浙江省青褶傘屬一個新記錄種的鑒定

趙玉蓮 吳邦仁 劉 昆 顧新偉*

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浙江省青褶傘屬一個新記錄種的鑒定

趙玉蓮1吳邦仁2劉 昆3顧新偉2*

（1. 麗水市蓮都區(qū)聯(lián)城農業(yè)技術服務站，浙江麗水 323000；2. 麗水市農作物站，浙江麗水 323000 3. 麗水市農業(yè)科學研究院，浙江麗水 323000）

記錄到的青褶傘屬中疑似存在2種不同種，分別對2個樣本進行生態(tài)學觀察，依據(jù)形態(tài)學特征鑒定，結合Rdna-ITS分析，確認浙江省青褶傘屬大型真菌中存在擬乳頭狀青褶傘和大青褶傘2個種。此前，浙江省域沒有擬乳頭狀青褶傘的報道，其一直被誤認為與大青褶傘同種。

青褶傘；擬乳頭狀青褶傘；鑒定

根據(jù)文獻數(shù)據(jù)庫檢索，大青褶傘（(G. Mey.) Massee）是浙江省大型真菌資源研究中唯一被記錄的青褶傘屬物種。該種屬毒蕈，常年在秋季或初夏發(fā)生，與高大環(huán)柄菇、脫皮環(huán)柄菇等食用菌發(fā)生期基本一致，宏觀形態(tài)也有些相似，不易區(qū)分，而常被誤食，引起野生菌中毒事故。

大青褶傘含有引發(fā)胃腸炎型、肝腎損害型和溶血型中毒的多種毒素[1]，誤食后除出現(xiàn)腹痛、惡心、嘔吐等胃腸炎癥狀外，還會引起肝臟傷害、血相異常等情況。從一些中毒病人和醫(yī)務人員處得知，食用大青褶傘屬中毒，僅出現(xiàn)胃腸炎型癥狀的病人，采取摧吐、洗胃、補液等措施可以治愈。而同一種毒蕈中毒出現(xiàn)兩種截然不同的中毒癥狀，則存在大青褶傘近似種的可能性[2～4]。經野生環(huán)境調查和形態(tài)學鑒定，結合核酸序列分析，確認近似種為擬乳頭狀青褶傘（(Hongo) Vellinga）。

1 材料與方法

1.1 標本采集地與生境觀察

分別選擇麗水市蓮都區(qū)聯(lián)城街道瑤畈村和蓮都區(qū)碧湖鎮(zhèn)下梁村2個青褶傘發(fā)生點，采集不同發(fā)育階段子實體標本，觀察兩地土壤、肥力、地表植被等主要生境。

1.2 子實體形態(tài)學鑒定

對采集的標本形態(tài)、大小及各組織結構進行觀測記錄，重點觀察標本間宏觀特征及其差異。

1.3 rDNA-ITS分析

將形態(tài)存在顯著差異的2個標本交由上海生工生物工程股份有限公司進行測序，將測得的序列與GenBank核酸序列數(shù)據(jù)庫進行比對，通過BLASTn檢索具有最大相似性的物種[3]。

2 結果與分析

2.1 青褶傘發(fā)生點主要生境

聯(lián)城街道瑤畈村附近山壟地，之前被附近河流洪水倒灌淹沒，土壤為砂壤土，施有較大量的羊糞和沼渣。標本A采集于路邊地塊，作物為生姜，作物周邊長有7個青褶菌，子實體呈散生狀。標本B采集于距標本A 15 m左右一空地，空地收獲玉米不久，長有成片子實體，約數(shù)千個，呈群生至叢生狀。

標本C采集于碧湖鎮(zhèn)下梁村村邊農地，土壤為壤土，在收獲茄子后的空地上堆放沼渣，沼渣堆及周邊地上長有百余個子實體，呈近叢生狀。在該村附近，當?shù)胤Q“對門淤”的淤地，四周環(huán)水，土壤為砂土。淤地高處有一養(yǎng)豬場，附近有堆放豬欄肥，雜草叢生。標本D采集于肥堆周邊地上，共長子實體5個，呈散生狀。

2.2 標本A、D主要形態(tài)特征

子實體表皮裂成鱗片，裸露的菌肉白色，傷變紅色，菌褶初期白色，老熟后或采摘后1 h內轉青綠色，菌環(huán)厚。標本A和D子實體整體較大，鱗片大且易脫落。標本B和C子實體整體較小，鱗片不易脫落。根據(jù)表觀形態(tài)及生境特征，初步判定標本A和D同種，標本B和C同種。

