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    羊肚菌人工栽培技術(shù)的幾個(gè)誤區(qū)*

    2016-03-14 03:45:55儲(chǔ)甲松江本利蘇香峰朱加保
    中國食用菌 2016年5期
    關(guān)鍵詞:母種原種羊肚

    儲(chǔ)甲松,張 揚(yáng),江本利,蘇香峰,於 春,朱加保,張 翼

    (1.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院懈棉花研究所,安徽 合肥 230031;2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)與信息研究所,安徽 合肥 230031)

    羊肚菌人工栽培技術(shù)的幾個(gè)誤區(qū)*

    儲(chǔ)甲松1,張 揚(yáng)2,江本利1,蘇香峰1,於 春1,朱加保1,張 翼1

    (1.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院懈棉花研究所,安徽 合肥 230031;2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)與信息研究所,安徽 合肥 230031)

    以四川綿陽食用菌研究所提供的羊肚菌菌株S1、S2和從安徽省岳西縣采集的野生羊肚菌分離出的菌株A1、A2作為母種,分別制成原種和栽培種,采用不同的栽培場地和栽培模式進(jìn)行比較試驗(yàn),確定菌種的性質(zhì)、適宜的場地和適宜的栽培模式。結(jié)果表明,原種和栽培種菌絲后期有變淺黃現(xiàn)象者為優(yōu)質(zhì)菌種,土壤以泥沙壤最佳,應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂虿扇∠鄳?yīng)栽培模式。

    菌株;母種;原種;栽培種;栽培模式

    羊肚菌(Morchella conica) 被推為世界三大名食用菌之首,營養(yǎng)豐富。屬于子囊菌亞門(Ascomy cotina) 盤菌綱(Discomycetes) 盤菌目(Pezizales)羊肚菌科(Morchellaceae) 羊肚菌屬(Morchella),因外形酷似羊肚而得名[1,2]。

    羊肚菌含有多種氨基酸,總氨基酸含量16.19%~19.50%,其中7種人體必需的氨基酸占氨基酸總量的34.97%~37.99%[3]。現(xiàn)代食品工業(yè)利用羊肚菌的菌絲通過發(fā)酵技術(shù)開發(fā)調(diào)味品和食品添加劑,成為現(xiàn)代食品工業(yè)中一個(gè)創(chuàng)新亮點(diǎn)[2]。

    羊肚菌性平,味甘寒,無毒。羊肚菌最早收錄于李時(shí)珍《本草綱目》,具有補(bǔ)腎、補(bǔ)腦、壯陽和提神的功能。對(duì)頭暈失眠、消化不良、腸胃炎癥等有良好的輔助治療作用[2,4]。

    由于羊肚菌有極高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值,野生羊肚菌又極其稀少,因此中外科學(xué)家投入大量精力進(jìn)行人工栽培研究。早在1883年,英、美、法就開始了羊肚菌的人工栽培研究,直到1958年J.Szuecs首次在發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)出羊肚菌的菌絲體。20世紀(jì)80年代,美國舊金山Ronald Ower在室內(nèi)成功地栽培出羊肚菌,但該技術(shù)對(duì)外嚴(yán)格保密,是美國DNP公司的秘密,且在美國本土以外不能重復(fù)[5]。

    我國羊肚菌的人工栽培研究起步較晚,20世紀(jì)50年代華中農(nóng)大楊新美教授提出相關(guān)的理論基礎(chǔ)和半人工栽培技術(shù)[1]。國內(nèi)許多研究者從羊肚菌的分類、成分、生態(tài)以及藥理方面做了相關(guān)的研究和報(bào)道[6-9]。目前人工栽培只限于野外仿生大棚栽培,且不能大面積栽培,還有相關(guān)的問題有待解決,如羊肚菌屬的物種形成機(jī)制知之甚少;人們對(duì)羊肚菌多樣化的生態(tài)特性所具有的生物學(xué)意義并不了解[9]等。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 供試菌株

    尖頂羊肚菌菌株S1、S2由四川綿陽食用菌研究所提供,A1、A2采自安徽省大別山岳西縣,為野生尖頂羊肚菌自制菌株。

    1.1.2 試驗(yàn)材料

    蔗糖為分析純,瓊脂、過磷酸鈣、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1為生化試劑,石膏、棉籽殼、櫟木屑、麥麩、胡蘿卜、黃豆粉、白糖市場購買。

