甲殼類疾病及其防治技術(shù)（2）
——蝦類疾?。ǘ?/h1>
2016-03-28 14:31:12汪建國(guó)
漁業(yè)致富指南 2016年15期
○汪建國(guó)
（中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所 研究員 博導(dǎo)）
甲殼類疾病及其防治技術(shù)（2）
——蝦類疾?。ǘ?/p>
○汪建國(guó)
（中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所研究員 博導(dǎo)）
3.黃頭病
對(duì)蝦傳染性疾病。該病急性感染的對(duì)蝦在染病2～4天時(shí)即出現(xiàn)停食等癥狀，死亡率高。瀕死蝦頭胸部因肝胰腺發(fā)黃而變成黃色，因此稱之為黃頭病。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】黃頭病毒（Yellow head virus，YHV）。
【流行與危害】黃頭病最先（1990）在泰國(guó)東部和中部地區(qū)的養(yǎng)殖斑節(jié)對(duì)蝦中出現(xiàn)，隨后在印度、中國(guó)、馬來(lái)西亞、印度尼西亞、菲律賓、越南等亞洲地區(qū)和美洲國(guó)家流行和蔓延。自然或人工感染狀態(tài)下，可感染斑節(jié)對(duì)蝦、食用對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、墨吉對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、細(xì)角對(duì)蝦、白對(duì)蝦、褐對(duì)蝦、桃紅對(duì)蝦、刀額新對(duì)蝦、綠尾新對(duì)蝦等多個(gè)對(duì)蝦品種。斑節(jié)對(duì)蝦為主要受感染者，可能是黃頭病毒的自然宿主。自然狀態(tài)下黃頭病毒還可感染日本囊對(duì)蝦、墨吉對(duì)蝦、白對(duì)蝦，試驗(yàn)感染條件下感染斑節(jié)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、細(xì)角對(duì)蝦、褐對(duì)蝦、桃紅對(duì)蝦、白對(duì)蝦，引起較高死亡率。該病嚴(yán)重影響?zhàn)B殖約50～70d的對(duì)蝦，感染后3～5天內(nèi)發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率達(dá)80%～90%。
水平傳播是該病病原的主要傳播方式。鳥(niǎo)類也是傳播媒介之一，海鷗等鳥(niǎo)類攝食患病對(duì)蝦，然后通過(guò)排泄物將病毒傳播到鄰近的池塘中去。
【癥狀及病理變化】黃頭病能引起對(duì)蝦迅速大量死亡，常見(jiàn)患病蝦攝食量先增大然后突然停止，一般2～4天內(nèi)就會(huì)出現(xiàn)頭胸部發(fā)黃和全身發(fā)白的臨床癥狀。許多瀕死蝦聚集在池塘角落的水面，肝胰腺比正常蝦軟且發(fā)黃，與健康蝦肝胰腺的褐色有明顯區(qū)別。
黃頭病毒主要侵染外胚層和中胚層起源的組織器官，可感染血淋巴、造血組織、鰓瓣、皮下結(jié)締組織、腸、觸角腺、生殖腺、神經(jīng)束、神經(jīng)節(jié)等，出現(xiàn)全身性細(xì)胞壞死。組織壓片可觀察到中度到大量球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體；血淋巴涂片可觀察到中度到大量血細(xì)胞發(fā)生核固縮和破裂；組織切片可觀察到壞死區(qū)域有球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體，直徑為2μm或稍小，胃皮下組織和鰓是觀察特征性包涵體的最佳部位。
【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查。
（l）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體，幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部，非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第l部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）組織及病理學(xué)檢查
① 組織壓片的快速染色法：取瀕死蝦鰓絲或表皮用Meyer's HE染色，觀察細(xì)胞內(nèi)球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。該方法適用于對(duì)蝦活體中的黃頭病毒檢測(cè)，但不適于非感染性病毒攜帶樣品的診斷及對(duì)宿主進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)價(jià)。
② 組織病理學(xué)診斷：HE染色后觀察各種不同組織的病理變化和強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。本法適用于對(duì)蝦感染黃頭病毒初步診斷或未知疾病樣品組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適于非感染性病毒攜帶樣品的檢測(cè)。
③ 電鏡診斷：可對(duì)病蝦鰓、淋巴器官等的病毒粒子觀察和確診。
（3）病原學(xué)鑒定
① 原位雜交法：用YHV特異性的地高辛標(biāo)記的cDNA探針進(jìn)行，敏感性比病理組織學(xué)診斷法高，適用于黃頭病毒敏感宿主的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評(píng)估和疾病確診。
② RT-PCR檢測(cè)法：通過(guò)RT-PCR檢測(cè)YHV的特定基因。適用于對(duì)蝦各個(gè)生活期及其他生物或底泥等樣品的黃頭病毒情況進(jìn)行定性檢測(cè)，也適合于病原篩查和疾病確診。
④ 免疫檢測(cè)技術(shù)：通過(guò)制備的抗黃頭病毒特異性抗體來(lái)檢測(cè)病毒?？扇』钗r血淋巴，采用Western blot、ELISA或免疫熒光等方法鑒定樣品是否有黃頭病毒感染，從而進(jìn)行確診。
