高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

衛(wèi)莉玲 簡(jiǎn)艷婷 林曉旭 林亮（中國(guó)廣州分析測(cè)試中心， 廣東 廣州 510070）

高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

衛(wèi)莉玲 簡(jiǎn)艷婷 林曉旭 林亮
（中國(guó)廣州分析測(cè)試中心， 廣東 廣州 510070）

高效液相色譜法具有測(cè)量速度快、靈敏度高、回收率好等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，本文將對(duì)該法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹。

高效液相色譜法；藥物分析；應(yīng)用

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，簡(jiǎn)稱HPLC）是在氣相色譜理論的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，該法在高壓下測(cè)量，色譜柱壓降明顯，測(cè)量速度快，可達(dá)到0.1-10.0mL/min；靈敏度高，耗樣量少，分離效果好等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，為實(shí)現(xiàn)對(duì)藥品的快速、高效、高靈敏度的分離測(cè)定奠定了基礎(chǔ)［1］。本文將圍繞高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行分析。

1 高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

1.1 1HPLC在天然藥物分析中的應(yīng)用

天然藥物主要來(lái)源于植物，此外，動(dòng)物和礦物也是藥物來(lái)源的重要組成部分。天然藥物化學(xué)成分復(fù)雜，因此其藥效可能有一種，也可能有多種，這就給藥物質(zhì)量控制提出了嚴(yán)格的要求。HPLC法的利用可對(duì)天然藥物的成分進(jìn)行準(zhǔn)確分析，并能對(duì)其含量進(jìn)行精確測(cè)定。以西洋參為例：西洋參是五加科植物，味苦、性涼、入心、肺、腎經(jīng)，具有顯著的補(bǔ)益功能。西洋參的主要成分是皂苷類，尤其是Rb1、Rb2、Rc、Rd等7種皂苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到90%以上，成為評(píng)價(jià)西洋參藥性的重要指標(biāo)。2005年，陳軍輝等［2］利用HPLC法對(duì)12種西洋參的7種人參皂苷進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定條件如下：梯度洗脫，Alltima Cu色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸水溶液；流速控制在1.2mL/min，溫度設(shè)定為35℃。實(shí)驗(yàn)儀器采用上海聲源超聲波儀器設(shè)備有限公司的高效液相色譜儀。在最佳色譜條件下，各種成分在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)聯(lián)性，7種人參皂苷的回收率達(dá)到94.%～97.9%，結(jié)果令人滿意。表1為實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄數(shù)據(jù)。

表1 人參皂苷加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=3）

1.2 HPLC在抗生素類藥物分析中的應(yīng)用

抗生素是通過(guò)微生物或其他方法產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)，該物質(zhì)在高度稀釋的情況下，仍然有很強(qiáng)的抑制或滅殺微生物的性能，因此在臨床得到了廣泛應(yīng)用。傳統(tǒng)的分析方法分析時(shí)間長(zhǎng)、專一性較差，而高效液相色譜法在抗生素類藥物檢測(cè)中發(fā)揮了巨大的作用。Raphael Denooz等［3］利用高效液相色譜和紫外檢測(cè)器對(duì)人體血漿中的5中β-內(nèi)酰胺類抗生素進(jìn)行了檢測(cè)，流動(dòng)相采用乙腈-磷酸鹽緩沖溶液（pH7.4），梯度洗脫；血漿樣品經(jīng)過(guò)固相萃取柱凈化后進(jìn)入HPLC進(jìn)行分析，血漿樣品回收率達(dá)到93.2%以上，結(jié)果令人滿意。

1.3 HPLC在毒物分析中的應(yīng)用

甲基苯丙胺（MA）的主要活性代謝物苯丙胺（PA）與MA具有類似的藥理作用，但其毒性較強(qiáng)，成人一次用量達(dá)到PA30mg就會(huì)出現(xiàn)中毒反應(yīng)，達(dá)到200mg就會(huì)使人中毒致死；MA和PA是濫用藥物“搖頭丸”的常見(jiàn)成分。楊小紅等［4］利用HPLC法對(duì)臨床中毒患者血漿中的MA和PA含量進(jìn)行了測(cè)定。測(cè)定方法如下：先將血漿樣品堿化，然后通過(guò)固相萃取柱凈化，再用鹽酸（0.3%）溶液洗脫；色譜柱選用島津CLCC18柱，流動(dòng)相選用乙腈-甲醇-磷酸二氫鉀（25mmol/L）緩沖溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)定為210nm，檢測(cè)時(shí)間為60min，為臨床的快速診斷和搶救提供了可靠的依據(jù)。

1.4 HPLC在藥代動(dòng)力學(xué)中的應(yīng)用

HPLC法除可對(duì)藥物成分和含量進(jìn)行分析外，還能對(duì)藥物在肌體內(nèi)的濃度進(jìn)行測(cè)定，然后結(jié)合相關(guān)的數(shù)據(jù)分析技術(shù)，對(duì)藥物代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行分析。Gholamreza Bahramin等［5］利用高效液相色譜法對(duì)人血清中的阿奇霉素進(jìn)行了分析，方法如下：利用己烷對(duì)血清樣品進(jìn)行處理后用FMOC-Cl進(jìn)行衍生，然后熒光檢測(cè)；色譜柱選用苯基柱；流動(dòng)相選用磷酸鹽緩沖-甲醇，定量方法為內(nèi)標(biāo)法。血藥濃度在10-500ng/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系，檢測(cè)靈敏度可達(dá)到10ng/mL。HPLC法在藥代動(dòng)力學(xué)上的研究可為藥代動(dòng)力學(xué)軟件提供數(shù)據(jù)，經(jīng)過(guò)專業(yè)的數(shù)據(jù)分析后可獲得吸收半衰期、消除半衰期、達(dá)峰時(shí)間、最大血藥濃度一系列動(dòng)力學(xué)參數(shù)，為藥物的深入分析和研制提供了參考。

2 結(jié)語(yǔ)

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，HPLC技術(shù)將與其他的先進(jìn)技術(shù)聯(lián)合使用，進(jìn)一步提高藥物分析的速度、質(zhì)量和靈敏度，為我國(guó)醫(yī)學(xué)水平的提高和醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展提供重要保障。

［1］劉麗敏.高效液相色譜在中草藥和抗生素類藥物分析中的應(yīng)用［D］.西南大學(xué)，2008.

［2］朱余兵，周志娟，于翠霞，鄒建軍，張晶晶，楊小紅.HPLC法測(cè)定人血漿中奈韋拉平的濃度［J］.中國(guó)藥房，2011，06：512-513.