三聯體親子鑒定案件突變分析

陳海英 趙 蕾

（1.贛州市公安局司法鑒定中心，江西贛州341000; 2.公安部物證鑒定中心，北京100038）

三聯體親子鑒定案件突變分析

陳海英1趙 蕾2

（1.贛州市公安局司法鑒定中心，江西贛州341000; 2.公安部物證鑒定中心，北京100038）

對12例不符合遺傳規(guī)律的三聯體親子鑒定案例進行檢驗，分析其對親子鑒定案件結果的影響及解決方法。收集678例親子鑒定中12例均只存在一個STR基因座突變的案件血液樣本，采用三種不同的擴增試劑檢測，分析突變來源并計算其父權指數。11例均為一步突變，第12例則在D 21S11基因座疑父與子代存在三步突變，經過增加體系，其共有7個STR基因座與子代不符合遺傳關系。對于親子鑒定中出現少數基因座不符合遺傳規(guī)律時，需要綜合分析，必要時應增加檢測基因座的數量，避免親子關系的誤判。

STR突變親子鑒定

短串聯重復序列（short tandem repeat, STR）是目前使用最廣泛的遺傳標記，因其多態(tài)性豐富，擴增片段長度短，廣泛地應用于法醫(yī)物證鑒定中[1]。STR多態(tài)性片段長度<400bp，易于擴增。但STR位于人類基因組高變區(qū)，突變率較高，在親子鑒定中不容忽視。本文采用IdentifilerTMPlus試劑盒（美國ABI公司）檢驗的678例三聯體親子鑒定中的12例均只存在一個STR基因座突變的案件中的基因突變進行統(tǒng)計分析。

1 材料和方法

1.1 樣本和DNA提取

678例三聯體親子鑒定案例樣本，取自贛州司法鑒定中心和贛州市公安局日常檢驗和檢案中的樣本。均采用Chelex-100法提取模板DNA，4℃保存。

1.2 DNA擴增與檢測

采用IdentifilerTMPlus試劑盒（美國ABI公司）、MicroreaderTM21 ID System和MicroreaderTM23sp ID System擴增試劑對樣本進行復合擴增。擴增產物在3130XL型遺傳分析儀（美國ABI公司）上進行毛細管電泳分型。

1.3 TR基因座突變來源分析

按照文獻［2］的方法判斷突變來源。在父親或母親的等位基因中，根據這兩個等位基因與新等位基因的差異來確定，差異小的定為新等位基因的來源，若差異相同，則無法確定來源，因此可將突變類型分為“來自父親”、“來自母親”和“無法確定”3類。

2 結果

2.1 IdentifilerTMPlus試劑盒檢測

在678例三聯體親子鑒定中，僅通過Identi?filerTMPlus試劑盒檢測后存在一個STR基因座不符合遺傳規(guī)律的共12例。

2.2 突變來源和突變步數分析

分析上述12例親子鑒定中發(fā)生突變的STR分型數據，前11例均為一步突變，其中9例突變來自父親，2例突變?yōu)闊o法確定突變來源。第12例則在D21S11基因座上生母分型確定的前提下，子代在疑父分型中無法找到來源。

2.3 MicroreaderTM試劑盒檢測

采用蘇州閱微基因技術有限公司生產的Mi?croreaderTM21 ID System和MicroreaderTM23sp ID System擴增試劑對12例親子鑒定樣本進行進一步檢測，檢測基因座達到39個STR基因座，前11例案件樣本經過檢驗其增加的STR基因基因座均符合遺傳關系，第12例案件樣本經過檢驗，其中疑父在D21S11、PentaE、D10S1435、D17S1290、D3S3045、D15S659、D7S3048等7個STR基因座與子代不符合遺傳關系。

3 討論

DNA分子結構為雙螺旋結構。在DNA復制的過程中，其新生鏈和模板鏈分離時，在STR基因座的重復區(qū)域發(fā)生堿基錯配形成一個或數個重復區(qū)域的環(huán)狀結構，繼而出現新生鏈比模板鏈延長或縮短，表現為增加或減少1個（或數個）重復單位。復制滑鏈錯配通常發(fā)生在重復次數較多、串聯排列的正向重復序列中[3]，故其突變率較大。

在日常檢案中，對于STR基因座突變這一現象，不應套用定性思維，認為突變基因座數量少于3個則按照突變考慮而給出不排除親子關系結論。如筆者在近幾年采用IdentifilerTMPlus試劑盒檢驗的678例三聯體親子鑒定中統(tǒng)計出的12例只存在一個STR基因座突變的案件，依據GA/T965-2011《法庭科學DNA親子鑒定規(guī)范》計算其累計父權概率，其中11例案件的父權概率大于0.9990，并且在增加系統(tǒng)檢驗后其增加的STR基因基因座均符合遺傳關系，故給出肯定結論；而另1例案件，增加系統(tǒng)檢驗后發(fā)現共有7個STR基因座疑父與子代不符合遺傳關系，因此可以排除D21S11為突變所致。

STR基因座等位基因突變普遍存在，為避免錯誤的排除親權關系。在日常檢案的親子關系判定中，必需考慮所有符合遺傳關系和不符合遺傳關系的基因座分型，計算其父權概率，看是否能達到“支持”或“排除”的結果。在給出肯定結論時，父權概率要達到或大于0.9990；在給出否定結論時，必須有3個以上或更多的基因座違反孟德爾遺傳規(guī)律[4]。必要時應增加STR基因座或結合其他遺傳標志進一步確認，從而保證檢驗結果的科學性和正確性。

［1］鄧志輝，吳國光，程良紅，等.13個STR基因座在親子鑒定案例中的基因突變觀察［J］.中國法醫(yī)學雜志，2003，18（3）：150-153.

［2］趙珍敏，柳燕，林源.IdentifilerTM系統(tǒng)在親子鑒定中的突變觀察和分析［J］.法醫(yī)學雜志，2007，23（4）：290-293.

［3］李茜，程良紅，魏天莉，等.親子鑒定中STR基因座的基因突變分析［J］.中國法醫(yī)學雜志，2008，23（6）：394-396.

［4］伍新堯，李建金，伍祥林，等.單親案的親權概率的計算及認定標準［J］.中國法醫(yī)學雜志，2000，S1(1).