【防治方法】
（l）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。
（2）控制苗種繁殖場(chǎng)內(nèi)YHV檢疫陽(yáng)性的親蝦和苗種應(yīng)全部撲殺；病毒陽(yáng)性的種用和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。
4.羅氏沼蝦白尾病
又稱羅氏沼蝦肌肉白濁病，是一種急性病毒性疾病，主要危害羅氏沼蝦苗種，以急性死亡、病蝦肌肉呈白斑或白濁狀為特征。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】羅氏沼蝦野田村病毒（Macrobrachium rosenbergiinodavirus，MrNV）及其衛(wèi)星病毒-超小病毒（Extra small virus，XSV）。
【流行與危害】本病最先在泰國(guó)被發(fā)現(xiàn)，隨后出現(xiàn)于中國(guó)及圭亞那。目前該病已在中國(guó)、泰國(guó)、印度、越南、緬甸、澳大利亞、加勒比海地區(qū)（法屬圭亞那等）等國(guó)家和地區(qū)發(fā)生并流行。浙江省近年采用無(wú)野田村病毒苗種培育技術(shù)，自2005年以來(lái)未檢出病毒。
羅氏沼蝦是病毒主要的易感宿主，日本沼蝦、秀麗白蝦、克氏原螯蝦等養(yǎng)殖品種未發(fā)現(xiàn)發(fā)生羅氏沼蝦野田村病毒的感染。病毒主要感染羅氏沼蝦蝦苗，淡化后3天至3周是疾病高發(fā)時(shí)期，嚴(yán)重時(shí)死亡率可高達(dá)90%以上，目前沒(méi)有有效控制措施。發(fā)病后部分苗種可存活并長(zhǎng)至商品規(guī)格的成蝦，但有發(fā)病史的蝦可攜帶病毒，造成子代蝦苗的發(fā)病。成蝦及親蝦可查出病毒，但未發(fā)現(xiàn)MrNV感染引起的大規(guī)模流行。
病毒可通過(guò)水平和垂直傳播感染，其中帶毒種蝦垂直傳播是引起我國(guó)蝦苗發(fā)病的重要原因；帶病毒水體、餌料、工具、未徹底消毒的育苗池等均可傳播病毒；有學(xué)者報(bào)道帶病毒的輪蟲(chóng)等生物餌料也可傳播疾病。
蝦苗池缺氧、水質(zhì)不良及營(yíng)養(yǎng)因素等也可引起蝦體肌肉白濁，但這類白濁分布于整個(gè)腹部，無(wú)分散的白濁斑點(diǎn)，改用水質(zhì)良好的水后蝦苗的白濁可消退；病毒感染引起的白濁不能消退并可在蝦群中迅速傳播。
【癥狀及病理變化】發(fā)病蝦苗先在腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊，而后逐漸向其他部位擴(kuò)展，最后除頭胸部外，全身肌肉呈乳白色。蝦甲殼不出現(xiàn)白斑，這一點(diǎn)可區(qū)別于對(duì)蝦白斑綜合征。
發(fā)病蝦苗腹部肌纖維、肝胰腺、血細(xì)胞、心臟和鰓組織胞漿內(nèi)可觀察到嗜堿性包涵體；超微病理觀察可發(fā)現(xiàn)肌纖維間線粒體腫脹、變形，肌質(zhì)網(wǎng)變性、壞死和空泡化，表明細(xì)胞處于缺氧和鈣代謝紊亂狀態(tài)；肌細(xì)胞包涵體內(nèi)存在大量晶格排列、無(wú)囊膜、大小為26納米的球狀病毒顆粒。用病毒核酸探針或抗MrNV單抗進(jìn)行免疫酶染色，可發(fā)現(xiàn)肌肉及組織間隙細(xì)胞內(nèi)存在大量病毒顆粒。
【診斷方法】
（1）初步診斷可根據(jù)蝦苗腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊、肌肉白濁、個(gè)別蝦苗腹部存在分散的白濁點(diǎn)，排除水質(zhì)因素引起的肌肉白濁后作出初步診斷。應(yīng)與對(duì)蝦傳染性肌肉壞死病相區(qū)別。
（2）樣品采集發(fā)病蝦苗應(yīng)采集150尾以上，正常蝦500尾以上，取完整個(gè)體，用于病毒核酸提取或ELISA測(cè)定；種蝦應(yīng)采集病蝦10尾，用于病毒測(cè)定。
（3）組織和病理學(xué)檢查典型病例切片經(jīng)HE染色后，可發(fā)現(xiàn)嗜酸性包涵體，為本病重要特征，但此方法費(fèi)時(shí)，且觀察難度較大，診斷意義不大。
（4）實(shí)驗(yàn)室診斷和病原學(xué)鑒定
①RT-PCR檢測(cè)法：用MrNV特異性的引物進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，適用于對(duì)蝦各種樣品、環(huán)境生物和餌料生物的各種樣品以及其他非生物樣品中MrNV的定性檢測(cè)，具有高靈敏度和高特異性，適用于病原篩查和疾病確診。
②三抗體夾心ELISA法：其過(guò)程是先用兔抗MrNV抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，然后加入待測(cè)樣品、陽(yáng)性及陰性對(duì)照，通過(guò)預(yù)包被抗體捕捉待測(cè)樣品中的MrNV，再加入小鼠抗MrNV單抗，洗脫后最后加入抗小鼠單抗的酶標(biāo)抗體，然后進(jìn)行顯色，有病毒的樣品可顯示較深的顏色。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。并加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種，提高抗病能力。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，降低發(fā)病幾率。在疾病發(fā)生流行時(shí)，未發(fā)病苗種場(chǎng)可采用嚴(yán)格消毒、控制外來(lái)人員進(jìn)入苗種生產(chǎn)車間等辦法，防止疾病的傳播。使用抗病毒藥及微生物制劑可延緩疾病過(guò)程，減少死亡，但養(yǎng)成的成蝦可能攜帶病毒。
（2）控制病毒檢出陽(yáng)性的苗種場(chǎng)應(yīng)停止生產(chǎn)，繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部撲殺，并按有關(guān)規(guī)定對(duì)發(fā)病養(yǎng)殖區(qū)、用具和種蝦作無(wú)害化處理；檢疫陽(yáng)性蝦禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料。
