(jié)締組織及肝胰腺血竇的血細(xì)胞中也可見(jiàn)到病毒粒子。甲殼內(nèi)面的白點(diǎn)在顯微鏡下可見(jiàn)呈重瓣的花朵狀,外圍較透明,花紋較清楚,中部不透明。

    【診斷方法】在本病嚴(yán)重暴發(fā)流行時(shí),可根據(jù)其發(fā)病史、臨床特征及病理特征作出初步診斷,最后確診需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查。診斷時(shí)應(yīng)注意與桃拉綜合征、細(xì)菌性白斑病相區(qū)別。本病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要是通過(guò)采集急性病例的鰓、胃、附肢或其他上皮組織,進(jìn)行下列檢查。

    (1)樣品采集采集150尾蝦,按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體,幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部,非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1~0.5g。

    樣品采集的要求參照SC/T7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分:壓片顯微鏡檢查法)》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。

    (2)組織及病理學(xué)檢查

    ①新鮮組織的快速染色法:取新鮮的蝦組織做成涂片,用“臺(tái)盼藍(lán)-伊紅”染色法(T-E染色法)染色后,檢查受感染細(xì)胞的典型變化。該方法適用于在現(xiàn)場(chǎng)或診斷實(shí)驗(yàn)室對(duì)患病瀕死的對(duì)蝦仔蝦、幼蝦或成蝦進(jìn)行快速診斷。

    ②組織病理學(xué)診斷:經(jīng)HE染色后可清晰地觀察到各種不同組織結(jié)構(gòu)的病理變化。HE染色適用于發(fā)病對(duì)蝦或其他敏感宿主的初步診斷和對(duì)懷疑染病宿主的診斷,不適于非感染性攜帶病毒樣品的病毒檢測(cè)。

    ③電鏡診斷:電鏡切片可在病蝦鰓、胃、淋巴器官、皮下組織等的細(xì)胞核內(nèi)觀察到病毒粒子,通過(guò)提純負(fù)染,電鏡下可觀察到完整的病毒粒子或無(wú)囊膜的核衣殼從而進(jìn)行確診。

    (3)病原學(xué)鑒定

    ①生物診斷法:該法采用白斑綜合征病毒指示器-SPF凡納濱對(duì)蝦幼蝦進(jìn)行試驗(yàn)。將采集的可疑蝦附肢或蝦頭尖與TN緩沖液混合勻漿,離心上清液用2%無(wú)菌生理鹽水按1:10的比例稀釋,對(duì)指示蝦進(jìn)行肌內(nèi)注射(IM),然后進(jìn)行臨床觀察和組織病理學(xué)診斷。

    ②核酸探針檢測(cè)法:采用白斑綜合征病毒特異性的非放射性的地高辛標(biāo)記探針進(jìn)行,敏感性高于傳統(tǒng)的病理組織學(xué)診斷法。核酸探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)法適用于對(duì)蝦的成蝦、幼蝦、仔蝦、幼體和受精卵的活體、冰鮮或冰凍產(chǎn)品和其他甲殼動(dòng)物感染病毒的篩查、臨床病癥的確診。

    ③PCR檢測(cè)法:通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),檢測(cè)病毒的特定基因。適用于對(duì)蝦各種樣品、環(huán)境生物和餌料生物的各種樣品以及其他非生物樣品中WSSV的定性檢測(cè),具有高靈敏度和高特異性,適用于病原篩查和疾病確診。

    ④單克隆抗體檢測(cè)法:應(yīng)用特異性的病毒單克隆抗體,采用斑點(diǎn)免疫印跡、免疫熒光和ELISA等方法進(jìn)行診斷。

    【防治方法】

    (1)預(yù)防選擇健康蝦作為親蝦,培養(yǎng)健康蝦苗。受精卵用含氯漂粉精或碘伏(聚乙烯砒咯烷酮碘)浸洗或用過(guò)濾海水并經(jīng)紫外線消毒后沖洗5分鐘。育苗用水應(yīng)過(guò)濾和消毒,育苗期間切忌溫度過(guò)高和濫用藥物。

    做好養(yǎng)殖池塘的清淤、消毒及培水工作。蝦池在養(yǎng)蝦前盡可能徹底清淤,然后進(jìn)行消毒。用生石灰或含氯消毒劑均勻潑灑全池,消毒后應(yīng)曝曬1周左右,然后進(jìn)水。養(yǎng)殖過(guò)程中合理用水、培好水色、保持優(yōu)良水質(zhì)。在養(yǎng)蝦場(chǎng)附近有蝦病流行時(shí),停止從海區(qū)向蓄水池注水,應(yīng)將蝦池中的水與蓄水池中的水循環(huán)使用。養(yǎng)蝦池中適當(dāng)混養(yǎng)一些攝食浮游生物或底棲藻類的魚或貝類,有利于防止水質(zhì)過(guò)肥,起凈化水質(zhì)的作用。