（1）標本A、D主要形態(tài)特征。子實體大，傷處變暗紅色、紅色，干時氣香。菌蓋直徑5～25 cm，初時近球形至半球形，后為扁半球形至平展，中間平緩凸起或平展，幼時表皮淡褐色，逐漸裂成鱗片。鱗片卷曲，干后深褐色，易脫落，頂部表皮較厚、成龜裂狀，鱗片脫落部分表面粗糙。菌肉白色或帶淺粉紅色，松軟。菌褶初期污白色，后期呈淺綠至青褐色，離生，寬，不等長，褶緣有粉粒。菌柄長10～28 cm，直徑1～2.5 cm，圓柱形，污白色至淺灰褐色，纖維質，表面光滑，基部稍膨大，內部空心。菌環(huán)肉質，稍厚呈環(huán)形，生于菌柄上部，可移動，色白，下面呈紫色或褐色斑紋。孢子印帶青黃褐色，后呈淺土黃色。孢子大小8～12×6～8（μm），光滑，具明顯芽孔，寬卵圓形至寬橢圓形（圖1a）。

（2）標本B、C主要形態(tài)學差異。子實體一般中等大，株高只有標本A、D的50%左右，大小比較一致，但最大個體菌蓋直徑達17 cm，比標本A、D中較小的個體大。菌蓋老熟后呈扁平，邊緣略上翹，中部有明顯凸起，部分凸起成乳頭狀。凸起部分表皮色深，緊貼，不成鱗片。鱗片淡黃褐色，較薄，色較淺，一般成龜裂狀，不脫落，但在氣候干燥或晴天時會卷曲脫落。菌皮脫落后裸露的菌肉往往形成新的纖毛狀鱗片，在陰暗處呈白色至乳白色，陽光照射后呈淺黃白色至炒米黃色。菌褶初時乳白色或粉黃色，在十分老熟后或采摘后才逐步呈青綠色（圖1b、圖1c）。菌環(huán)下面未見紫色斑紋。孢子比標本A、D小1～2 μm。

a：標本D

b：標本B（晴天）

c：標本C（雨后）

2.3 rDNA-ITS分析結果

子實體基因組DNA的ITS區(qū)域PCR擴增產物，經測序及修正分析后，標本A、D得到一條732 bp的有效堿基序列，標本B、C得到一條716 bp的有效堿基序列（圖2）。序列經核酸序列數(shù)據(jù)庫比對的結果，標本A、D與大青褶傘（）同源性最高；而標本B、C則與擬乳頭狀青褶傘（）同源性最高。

圖2 標本C實體ITS區(qū)域堿基序

3 討 論

擬乳頭狀青褶傘與擬乳頭狀大環(huán)柄菇（）為同物異名關系[4]，此前筆者在相關專著中曾以擬乳頭狀大環(huán)柄菇之名發(fā)布。但受鑒定能力與手段的局限，之前鑒定已證明是個錯誤，此文做一個訂正[5]。

結合近幾年野生菌采集情況看，2種青褶傘多發(fā)于9月下旬至11月上旬，持續(xù)時間約3周，初夏季節(jié)也有少量發(fā)生。大青褶傘大多長在有機質豐富的砂性土壤，在同一地塊的發(fā)生量往往不大，生長習性為單生或散生。而擬乳頭狀青褶傘則多發(fā)生在肥堆或有機肥非常多的土壤上，對土壤類型要求不高。在同一地塊的發(fā)生量往往很大，生長習性多為群生至近叢生，生境與生長習性的差異或許是兩者重要的區(qū)分點。

兩種青褶菌都有傷變紅色、菌褶老熟后或采摘后變青綠色的情況，這是青褶菌屬的共同特性。由于野生狀態(tài)大型真菌的形態(tài)受環(huán)境條件影響會有較大的變化，使得種類鑒別易出現(xiàn)偏差。大青褶傘與擬乳頭狀青褶傘二者表觀形態(tài)，在不同的氣候、土壤基質條件下都會出現(xiàn)較大的差異，它們的鑒別關鍵點可集中在菌蓋中心凸起部位及其菌皮、鱗片形態(tài)，以及子實體整體大小等方面。

[1] 龔慶芳, 張玉梅, 譚寧華, 等. 三種毒菌的化學成分研究龔慶芳[J]. 天然產物研究與開發(fā), 2010(22): 185-188.

[2] 圖力古爾, 包海鷹, 李玉. 中國毒蘑菇名錄[J]. 菌物學報, 2014, 33(3): 517-548.

[3] 宋小亞, 劉德云, 李陽, 等. 野生赭鱗蘑菇及其分離菌株的鑒定[J]. 食用菌學報, 2012, 19(1): 27-35.

[4] 卯曉嵐. 中國毒菌物種多樣性及其毒素[J]. 菌物學報, 25(3): 345-363.

[5] 顧新偉, 何伯偉. 浙南山區(qū)大型真菌[M]. 杭州: 浙江科學技術出版社, 2012.

S646

A

2095-0934（2017）03-178-03

浙江省現(xiàn)代種業(yè)發(fā)展工程項目“浙南山區(qū)藥用真菌種質鑒定與評價”（浙財農[2014]232號）

*通訊作者：顧新偉（1961—），男，農業(yè)技術推廣研究員，近十余年主要從事大型真菌資源調查研究工作。E-mail：894397403@qq.com