5.對(duì)蝦桿狀病毒病
對(duì)蝦桿狀病毒病是威脅對(duì)蝦幼體、仔蝦和幼蝦階段的疾病。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。
【病原體】對(duì)蝦桿狀病毒（Baculovirus penaei）。
【流行與危害】該病毒主要感染西半球的養(yǎng)殖及野生對(duì)蝦。目前已發(fā)現(xiàn)3個(gè)地方株，分別分布在東南大西洋、美國(guó)、墨西哥沿岸和加勒比海、美國(guó)南、中北部太平洋沿岸及夏威夷。該病毒宿主廣泛，可感染濱對(duì)蝦屬、美對(duì)蝦屬、明對(duì)蝦屬和溝對(duì)蝦屬等在內(nèi)的所有對(duì)蝦品種，以幼體、仔蝦和早期幼蝦對(duì)病毒最為敏感。病毒主要經(jīng)對(duì)蝦相互殘食以及糞-口途徑經(jīng)口傳播。親蝦產(chǎn)卵時(shí)排泄帶毒糞便也可使病毒傳給下一代種群。試驗(yàn)表明輪蟲(chóng)和鹵蟲(chóng)可將該病毒傳給對(duì)蝦幼體。
【癥狀及病理變化】病蝦嗜睡厭食，體色呈藍(lán)灰色或藍(lán)黑色，胃附近白濁化，浮頭，停滯岸邊，鰓和體表有固著類纖毛蟲(chóng)、絲狀細(xì)菌、附生硅藻等生物附著，容易并發(fā)褐斑病等細(xì)菌性疾病，最終側(cè)臥于池底死亡。解剖后可發(fā)現(xiàn)肝胰腺腫大、軟化、發(fā)炎或萎縮硬化，腸道發(fā)炎等。
病毒主要侵害肝胰腺腺管、中腸等上皮細(xì)胞。感染病毒后可在肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞中形成細(xì)胞核內(nèi)核型多角包涵體，少量包涵體也可在糞便中游離存在。肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞核內(nèi)存在數(shù)量不等的金字塔狀包涵體，包涵體為具有明顯折射性的四面體，高度約20μm。受感染的對(duì)蝦肝胰腺小管和前中腸的上皮細(xì)胞的細(xì)胞核肥大，核內(nèi)有1個(gè)至幾個(gè)角錐形包涵體。核仁被擠到一邊，并退化或消失，染色質(zhì)分布于核的邊緣，呈環(huán)狀排列。
【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。診斷時(shí)應(yīng)注意與斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病相區(qū)別。
（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體取完整個(gè)體，仔蝦取頭胸部，幼蝦和成蝦取小塊肝胰腺或小截中腸組織。糞便樣品采集：將幼蝦或成蝦暫養(yǎng)于水族箱中，待數(shù)小時(shí)直至水族箱底部出現(xiàn)糞便，用干凈的塑料虹吸管吸取排泄物，注入玻璃試管中。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）診斷方法
① 壓片顯微鏡檢查法：取病蝦肝胰腺和中腸進(jìn)行濕片壓片，顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)角錐形包涵體基本可診斷。結(jié)果可疑時(shí)根據(jù)組織病理或PCR結(jié)果確認(rèn)。
②組織病理學(xué)診斷法：觀察組織切片經(jīng)H＆ E染色后細(xì)胞核內(nèi)角錐形包涵體。適用于對(duì)蝦感染對(duì)蝦桿狀病毒情況的初步診斷或未知疾病樣品的組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適用于非感染性攜帶病毒的樣品檢測(cè)。
③透射電鏡診斷法：制備病蝦中腸腺超薄切片，透射電鏡檢查包涵體和核質(zhì)中有無(wú)許多桿狀病毒顆粒，從而確診。
④原位雜交法：采用地高辛標(biāo)記eDNA探針進(jìn)行病毒檢測(cè)，敏感性高于病理組織診斷法，適用于對(duì)蝦桿狀病毒敏感宿主組織細(xì)胞的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評(píng)估和疾病的確診。
⑤PCR檢測(cè)法：通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，檢測(cè)病毒特定基因。適用于大量樣品的病毒篩查和疾病確診，可檢測(cè)對(duì)蝦活體、糞便、冰凍和冰鮮蝦產(chǎn)品的對(duì)蝦桿狀病毒的篩查和疾病診斷，但單獨(dú)使用不能對(duì)病毒劑量、感染活性及宿主感染程度作出評(píng)估。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。加強(qiáng)親蝦及幼體的檢疫，及時(shí)銷毀受病毒污染的對(duì)蝦，染疫場(chǎng)的池塘、用具徹底消毒。改善水質(zhì)和采取合理的養(yǎng)殖密度，可降低本病的發(fā)生。
（2）控制繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部捕殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽(yáng)性的必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作餌料使用。
6.傳染性皮下和造血器官壞死病
對(duì)蝦的一種傳染性疾病，主要感染細(xì)角對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】傳染性皮下和造血組織壞死病毒 （infctioushypodernmm and haematopoietic necrosis virus，IHHNV），又名“細(xì)角對(duì)蝦濃核病毒”（Penaeus stylirostris densovirus，PstDNV）。
