□ 馮 航 西安文理學(xué)院 生物與環(huán)境工程學(xué)院
洗潔精對蠶豆根尖細(xì)胞的微核誘導(dǎo)
□ 馮 航 西安文理學(xué)院 生物與環(huán)境工程學(xué)院
微核是真核生物細(xì)胞中一種異常結(jié)構(gòu),往往是細(xì)胞受輻射或化學(xué)藥物的作用而產(chǎn)生的。已經(jīng)證實微核率的大小是和用藥的劑量或輻射累積效應(yīng)呈正相關(guān),這一點和染色體畸變的情況一樣。所以可用簡單的間期微核計數(shù)來代替繁雜的中期畸變?nèi)旧w計數(shù)。
由于大量新的化合物的合成,原子能應(yīng)用,各種工業(yè)廢棄物的排出,使人們需要一套高度靈敏、操作簡單的測試系統(tǒng)來監(jiān)視環(huán)境變化。只有真核的測試系統(tǒng)更能直接推測誘變物對人類或其他高等生物的遺傳危害,在這方面,微核測試是一種比較理想的方法。
隨著人們生活水平的不斷提高,各種洗滌劑相繼問世。人工合成的洗滌劑成本低,去污強,使用范圍越來越廣泛。但是洗滌劑可通過皮膚滲透到血液中,使細(xì)胞染色體畸變,此外,合成洗滌劑廢水排入水體后也會對環(huán)境造成破壞。利用蠶豆根尖作為實驗材料進行微核測試,可準(zhǔn)確顯示各種處理誘變的效果。
實驗材料
蠶豆種子、洗潔精、紗布,甲醇、冰醋酸、醋酸洋紅、鹽酸和硫酸銅均為分析純。
實驗方法
1 誘導(dǎo)萌發(fā)
將蠶豆種子在自來水中浸泡2 d,使其充分吸脹。將吸脹的種子平鋪在濕紗布上保濕培養(yǎng)2 d,待大部分初生根長至2 cm左右即可用來檢測。
2 根尖處理
每組選取生長良好,根長一致的6粒種子,分別放入待測液為自來水(陰性對照)、稀釋500倍的洗潔精溶液、稀釋300倍的洗潔精溶液、稀釋100倍的洗潔精溶液、硫酸銅溶液(陽性對照)的溶液中,浸沒處理24 h。
3 根尖恢復(fù)培養(yǎng)
將上述處理后的種子用蒸餾水沖洗3次,每次5 min,放入盛有自來水的培養(yǎng)皿中室溫培養(yǎng)24 h。
4 鏡檢
將恢復(fù)培養(yǎng)后的種子取根尖固定、酸解后用醋酸洋紅染色并壓片。每組取1個效果較好的根尖臨時裝片,每個根尖計數(shù)500個細(xì)胞中的微核數(shù)并進行記錄。
洗潔精對蠶豆根尖的影響
從實驗可以看出,洗潔精處理過的蠶豆,表皮和根尖顏色、形態(tài)都發(fā)材料,考慮使用動物材料,比如小鼠、家兔等。這樣更接近于人類生活,有更大的實際研究價值。
2 染色材料
染色材料不一定局限于一種,可以用其他生物染料來代替,比較染色效果,用染色效果最佳的一種染料。
3 染色時間
本次實驗中,根尖染色時間略短,導(dǎo)致根尖制片后觀察效果不佳,難以辨認(rèn)微核。鑒于此實驗現(xiàn)象及結(jié)果,建議可以適當(dāng)延長染色時間,以便于觀察。
4 制片方法
制作臨時裝片的技術(shù)方法可以有所改進,壓片時一定要將根尖搗碎,生了不同程度的變化。表皮發(fā)黑、根尖發(fā)黃、變黑以及變軟甚至腐爛。分析原因可能是蠶豆根尖經(jīng)洗潔精誘變處理后,細(xì)胞發(fā)生脫水,從而導(dǎo)致根尖細(xì)胞死亡。
洗潔精對蠶豆根尖細(xì)胞微核率的影響
洗潔精對蠶豆根尖細(xì)胞微核率的影響結(jié)果見表1,由表1可知,不同濃度的洗潔精溶液對蠶豆根尖均具有一定的影響。濃度越高,微核率越高,危害越大。
實驗過程
1 實驗材料
可以用洋蔥或大蒜作為實驗材料進行微核誘導(dǎo),也可以不局限于植物使得細(xì)胞完全分散開來,以便于后期鏡檢。不一定完完全全的按照查找資料上的方法來進行,實驗過程中頭腦要保持靈活,不斷思索,適當(dāng)改進實驗方法。
實驗結(jié)果
洗潔精對蠶豆根尖具有一定的危害性,可能是其改變了蠶豆根尖細(xì)胞膜的通透性,利于有害物質(zhì)進入細(xì)胞,從而對細(xì)胞產(chǎn)生影響。因此,洗潔精作為一種家用洗滌劑,具有潛在的危險性,應(yīng)當(dāng)引起我們的重視。
馮航(1982-),女,陜西長安人,碩士,實驗師,研究方向:藥用植物的開發(fā)利用。