    放養(yǎng)密度要合理。對(duì)蝦的放養(yǎng)密度應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)厮?、海域環(huán)境、蝦池的結(jié)構(gòu)和設(shè)備、生產(chǎn)技術(shù)、管理經(jīng)驗(yàn)、蝦苗的規(guī)格、飼料的質(zhì)和量等條件而定。飼養(yǎng)管理過(guò)程中要注意水質(zhì)及各種理化因子的變化,保持水體的相對(duì)穩(wěn)定;堅(jiān)持巡塘,定期檢查,正確診斷,積極預(yù)防。在養(yǎng)蝦池中接種和培養(yǎng)光合細(xì)菌凈化水質(zhì),投喂能提高對(duì)蝦細(xì)胞免疫力的中草藥和免疫促進(jìn)劑,也是目前常用的防治途徑之一。

    (2)控制對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫、掌握流行病學(xué)情況。可通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。

    (3)處理苗種繁殖場(chǎng)內(nèi)WSSV檢疫呈陽(yáng)性的親蝦和苗種應(yīng)全部撲殺;病毒陽(yáng)性的種用和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無(wú)害化處理,禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

    2.桃拉綜合征

    俗稱“紅尾病”,是一種嚴(yán)重傳染性對(duì)蝦疾病,急性期以蝦體變紅(蝦紅素增多)、軟殼,過(guò)渡期以角質(zhì)上皮不規(guī)則黑化為特征。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。

    【病原體】桃拉綜合征病毒(Taura syndromevirus,TSV)。

    【流行與危害】該病主要侵害凡納濱對(duì)蝦和細(xì)角對(duì)蝦,對(duì)蝦科濱對(duì)蝦屬所有成員均對(duì)本病易感,中國(guó)明對(duì)蝦也對(duì)本病易感;凡納濱對(duì)蝦除卵、受精卵和蝦蚴外,仔蝦、幼蝦及成蝦等各期均對(duì)本病易感,主要感染14~40日齡、體重0.05~5g以下的仔蝦,部分稚蝦或成蝦也容易被感染。對(duì)蝦科其他屬成員經(jīng)直接攻毒也可感染,但一般不表現(xiàn)癥狀。細(xì)角對(duì)蝦選擇系對(duì)TSV(基因1型或A抗原型)有抵抗力。

    其他已報(bào)道TSV的自然感染或試驗(yàn)感染宿主有白對(duì)蝦、南方對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦、刀額新對(duì)蝦、中國(guó)明對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、褐對(duì)蝦和桃紅對(duì)蝦。

    目前,本病廣泛流行于美洲和東南亞對(duì)蝦養(yǎng)殖區(qū)。該病1992年首次發(fā)現(xiàn)于厄瓜多爾桃拉河地區(qū),之后隨染疫仔蝦和親蝦貿(mào)易迅速傳播到厄瓜多爾、秘魯、哥倫比亞、洪都拉斯、危地馬拉、薩爾瓦多、巴西、尼加拉瓜、伯利茲、墨西哥、美國(guó)等美洲各大蝦類養(yǎng)殖區(qū)。1999年中國(guó)臺(tái)北從中南美洲進(jìn)口凡納濱對(duì)蝦而傳人本病,此后,隨親蝦和仔蝦的貿(mào)易傳播到中國(guó)大陸、泰國(guó)、馬來(lái)西亞、印度尼西亞等地。

    該病發(fā)病急,死亡率高。一般發(fā)病蝦池自發(fā)現(xiàn)病蝦至對(duì)蝦拒食人工飼料僅5~7天,10天左右大部分對(duì)蝦死亡。部分蝦池采取積極消毒措施后轉(zhuǎn)為慢性病,逐日死亡,至養(yǎng)成收獲時(shí)成活率一般不超過(guò)20%。本病主要通過(guò)健康蝦攝食病蝦、帶病毒水源等方式水平傳播;也可經(jīng)海鷗等海鳥(niǎo)、劃蝽科類水生昆蟲攜帶病毒傳播。攜帶病毒親蝦也可能經(jīng)垂直途徑傳播到后代,但目前尚無(wú)可靠證據(jù)。持續(xù)感染蝦和終生帶毒蝦是傳染源;染疫存活凡納濱對(duì)蝦和細(xì)角對(duì)蝦可終生帶毒成為疾病傳播者。