【流行與危害】IHHNV可感染世界各地的養(yǎng)殖對(duì)蝦，主要感染太平洋東部沿岸野生對(duì)蝦、太平洋島嶼（包括夏威夷群島、法屬波利尼西亞、關(guān)島和新卡里多尼亞）的養(yǎng)殖對(duì)蝦。近年來(lái)在東南亞和中東地區(qū)的養(yǎng)殖和野生對(duì)蝦中存在該病的流行，該病在我國(guó)也有較高的發(fā)病率。細(xì)角對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦等大部分對(duì)蝦品種都可被感染，細(xì)角對(duì)蝦死亡率可達(dá)90%以上，稚蝦受危害最為嚴(yán)重。該病毒主要通過(guò)帶毒蝦及其他甲殼類受病毒污染水體傳播，蝦類同類殘食或海鳥(niǎo)也可傳播病毒。發(fā)病后存活的對(duì)蝦仍帶毒，可以通過(guò)垂直傳播方式傳播該病。
【癥狀及病理變化】細(xì)角對(duì)蝦的稚蝦患急性傳染性皮下和造血組織壞死病后，攝食量明顯減少，繼而出現(xiàn)行為及外觀異常。患病對(duì)蝦可緩緩上升到水面，靜止不動(dòng)，然后翻轉(zhuǎn)后腹部向上并緩慢沉到水底，這種行為可反復(fù)進(jìn)行并持續(xù)數(shù)小時(shí)，直到無(wú)力繼續(xù)下去或被其他蝦吞食。此感染期的細(xì)角對(duì)蝦表皮上皮層（尤其是腹部背板接合處）常出現(xiàn)白色或淺黃色斑點(diǎn)，使整個(gè)蝦體呈現(xiàn)斑駁的外觀。在瀕死的細(xì)角對(duì)蝦中，這些斑點(diǎn)會(huì)有所褪色，導(dǎo)致蝦體色偏藍(lán)。在感染的末期，細(xì)角對(duì)蝦和斑節(jié)對(duì)蝦瀕死時(shí)體色明顯變藍(lán)，腹部肌肉不透明。
在凡納濱對(duì)蝦中，由IHHNV引起的“傳染性皮下和造血組織壞死病”存在一種慢性表現(xiàn)形式，即“矮小殘缺綜合征（runt-deformity syndrome，RDS）”。RDS病蝦生長(zhǎng)緩慢、體型畸形，患病稚蝦還出現(xiàn)額角彎曲、變形、觸角鞭毛皺起、表皮粗糙或殘缺?；糝DS的凡納濱對(duì)蝦稚蝦群體中，體長(zhǎng)普遍偏小，且個(gè)體之間體長(zhǎng)差異很大?？捎皿w長(zhǎng)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）來(lái)評(píng)估凡納濱對(duì)蝦和細(xì)角對(duì)蝦稚蝦群體是否患有RDS：RDS群體的CV值多大于30%，甚至達(dá)到90%；而未患病群體的。CV值通常為10%～30%。
在組織病理學(xué)方面，IHHNV主要感染起源于外胚層和中胚層的組織細(xì)胞，主要有表皮、前腸和后腸上皮、性腺、淋巴器官和結(jié)締組織細(xì)胞，基本不感染肝胰腺細(xì)胞。靶組織細(xì)胞核內(nèi)可觀察到嗜酸性包涵體，即典型的考德里A型（Cowdry type A）包涵體。
【診斷方法】在本病嚴(yán)重暴發(fā)流行時(shí)，可根發(fā)病史、臨床特征及病理特征做出初步診斷，確診需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查。
（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體，幼蝦和成蝦取頭胸部，非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）組織及病理學(xué)檢查
① 組織病理診斷法：組織切片經(jīng)HE染色后，觀察細(xì)胞核內(nèi)是否存在Cowdry A型包涵體，從而進(jìn)行診斷。該方法適用于有癥狀對(duì)蝦的初步診斷或未知樣品的組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適用于無(wú)癥狀帶病毒標(biāo)本的病毒檢測(cè)。
② 電鏡診斷：通過(guò)超薄切片，觀察靶組織細(xì)胞核內(nèi)有無(wú)IHHNV病毒粒子進(jìn)行確診。
（3）病原學(xué)鑒定
① 分子雜交技術(shù)：采用地高辛標(biāo)記的IHHNV eDNA探針進(jìn)行病毒檢測(cè)，靈敏度高于病理組織診斷法。適用于成蝦、幼蝦、仔蝦、幼體和受精卵活體、冰鮮或冰凍產(chǎn)品和其他甲殼類動(dòng)物的病毒篩查、有臨床病癥病蝦的確診。
② PCR檢測(cè)法：通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)IHHNV特定基因。適用于各種對(duì)蝦樣品、環(huán)境生物和餌料生物樣品以及其他各種非生物樣品的IHHNV帶毒的高靈敏度定性檢測(cè)。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。有效的預(yù)防措施主要是加強(qiáng)對(duì)蝦、特別是進(jìn)口對(duì)蝦的檢疫，并銷毀染疫對(duì)蝦，對(duì)發(fā)病蝦場(chǎng)及其設(shè)施要進(jìn)行徹底消毒。用SPF親蝦進(jìn)行繁育。
（2）控制繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部撲殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽(yáng)性的必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。
（未完待續(xù)）
（通聯(lián)：430072，中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所 武漢市武昌東湖南路7號(hào)）
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○汪建國(guó)
（中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所 研究員 博導(dǎo)）
甲殼類疾病及其防治技術(shù)（2）
——蝦類疾?。ǘ?/p>
○汪建國(guó)