    1.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基

    1.2.1 母種培養(yǎng)基及配置

    改良PDA培養(yǎng)基:胡蘿卜200 g、黃豆粉20 g、蔗糖20 g、MgSO·7H2O 1 g、K2H2PO41 g、維生素B10.1 g、瓊脂20 g,水1 000 mL[10]。稱取干凈的胡蘿卜200 g,切成小方塊,加入黃豆粉20 g,加水煮沸25 min,四層紗布過濾,在濾液中加入瓊脂20 g、蔗糖20 g、MgSO4·7H2O 1 g、K2H2PO41 g、維生素B10.1 g,加熱至瓊脂溶解,添水至1 000 mL,pH值自然,將培養(yǎng)基分裝到18 mm×180 mm的試管(量為試管的1/5)和廣口瓶中(量為厚0.5 cm),于121℃,0.15 MPa高壓滅菌25 min,冷卻至35℃左右時(shí)取出,將試管排成斜面待其冷卻至常溫,和廣口瓶一道保存在15℃恒溫箱內(nèi)待用。

    1.2.2 原種培養(yǎng)基配方及其配置

    原種培養(yǎng)基配方:櫟木屑50%、棉籽殼30%、麥麩15%、石膏1%、白糖1%、過磷酸鈣1%、腐殖土2%[11]。將培養(yǎng)基加水拌勻至含水率65%,手抓緊培養(yǎng)基有水漬為準(zhǔn)。將培養(yǎng)基裝入17.5 cm×31 cm耐高壓菌種袋,于121℃,0.15 MPa滅菌2 h,冷卻至常溫待用。

    1.2.3 栽培種培養(yǎng)基配方及其配置

    栽培種培養(yǎng)基配方:棉籽殼75%、麥麩20%、石膏1%、過磷酸鈣1%、腐殖土3%[12]。將培養(yǎng)基拌勻加水至含水率65%,裝袋置于121℃,0.15 MPa滅菌2 h,冷卻至常溫備用。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 母種分離、培養(yǎng)

    每年4月份將從岳西縣采集成熟的野生尖頂羊肚菌,在超凈工作臺(tái)內(nèi)將羊肚菌用75%的酒精消毒30 s,無菌水沖洗3次~5次,再用無菌紙將水吸干,將菌帽和菌柄用無菌刀分開,將菌帽用無菌鐵絲倒掛于有培養(yǎng)基的廣口瓶內(nèi),在18℃~20℃,光照4 500 lx環(huán)境中置放24 h,收集孢子,取出菌帽,待孢子萌發(fā)成絮狀菌絲后,用無菌接種針挑取菌絲轉(zhuǎn)到斜面試管純化,置于18℃~20℃環(huán)境中,1周左右長滿試管,選取試管內(nèi)菌絲粗壯、萌發(fā)旺盛的作為母種,將制好的母種置于3℃的恒溫箱中保存待用[10-12]。

    1.3.2 原種制作

    8月中旬,將上述制作好的原種培養(yǎng)基,在超凈工作臺(tái)或無菌接種箱內(nèi)分別接種A1、A2和S1、S2,母種在接種前要先活化,將恒溫箱溫度升至5℃放24 h,后放到10℃環(huán)境中48 h,再置于超凈工作臺(tái)24 h~48 h。每支母種可接5袋原種,接種后置于18℃~20℃的環(huán)境中,40 d左右菌絲長滿袋。后期觀察到接種A1的袋上部菌絲漸變?yōu)闇\黃色,A2菌絲白色,無變化,接種S1的袋上部菌絲變?yōu)闇\黃色,S2菌絲白色,無變化[10-12]。

    1.3.3 栽培種制作

    9月20日左右按上述栽培種配方制作好栽培種培養(yǎng)基,在接種箱中接入原種A1、A2、S1、S2,每袋原種可接50袋栽培種,接種后置于18℃~20℃的環(huán)境中,40 d左右菌絲長滿袋。同樣后期發(fā)現(xiàn)接種A1的袋上部菌絲漸變?yōu)闇\黃色,A2菌絲為白色,接種S1的袋上部菌絲為淺黃色,S2菌絲白色[10-12]。

