新技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)檢測中的應(yīng)用
應(yīng)用于食品微生物檢驗(yàn)檢測中的生理生化技術(shù),由于是根據(jù)細(xì)菌的代謝產(chǎn)物中的某些特殊的物質(zhì)及其中某些物質(zhì)的分子變化等來進(jìn)行,所以又稱為代謝學(xué)技術(shù)。具體地說,該技術(shù)手段主要包括微量升華法、AT發(fā)光法等:
ATP生物發(fā)光法 ATP存在于所有的生物活體之中,因此,我們可以對(duì)樣品進(jìn)行ATP濃度檢測,還可以充分運(yùn)用光度計(jì)對(duì)樣品熒光素進(jìn)行強(qiáng)度檢驗(yàn),并以此為依據(jù)來進(jìn)一步判斷樣品中的活菌數(shù),確定樣品是否達(dá)標(biāo)。從我們的實(shí)際應(yīng)用的情況來說,ATP生物發(fā)光法檢測技術(shù)具有高效、方便、省時(shí)等多種優(yōu)點(diǎn)。
微量生化法 微量生化法又分為微熱量技法、放射測量法、電子阻抗法等多種分支。此文主要介紹微熱量技法和放射測量法,前者主要是根據(jù)細(xì)菌在生長過程中所產(chǎn)生熱量的變化來分辨出是哪種細(xì)菌;后者主要是利用放射性標(biāo)記物來標(biāo)記細(xì)菌在生長過程中所需要的碳水化合物,并通過檢測菌種在生長過程中所釋放的具有放射性的CO2來確定食品樣品中的菌量。
免疫磁性微球技術(shù) 免疫磁珠(IMB)是利用固化試劑的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)和免疫學(xué)的高度特異性相結(jié)合,具有可重復(fù)性高、成本低廉、省時(shí)省力的高效新型檢測技術(shù),在近兩年內(nèi)發(fā)展為一項(xiàng)較成熟的檢測手段。目前,該項(xiàng)技術(shù)主要應(yīng)用在肉類、牛奶等食品樣品中的致病微生物檢測,提高了食品安全等級(jí)。此外,由于該項(xiàng)技術(shù)具有較高的靈敏度和特異性,因此能更加快速地檢測出食品中的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等多種特異性細(xì)菌微生物。
酶聯(lián)免疫吸附技術(shù) 這項(xiàng)技術(shù)主要是利用食品樣品中固定的抗原和具有酶標(biāo)記物的抗體之間的直接作用,在這之中再加入底物就可以顯色,檢測出菌數(shù),這為直接法。相對(duì)的間接法是在固定的載體上吸附已知的抗原,并將其和檢測樣品的抗體進(jìn)行充分反應(yīng),再將抗體加入其中進(jìn)行充分反應(yīng),最后加入酶底物進(jìn)行顯色。隨著ELISA的廣泛運(yùn)用,科研人員也對(duì)其進(jìn)行了創(chuàng)新改革,演變出了多種改良方法,都很好地在各個(gè)行業(yè)充分運(yùn)用。
常規(guī)PCR技術(shù) 常規(guī)的檢測技術(shù)比較簡單實(shí)用,對(duì)于大多數(shù)行業(yè)領(lǐng)域來說都是比較適用的。它運(yùn)用到的主要原理相對(duì)來說也比較簡單,大致就是在具有DNA模板和相應(yīng)引物的混合物當(dāng)中加入適量的聚合酶,讓其進(jìn)行充分的反應(yīng)催化,以此來判斷出細(xì)菌的種類和數(shù)目。多年前,最終的檢出率就幾乎達(dá)到99.5%。由此可見,常規(guī)的PCR檢測方法是非常值得推廣運(yùn)用的。
多重PCR技術(shù) 多重PCR技術(shù)和常規(guī)的檢測方法相比較來說差別不是很大,具有一定的相似性,唯一不同的就是這種新型的檢測手段在反應(yīng)過程中需要加入更多的引物。它的主要優(yōu)勢是在原來的基礎(chǔ)上節(jié)省了更多的時(shí)間,檢測過程變得簡單易行,相應(yīng)的準(zhǔn)確性也更高。多名專家和學(xué)者對(duì)這一技術(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證,結(jié)果表明這種新型的檢測技術(shù)具有較高的可行性和準(zhǔn)確性,特別是針對(duì)大腸類細(xì)菌的檢測率。但是在檢測效率和靈敏度方面還有待進(jìn)一步提高。
PCR衍生技術(shù) 將PCR技術(shù)與新技術(shù)進(jìn)行充分的結(jié)合運(yùn)用,就發(fā)展成為現(xiàn)在的PCR衍生技術(shù),在這眾多技術(shù)手段中,都具有各自獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),被普遍運(yùn)用。
綜上所述,由于近幾年來,食品方面的安全問題屢次發(fā)生,間接地威脅到社會(huì)的和諧穩(wěn)定。因此,提高我國對(duì)食品微生物的檢測技術(shù)是迫在眉睫的首要問題。將新的檢測技術(shù)運(yùn)用到各個(gè)檢測領(lǐng)域,為人們的健康生活提供基本的保障。在重視技術(shù)調(diào)研發(fā)展的同時(shí)還要提高對(duì)檢測技術(shù)的創(chuàng)新和改革,不斷精益求精,才能研發(fā)出更好的檢測技術(shù),提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度的同時(shí)能有效地降低成本,簡化檢測步驟,成為人民健康飲食的第一道堅(jiān)實(shí)的屏障。
□褚永華 肥城市檢驗(yàn)檢測中心