（中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所研究員 博導(dǎo)）
3.黃頭病
對(duì)蝦傳染性疾病。該病急性感染的對(duì)蝦在染病2～4天時(shí)即出現(xiàn)停食等癥狀，死亡率高。瀕死蝦頭胸部因肝胰腺發(fā)黃而變成黃色，因此稱之為黃頭病。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】黃頭病毒（Yellow head virus，YHV）。
【流行與危害】黃頭病最先（1990）在泰國(guó)東部和中部地區(qū)的養(yǎng)殖斑節(jié)對(duì)蝦中出現(xiàn)，隨后在印度、中國(guó)、馬來(lái)西亞、印度尼西亞、菲律賓、越南等亞洲地區(qū)和美洲國(guó)家流行和蔓延。自然或人工感染狀態(tài)下，可感染斑節(jié)對(duì)蝦、食用對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、墨吉對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、細(xì)角對(duì)蝦、白對(duì)蝦、褐對(duì)蝦、桃紅對(duì)蝦、刀額新對(duì)蝦、綠尾新對(duì)蝦等多個(gè)對(duì)蝦品種。斑節(jié)對(duì)蝦為主要受感染者，可能是黃頭病毒的自然宿主。自然狀態(tài)下黃頭病毒還可感染日本囊對(duì)蝦、墨吉對(duì)蝦、白對(duì)蝦，試驗(yàn)感染條件下感染斑節(jié)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、細(xì)角對(duì)蝦、褐對(duì)蝦、桃紅對(duì)蝦、白對(duì)蝦，引起較高死亡率。該病嚴(yán)重影響?zhàn)B殖約50～70d的對(duì)蝦，感染后3～5天內(nèi)發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率達(dá)80%～90%。
水平傳播是該病病原的主要傳播方式。鳥(niǎo)類也是傳播媒介之一，海鷗等鳥(niǎo)類攝食患病對(duì)蝦，然后通過(guò)排泄物將病毒傳播到鄰近的池塘中去。
【癥狀及病理變化】黃頭病能引起對(duì)蝦迅速大量死亡，常見(jiàn)患病蝦攝食量先增大然后突然停止，一般2～4天內(nèi)就會(huì)出現(xiàn)頭胸部發(fā)黃和全身發(fā)白的臨床癥狀。許多瀕死蝦聚集在池塘角落的水面，肝胰腺比正常蝦軟且發(fā)黃，與健康蝦肝胰腺的褐色有明顯區(qū)別。
黃頭病毒主要侵染外胚層和中胚層起源的組織器官，可感染血淋巴、造血組織、鰓瓣、皮下結(jié)締組織、腸、觸角腺、生殖腺、神經(jīng)束、神經(jīng)節(jié)等，出現(xiàn)全身性細(xì)胞壞死。組織壓片可觀察到中度到大量球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體；血淋巴涂片可觀察到中度到大量血細(xì)胞發(fā)生核固縮和破裂；組織切片可觀察到壞死區(qū)域有球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體，直徑為2μm或稍小，胃皮下組織和鰓是觀察特征性包涵體的最佳部位。
【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查。
（l）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體，幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部，非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第l部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）組織及病理學(xué)檢查
① 組織壓片的快速染色法：取瀕死蝦鰓絲或表皮用Meyer's HE染色，觀察細(xì)胞內(nèi)球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。該方法適用于對(duì)蝦活體中的黃頭病毒檢測(cè)，但不適于非感染性病毒攜帶樣品的診斷及對(duì)宿主進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)價(jià)。
② 組織病理學(xué)診斷：HE染色后觀察各種不同組織的病理變化和強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。本法適用于對(duì)蝦感染黃頭病毒初步診斷或未知疾病樣品組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適于非感染性病毒攜帶樣品的檢測(cè)。
③ 電鏡診斷：可對(duì)病蝦鰓、淋巴器官等的病毒粒子觀察和確診。
（3）病原學(xué)鑒定
① 原位雜交法：用YHV特異性的地高辛標(biāo)記的cDNA探針進(jìn)行，敏感性比病理組織學(xué)診斷法高，適用于黃頭病毒敏感宿主的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評(píng)估和疾病確診。
② RT-PCR檢測(cè)法：通過(guò)RT-PCR檢測(cè)YHV的特定基因。適用于對(duì)蝦各個(gè)生活期及其他生物或底泥等樣品的黃頭病毒情況進(jìn)行定性檢測(cè)，也適合于病原篩查和疾病確診。
④ 免疫檢測(cè)技術(shù)：通過(guò)制備的抗黃頭病毒特異性抗體來(lái)檢測(cè)病毒?？扇』钗r血淋巴，采用Western blot、ELISA或免疫熒光等方法鑒定樣品是否有黃頭病毒感染，從而進(jìn)行確診。
【防治方法】
（l）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。
（2）控制苗種繁殖場(chǎng)內(nèi)YHV檢疫陽(yáng)性的親蝦和苗種應(yīng)全部撲殺；病毒陽(yáng)性的種用和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。