    1.3.4 羊肚菌栽培

    11月份在岳西縣溫泉鎮(zhèn)斯橋村選水稻干田,翻耕耙細(xì),將地整成寬1.2 m,溝寬30 cm,溝深15 cm地塊,在試驗(yàn)地四周挖深溝瀝水,深30 cm左右,搭棚蓋上遮陽網(wǎng)和大棚膜,在11月10日之前,地溫降到18℃以下時(shí)播種,播種時(shí)將地表土剝?nèi)ズ? cm于溝內(nèi),撒上1%的石灰水,撒一層厚1 cm的經(jīng)121℃、0.15 MPa高壓滅菌2 h的栽培種培養(yǎng)基。再將栽培種去除塑料袋,用手將菌種掰成鵪鶉蛋大小的菌塊均勻撒在棉籽殼上,然后將溝內(nèi)的土覆蓋菌種厚3 cm,栽培完畢。栽培后若久晴不雨,地表發(fā)白,需在早晚灑水至土壤濕潤。當(dāng)冬季氣溫降到0℃以下結(jié)冰時(shí),覆蓋稻草,第2年春天氣溫回升,地溫穩(wěn)定在0℃以上時(shí)揭去稻草。單個(gè)菌種栽培面積36 m2。每個(gè)菌種做3個(gè)重復(fù),分2個(gè)大棚,都蓋遮陽網(wǎng),其中1個(gè)不蓋塑料膜。

    1.3.5 栽培試驗(yàn)

    試驗(yàn)栽培種為S1、A1。試驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù),分別在沙地 (pH6.5)、山地 (pH6.4) 和水稻田(pH6.3),每個(gè)重復(fù)12 m2,大棚均蓋遮陽網(wǎng)和大棚膜,栽培技術(shù)同上。

    2 結(jié)果分析

    2.1 不是所有尖頂羊肚菌母種都能栽培出羊肚菌

    不同菌種在遮蓋、不遮蓋塑料膜時(shí)出菇情況見表1。

    表1 不同菌種在遮蓋、不遮蓋塑料膜時(shí)出菇情況(鮮重)

    試驗(yàn)表明,菌種A2和S2的產(chǎn)量幾乎為零,也就是說在制作栽培種時(shí),一定要選擇菌絲轉(zhuǎn)黃的原種制栽培種(表1)。因?yàn)槟阜N菌絲均為白色,無法分辨。將S1、S2、A1、A2的栽培種菌絲制成載玻片,通過體視顯微鏡觀察,S1、A1有大量菌核,而S2、A2只有很少量的菌核[13],這表明菌核是羊肚菌出菇的關(guān)鍵條件之一[14]。

    2.2 不是所有的場地都適合栽培羊肚菌

    不同土壤對(duì)羊肚菌出菇的影響見表2。

    表2 不同土壤對(duì)羊肚菌出菇的影響

    不同場地栽培試驗(yàn)表明,水稻田更適合羊肚菌栽培,3個(gè)場地的pH值接近,但沙地不易涵水,菌絲易因干燥死亡,且沙地腐殖質(zhì)含量低;山地屬于沙土性質(zhì),易干燥,腐殖質(zhì)含量不高;水稻田屬壤土性質(zhì),保水保溫性能好,易于菌絲萌發(fā)生長,且水稻田土壤中有大量水稻根腐殖質(zhì),是出菇量高的根本原因[15]。

    2.3 栽培措施不同導(dǎo)致出菇量有較大差別

    從表1可以得知,蓋大棚膜出菇量是不蓋膜的5倍左右,這是因?yàn)樵牢骺h屬北亞熱帶濕潤性季風(fēng)氣候區(qū),年均降雨量1 445.8 mm,冬、春季降雨量較高,達(dá)到481.9 mm,菌絲容易澇死,而在四川綿陽不蓋膜產(chǎn)量影響不大,因?yàn)榫d陽冬季降雨量小。因此人工栽培羊肚菌要根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件決定栽培模式[11]。

    3 小結(jié)

    人工栽培羊肚菌要做到三關(guān):一是制種關(guān),要挑選原種菌絲后期變黃的菌種;二是場地選擇關(guān),選擇壤土栽培;三是栽培模式關(guān),根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂蜻x擇是否覆蓋大棚膜,冬季氣溫低的地區(qū)要覆蓋稻草以防菌絲凍傷。只有把握好菌種關(guān)、場地關(guān)和栽培模式關(guān),才能保證出菇品質(zhì)和產(chǎn)量。

    [1]楊新美.中國食用菌栽培學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1988:537-540.

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    S646.9

    A

    1003-8310(2016)05-0086-03

    10.13629/j.cnki.53-1054.2016.05.022

    安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目(15A0729)。

    儲(chǔ)甲松(1965-),男,本科,助理研究員,主要從事大型真菌人工栽培研究。E-mail:764414462@qq.com

    2016-06-22

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