    【癥狀及病理變化】

    (1)癥狀根據(jù)病程和癥狀,桃拉綜合征可分為急性期、過(guò)渡(恢復(fù))期和慢性期3個(gè)階段。

    ①急性期:蝦紅素增多,蝦體全身呈淡紅色,尾扇和游泳足呈鮮紅色,因此蝦民稱之為“紅尾病”。取尾扇發(fā)紅的病蝦,用10倍放大鏡仔細(xì)觀察細(xì)小附肢(如末端尾肢或腹肢)的表皮上皮,可以看到病灶處的上皮壞死。急性感染蝦常死于蛻皮期間,處于脫殼后期的病蝦以軟殼、空腹為特征,瀕死蝦常浮于水面或池體邊緣。

    ②過(guò)渡(恢復(fù))期:介于急性期與慢性期之間,病程極短,以病蝦角質(zhì)層上皮多處出現(xiàn)不規(guī)則黑色斑點(diǎn)為特征。在過(guò)渡期,典型的急性期表皮損傷在數(shù)量和嚴(yán)重程度上都有所減少或降低,病灶壞死處聚集了大量血細(xì)胞及其滲出物。大量血細(xì)胞隨后開(kāi)始黑化,進(jìn)而導(dǎo)致病蝦角質(zhì)層上皮呈現(xiàn)不規(guī)則的黑色斑點(diǎn)。

    ③慢性期:成功蛻皮的病蝦,從過(guò)渡期轉(zhuǎn)入慢性期,一般無(wú)明顯的臨床癥狀,但對(duì)正常的環(huán)境應(yīng)激(如突然降低鹽度)明顯不如未染疫蝦。有的因病毒在淋巴器官持續(xù)感染而成為終生帶毒者。

    (2)病理特征

    ①急性期:全身角質(zhì)層上皮、附肢、鰓、后腸、前腸(食管、前后胃室)可見(jiàn)多灶性壞死;有時(shí)在角質(zhì)層皮下結(jié)締組織細(xì)胞,以及靠近感染角質(zhì)層上皮的條紋肌纖維基質(zhì)也可見(jiàn)感染灶。嚴(yán)重的病例,觸角腺管狀上皮也遭破壞。多灶性表皮壞死的典型癥狀包括多個(gè)感染細(xì)胞聚集在一起、細(xì)胞質(zhì)嗜酸性增加、細(xì)胞核固縮或崩解。

    ②過(guò)渡(恢復(fù))期:該期病理特征是桃拉綜合征過(guò)渡期的典型特征。在HE染色的組織病理切片上,這樣的病灶表現(xiàn)為角質(zhì)層被侵蝕,暴露的表皮血細(xì)胞和上皮被大量弧菌感染和侵襲。在桃拉綜合征過(guò)渡期,對(duì)蝦淋巴器官的組織切片在HE染色后觀察,可能外觀正常。但如果應(yīng)用TSV特異性的cDNA探針對(duì)這些切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色(ISH),就可以觀察到大量的病毒聚集在淋巴小管的外周實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)。

    ③慢性期:該期病蝦的組織病理變化不明顯,僅可見(jiàn)大量的“類淋巴器官球體”(LOS)。類淋巴器官球體可能與成對(duì)淋巴器官的主體相連,或脫離形成異位的類淋巴器官體,位于血腔的局部區(qū)域(如心、鰓或皮下結(jié)締組織中等)。類淋巴器官球體由淋巴器官細(xì)胞和血淋巴細(xì)胞呈球形堆積而成,但從其球形特征以及缺乏中心管(典型的淋巴器官小管),可與正常淋巴器官進(jìn)行區(qū)別。應(yīng)用TSV特異性的cDNA探針進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,這些“類淋巴器官球體”的部分細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng),而其他靶組織細(xì)胞呈陰性反應(yīng)。

    【診斷方法】

    (1)初步診斷僅急性期的病蝦表現(xiàn)出行為的改變。急性期病蝦呈現(xiàn)缺氧狀態(tài),常聚集在池塘邊緣或水面等溶氧高的地方,從而吸引大量的海鳥(niǎo)捕食。因此由垂死對(duì)蝦吸引來(lái)的海鳥(niǎo)在蝦池上空大量聚集,??纱砦r池內(nèi)暴發(fā)了嚴(yán)重的流行?。ㄍǔJ翘依C合征或白斑綜合征)。通??梢砸罁?jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征對(duì)急性期桃拉綜合征做出初步診斷:病蝦蝦體全身淡紅色、尾扇和游泳足鮮紅色,游泳足或尾足邊緣處上皮呈灶性壞死,常死于蛻皮期間,表現(xiàn)為軟殼、空腹等特征。

    (2)樣品采集采集病蝦10尾,健康蝦150尾,按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中,對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體,幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部,非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1~0.5g。

    樣品采集的要求參照SC、T7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分:壓片顯微鏡檢查法)》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。