4.羅氏沼蝦白尾病
又稱羅氏沼蝦肌肉白濁病，是一種急性病毒性疾病，主要危害羅氏沼蝦苗種，以急性死亡、病蝦肌肉呈白斑或白濁狀為特征。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】羅氏沼蝦野田村病毒（Macrobrachium rosenbergiinodavirus，MrNV）及其衛(wèi)星病毒-超小病毒（Extra small virus，XSV）。
【流行與危害】本病最先在泰國(guó)被發(fā)現(xiàn)，隨后出現(xiàn)于中國(guó)及圭亞那。目前該病已在中國(guó)、泰國(guó)、印度、越南、緬甸、澳大利亞、加勒比海地區(qū)（法屬圭亞那等）等國(guó)家和地區(qū)發(fā)生并流行。浙江省近年采用無(wú)野田村病毒苗種培育技術(shù)，自2005年以來(lái)未檢出病毒。
羅氏沼蝦是病毒主要的易感宿主，日本沼蝦、秀麗白蝦、克氏原螯蝦等養(yǎng)殖品種未發(fā)現(xiàn)發(fā)生羅氏沼蝦野田村病毒的感染。病毒主要感染羅氏沼蝦蝦苗，淡化后3天至3周是疾病高發(fā)時(shí)期，嚴(yán)重時(shí)死亡率可高達(dá)90%以上，目前沒(méi)有有效控制措施。發(fā)病后部分苗種可存活并長(zhǎng)至商品規(guī)格的成蝦，但有發(fā)病史的蝦可攜帶病毒，造成子代蝦苗的發(fā)病。成蝦及親蝦可查出病毒，但未發(fā)現(xiàn)MrNV感染引起的大規(guī)模流行。
病毒可通過(guò)水平和垂直傳播感染，其中帶毒種蝦垂直傳播是引起我國(guó)蝦苗發(fā)病的重要原因；帶病毒水體、餌料、工具、未徹底消毒的育苗池等均可傳播病毒；有學(xué)者報(bào)道帶病毒的輪蟲(chóng)等生物餌料也可傳播疾病。
蝦苗池缺氧、水質(zhì)不良及營(yíng)養(yǎng)因素等也可引起蝦體肌肉白濁，但這類白濁分布于整個(gè)腹部，無(wú)分散的白濁斑點(diǎn)，改用水質(zhì)良好的水后蝦苗的白濁可消退；病毒感染引起的白濁不能消退并可在蝦群中迅速傳播。
【癥狀及病理變化】發(fā)病蝦苗先在腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊，而后逐漸向其他部位擴(kuò)展，最后除頭胸部外，全身肌肉呈乳白色。蝦甲殼不出現(xiàn)白斑，這一點(diǎn)可區(qū)別于對(duì)蝦白斑綜合征。
發(fā)病蝦苗腹部肌纖維、肝胰腺、血細(xì)胞、心臟和鰓組織胞漿內(nèi)可觀察到嗜堿性包涵體；超微病理觀察可發(fā)現(xiàn)肌纖維間線粒體腫脹、變形，肌質(zhì)網(wǎng)變性、壞死和空泡化，表明細(xì)胞處于缺氧和鈣代謝紊亂狀態(tài)；肌細(xì)胞包涵體內(nèi)存在大量晶格排列、無(wú)囊膜、大小為26納米的球狀病毒顆粒。用病毒核酸探針或抗MrNV單抗進(jìn)行免疫酶染色，可發(fā)現(xiàn)肌肉及組織間隙細(xì)胞內(nèi)存在大量病毒顆粒。
【診斷方法】
（1）初步診斷可根據(jù)蝦苗腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊、肌肉白濁、個(gè)別蝦苗腹部存在分散的白濁點(diǎn)，排除水質(zhì)因素引起的肌肉白濁后作出初步診斷。應(yīng)與對(duì)蝦傳染性肌肉壞死病相區(qū)別。
（2）樣品采集發(fā)病蝦苗應(yīng)采集150尾以上，正常蝦500尾以上，取完整個(gè)體，用于病毒核酸提取或ELISA測(cè)定；種蝦應(yīng)采集病蝦10尾，用于病毒測(cè)定。
（3）組織和病理學(xué)檢查典型病例切片經(jīng)HE染色后，可發(fā)現(xiàn)嗜酸性包涵體，為本病重要特征，但此方法費(fèi)時(shí)，且觀察難度較大，診斷意義不大。
（4）實(shí)驗(yàn)室診斷和病原學(xué)鑒定
①RT-PCR檢測(cè)法：用MrNV特異性的引物進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，適用于對(duì)蝦各種樣品、環(huán)境生物和餌料生物的各種樣品以及其他非生物樣品中MrNV的定性檢測(cè)，具有高靈敏度和高特異性，適用于病原篩查和疾病確診。
②三抗體夾心ELISA法：其過(guò)程是先用兔抗MrNV抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，然后加入待測(cè)樣品、陽(yáng)性及陰性對(duì)照，通過(guò)預(yù)包被抗體捕捉待測(cè)樣品中的MrNV，再加入小鼠抗MrNV單抗，洗脫后最后加入抗小鼠單抗的酶標(biāo)抗體，然后進(jìn)行顯色，有病毒的樣品可顯示較深的顏色。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。并加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種，提高抗病能力。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，降低發(fā)病幾率。在疾病發(fā)生流行時(shí)，未發(fā)病苗種場(chǎng)可采用嚴(yán)格消毒、控制外來(lái)人員進(jìn)入苗種生產(chǎn)車間等辦法，防止疾病的傳播。使用抗病毒藥及微生物制劑可延緩疾病過(guò)程，減少死亡，但養(yǎng)成的成蝦可能攜帶病毒。
（2）控制病毒檢出陽(yáng)性的苗種場(chǎng)應(yīng)停止生產(chǎn)，繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部撲殺，并按有關(guān)規(guī)定對(duì)發(fā)病養(yǎng)殖區(qū)、用具和種蝦作無(wú)害化處理；檢疫陽(yáng)性蝦禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料。
5.對(duì)蝦桿狀病毒病
對(duì)蝦桿狀病毒病是威脅對(duì)蝦幼體、仔蝦和幼蝦階段的疾病。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。
【病原體】對(duì)蝦桿狀病毒（Baculovirus penaei）。
【流行與危害】該病毒主要感染西半球的養(yǎng)殖及野生對(duì)蝦。目前已發(fā)現(xiàn)3個(gè)地方株，分別分布在東南大西洋、美國(guó)、墨西哥沿岸和加勒比海、美國(guó)南、中北部太平洋沿岸及夏威夷。該病毒宿主廣泛，可感染濱對(duì)蝦屬、美對(duì)蝦屬、明對(duì)蝦屬和溝對(duì)蝦屬等在內(nèi)的所有對(duì)蝦品種，以幼體、仔蝦和早期幼蝦對(duì)病毒最為敏感。病毒主要經(jīng)對(duì)蝦相互殘食以及糞-口途徑經(jīng)口傳播。親蝦產(chǎn)卵時(shí)排泄帶毒糞便也可使病毒傳給下一代種群。試驗(yàn)表明輪蟲(chóng)和鹵蟲(chóng)可將該病毒傳給對(duì)蝦幼體。
【癥狀及病理變化】病蝦嗜睡厭食，體色呈藍(lán)灰色或藍(lán)黑色，胃附近白濁化，浮頭，停滯岸邊，鰓和體表有固著類纖毛蟲(chóng)、絲狀細(xì)菌、附生硅藻等生物附著，容易并發(fā)褐斑病等細(xì)菌性疾病，最終側(cè)臥于池底死亡。解剖后可發(fā)現(xiàn)肝胰腺腫大、軟化、發(fā)炎或萎縮硬化，腸道發(fā)炎等。
病毒主要侵害肝胰腺腺管、中腸等上皮細(xì)胞。感染病毒后可在肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞中形成細(xì)胞核內(nèi)核型多角包涵體，少量包涵體也可在糞便中游離存在。肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞核內(nèi)存在數(shù)量不等的金字塔狀包涵體，包涵體為具有明顯折射性的四面體，高度約20μm。受感染的對(duì)蝦肝胰腺小管和前中腸的上皮細(xì)胞的細(xì)胞核肥大，核內(nèi)有1個(gè)至幾個(gè)角錐形包涵體。核仁被擠到一邊，并退化或消失，染色質(zhì)分布于核的邊緣，呈環(huán)狀排列。
【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。診斷時(shí)應(yīng)注意與斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病相區(qū)別。
（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體取完整個(gè)體，仔蝦取頭胸部，幼蝦和成蝦取小塊肝胰腺或小截中腸組織。糞便樣品采集：將幼蝦或成蝦暫養(yǎng)于水族箱中，待數(shù)小時(shí)直至水族箱底部出現(xiàn)糞便，用干凈的塑料虹吸管吸取排泄物，注入玻璃試管中。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）診斷方法
① 壓片顯微鏡檢查法：取病蝦肝胰腺和中腸進(jìn)行濕片壓片，顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)角錐形包涵體基本可診斷。結(jié)果可疑時(shí)根據(jù)組織病理或PCR結(jié)果確認(rèn)。
②組織病理學(xué)診斷法：觀察組織切片經(jīng)H＆ E染色后細(xì)胞核內(nèi)角錐形包涵體。適用于對(duì)蝦感染對(duì)蝦桿狀病毒情況的初步診斷或未知疾病樣品的組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適用于非感染性攜帶病毒的樣品檢測(cè)。
③透射電鏡診斷法：制備病蝦中腸腺超薄切片，透射電鏡檢查包涵體和核質(zhì)中有無(wú)許多桿狀病毒顆粒，從而確診。
④原位雜交法：采用地高辛標(biāo)記eDNA探針進(jìn)行病毒檢測(cè)，敏感性高于病理組織診斷法，適用于對(duì)蝦桿狀病毒敏感宿主組織細(xì)胞的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評(píng)估和疾病的確診。
⑤PCR檢測(cè)法：通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，檢測(cè)病毒特定基因。適用于大量樣品的病毒篩查和疾病確診，可檢測(cè)對(duì)蝦活體、糞便、冰凍和冰鮮蝦產(chǎn)品的對(duì)蝦桿狀病毒的篩查和疾病診斷，但單獨(dú)使用不能對(duì)病毒劑量、感染活性及宿主感染程度作出評(píng)估。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。加強(qiáng)親蝦及幼體的檢疫，及時(shí)銷毀受病毒污染的對(duì)蝦，染疫場(chǎng)的池塘、用具徹底消毒。改善水質(zhì)和采取合理的養(yǎng)殖密度，可降低本病的發(fā)生。
（2）控制繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部捕殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽(yáng)性的必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作餌料使用。
6.傳染性皮下和造血器官壞死病
對(duì)蝦的一種傳染性疾病，主要感染細(xì)角對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦。2008年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告》第1125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病。OIE將其列為必須申報(bào)的疾病。
【病原體】傳染性皮下和造血組織壞死病毒 （infctioushypodernmm and haematopoietic necrosis virus，IHHNV），又名“細(xì)角對(duì)蝦濃核病毒”（Penaeus stylirostris densovirus，PstDNV）。