    (3)組織和病理學(xué)檢查依據(jù)前述病蝦的組織病理特征對(duì)該病作出診斷。該方法適用于桃拉綜合征的急性期、過(guò)渡期和慢性期患病對(duì)蝦的確診和對(duì)桃拉綜合征的篩查,不適用于對(duì)潛伏性感染或非感染性攜帶病毒標(biāo)本進(jìn)行疾病診斷。過(guò)渡期病蝦角質(zhì)層上皮多處出現(xiàn)不規(guī)則黑化斑,血細(xì)胞聚集,軟殼及蝦紅素不明顯。慢性期一般無(wú)明顯臨床癥狀。

    (4)實(shí)驗(yàn)室診斷和病原學(xué)鑒定

    ①生物診斷法:采用SPF凡納濱對(duì)蝦幼蝦作為桃拉綜合征病毒指示器,對(duì)疑似感染蝦進(jìn)行生物檢測(cè),具體方法有口服法和注射法??诜ǎ涸摲ū容^容易操作,可用較小的SPF凡納濱對(duì)蝦幼蝦進(jìn)行試驗(yàn)。指示蝦隨機(jī)分為兩組,其中感染組以剁碎的疑似感染蝦樣品飼喂,對(duì)照組以正常飼料飼喂,然后對(duì)兩組蝦進(jìn)行臨床觀察和大體病理、組織病理學(xué)診斷。注射法:將采集的可疑蝦頭或全蝦樣品與TN緩沖液或2%的無(wú)菌生理鹽水按1:2或1:3混合勻漿,離心取上清作為接種物,對(duì)指示蝦進(jìn)行肌內(nèi)注射,然后進(jìn)行臨床觀察和外觀癥狀、組織病理學(xué)診斷。注射接種法宜采用較大的指示蝦進(jìn)行。

    ②免疫檢測(cè)技術(shù):

    斑點(diǎn)酶免疫反應(yīng)(DBI):該法以感染蝦或SPF蝦血淋巴制取純化病毒,作為檢測(cè)抗原,點(diǎn)加于MA-HA-N45反應(yīng)板表面,干燥后,以磷酸鹽緩沖液和含山羊血清與酪蛋白的吐溫20進(jìn)行阻斷。用單抗TSVMAb1A1進(jìn)行斑點(diǎn)酶免疫反應(yīng)。

    其他抗體檢測(cè)方法:包括利用TSV MAb1A1單克隆抗體的間接熒光抗體法(IFAT)和免疫組化法(IHC)等。這些方法適用于組織印片、冰凍切片和脫蠟的固定組織樣品及Davidson'sAFA固定的組織樣品中的病毒檢測(cè)。

    ③分子檢測(cè)技術(shù):目前已開(kāi)發(fā)有原位雜交實(shí)驗(yàn)(ISH)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real-timequantitativeRT-PCR)等方法。原位雜交實(shí)驗(yàn)是采用非放射性的以地高辛標(biāo)記的eDNA探針進(jìn)行,敏感性高于傳統(tǒng)的病理組織學(xué)診斷方法。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法適用于對(duì)蝦的各生活期、非對(duì)蝦的生物和底泥等樣品中TSV帶毒情況的定性檢測(cè),以進(jìn)行病原篩查和疾病的確診,但該法單獨(dú)使用時(shí)不適用于對(duì)病毒量、存在狀態(tài)(玷污、攜帶和感染狀態(tài))或感染活性等的估測(cè)以及宿主感染程度的評(píng)估。實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法具快速、特異和敏感優(yōu)點(diǎn),對(duì)TSV基因組目標(biāo)序列檢測(cè)靈敏度大約為100個(gè)拷貝。

    【防治方法】

    (1)預(yù)防進(jìn)行水體消毒,每10~15天(特別是在進(jìn)水、換水后)應(yīng)及時(shí)用漂白粉等含氯消毒劑消毒。調(diào)控水質(zhì),保持整蝦池水質(zhì)平衡及穩(wěn)定。蝦池pH一般維持在8.0~8.8,氨氮0.5mg/L以下,透明度維持在30~60cm。在養(yǎng)殖過(guò)程中,定期使用水質(zhì)及底質(zhì)改良劑,改良養(yǎng)殖池底質(zhì)。特別是在養(yǎng)殖中后期,應(yīng)用光合細(xì)菌、硝化細(xì)菌等微生態(tài)制劑的改良劑進(jìn)行水質(zhì)和底質(zhì)改良。配合使用維生素、聚維酮碘等進(jìn)行預(yù)防。也可以在飼料中添加生物活性物質(zhì)或免疫促進(jìn)劑,增強(qiáng)蝦體非特異性免疫功能。

    (2)控制可通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病的暴發(fā)。對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)應(yīng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度;加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫,掌握其流行情況。

    (3)處理TSV檢疫陽(yáng)性結(jié)果的親蝦和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無(wú)害化處理,禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

    (未完待續(xù))

    (通聯(lián):430072,中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所武漢市武昌東湖南路7號(hào))

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