【流行與危害】IHHNV可感染世界各地的養(yǎng)殖對(duì)蝦，主要感染太平洋東部沿岸野生對(duì)蝦、太平洋島嶼（包括夏威夷群島、法屬波利尼西亞、關(guān)島和新卡里多尼亞）的養(yǎng)殖對(duì)蝦。近年來(lái)在東南亞和中東地區(qū)的養(yǎng)殖和野生對(duì)蝦中存在該病的流行，該病在我國(guó)也有較高的發(fā)病率。細(xì)角對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦等大部分對(duì)蝦品種都可被感染，細(xì)角對(duì)蝦死亡率可達(dá)90%以上，稚蝦受危害最為嚴(yán)重。該病毒主要通過(guò)帶毒蝦及其他甲殼類受病毒污染水體傳播，蝦類同類殘食或海鳥(niǎo)也可傳播病毒。發(fā)病后存活的對(duì)蝦仍帶毒，可以通過(guò)垂直傳播方式傳播該病。
【癥狀及病理變化】細(xì)角對(duì)蝦的稚蝦患急性傳染性皮下和造血組織壞死病后，攝食量明顯減少，繼而出現(xiàn)行為及外觀異常。患病對(duì)蝦可緩緩上升到水面，靜止不動(dòng)，然后翻轉(zhuǎn)后腹部向上并緩慢沉到水底，這種行為可反復(fù)進(jìn)行并持續(xù)數(shù)小時(shí)，直到無(wú)力繼續(xù)下去或被其他蝦吞食。此感染期的細(xì)角對(duì)蝦表皮上皮層（尤其是腹部背板接合處）常出現(xiàn)白色或淺黃色斑點(diǎn)，使整個(gè)蝦體呈現(xiàn)斑駁的外觀。在瀕死的細(xì)角對(duì)蝦中，這些斑點(diǎn)會(huì)有所褪色，導(dǎo)致蝦體色偏藍(lán)。在感染的末期，細(xì)角對(duì)蝦和斑節(jié)對(duì)蝦瀕死時(shí)體色明顯變藍(lán)，腹部肌肉不透明。
在凡納濱對(duì)蝦中，由IHHNV引起的“傳染性皮下和造血組織壞死病”存在一種慢性表現(xiàn)形式，即“矮小殘缺綜合征（runt-deformity syndrome，RDS）”。RDS病蝦生長(zhǎng)緩慢、體型畸形，患病稚蝦還出現(xiàn)額角彎曲、變形、觸角鞭毛皺起、表皮粗糙或殘缺?；糝DS的凡納濱對(duì)蝦稚蝦群體中，體長(zhǎng)普遍偏小，且個(gè)體之間體長(zhǎng)差異很大?？捎皿w長(zhǎng)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）來(lái)評(píng)估凡納濱對(duì)蝦和細(xì)角對(duì)蝦稚蝦群體是否患有RDS：RDS群體的CV值多大于30%，甚至達(dá)到90%；而未患病群體的。CV值通常為10%～30%。
在組織病理學(xué)方面，IHHNV主要感染起源于外胚層和中胚層的組織細(xì)胞，主要有表皮、前腸和后腸上皮、性腺、淋巴器官和結(jié)締組織細(xì)胞，基本不感染肝胰腺細(xì)胞。靶組織細(xì)胞核內(nèi)可觀察到嗜酸性包涵體，即典型的考德里A型（Cowdry type A）包涵體。
【診斷方法】在本病嚴(yán)重暴發(fā)流行時(shí)，可根發(fā)病史、臨床特征及病理特征做出初步診斷，確診需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查。
（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對(duì)蝦幼體、仔蝦取完整個(gè)體，幼蝦和成蝦取頭胸部，非對(duì)蝦的甲殼類動(dòng)物參照對(duì)蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。
樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中的列表要求采樣。
（2）組織及病理學(xué)檢查
① 組織病理診斷法：組織切片經(jīng)HE染色后，觀察細(xì)胞核內(nèi)是否存在Cowdry A型包涵體，從而進(jìn)行診斷。該方法適用于有癥狀對(duì)蝦的初步診斷或未知樣品的組織病理學(xué)評(píng)價(jià)，不適用于無(wú)癥狀帶病毒標(biāo)本的病毒檢測(cè)。
② 電鏡診斷：通過(guò)超薄切片，觀察靶組織細(xì)胞核內(nèi)有無(wú)IHHNV病毒粒子進(jìn)行確診。
（3）病原學(xué)鑒定
① 分子雜交技術(shù)：采用地高辛標(biāo)記的IHHNV eDNA探針進(jìn)行病毒檢測(cè)，靈敏度高于病理組織診斷法。適用于成蝦、幼蝦、仔蝦、幼體和受精卵活體、冰鮮或冰凍產(chǎn)品和其他甲殼類動(dòng)物的病毒篩查、有臨床病癥病蝦的確診。
② PCR檢測(cè)法：通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)IHHNV特定基因。適用于各種對(duì)蝦樣品、環(huán)境生物和餌料生物樣品以及其他各種非生物樣品的IHHNV帶毒的高靈敏度定性檢測(cè)。
【防治方法】
（1）預(yù)防對(duì)苗種場(chǎng)、良種場(chǎng)實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強(qiáng)疫病監(jiān)測(cè)與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過(guò)培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。有效的預(yù)防措施主要是加強(qiáng)對(duì)蝦、特別是進(jìn)口對(duì)蝦的檢疫，并銷毀染疫對(duì)蝦，對(duì)發(fā)病蝦場(chǎng)及其設(shè)施要進(jìn)行徹底消毒。用SPF親蝦進(jìn)行繁育。
（2）控制繁殖場(chǎng)親蝦和苗種檢疫陽(yáng)性的全部撲殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽(yáng)性的必須進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。
（未完待續(xù)）
（通聯(lián)：430072，中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所 武漢市武昌東湖南路7號(hào)）
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