牛病毒性腹瀉-黏膜病研究概述

王國超，白　鴿，王　選，吳奇強(qiáng)

(渭南市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西渭南 714000)

?

專論與講座

牛病毒性腹瀉-黏膜病研究概述

王國超，白鴿，王選，吳奇強(qiáng)*

(渭南市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西渭南 714000)

牛病毒性腹瀉-黏膜病是由牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)引起的牛的一種急性、熱性傳染病，主要表現(xiàn)為腹瀉、黏膜脫落、母畜流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和畸胎，持續(xù)性感染、免疫耐受與免疫抑制等。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行，特別是在許多畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的國家和地區(qū)普遍存在。我國有20多個(gè)省、市、自治區(qū)有該病流行，并且有較高的感染率。攜帶BVDV的牛是牛源生物制品及生物活性材料的潛在污染源，給畜牧業(yè)生產(chǎn)及相關(guān)領(lǐng)域造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。論文主要對牛病毒性腹瀉-黏膜病的病原學(xué)分類與分型、感染與流行情況、國內(nèi)外現(xiàn)狀及防控策略進(jìn)行了綜述。

牛病毒性腹瀉；病原學(xué)；流行病學(xué)；防控

牛病毒性腹瀉-黏膜病(Bovine viral diarrhea-mucosal disease，BVD-MD)，簡稱牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhea,BVD)或黏膜病(Bovine mucosal disease，BMD)，是由牛病毒性腹瀉病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染牛引起的，以發(fā)熱、咳嗽及懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)出畸形胎兒為特征的傳染病[1]。臨床癥狀表現(xiàn)為高熱、白細(xì)胞減少、不食、下痢、沉郁、大量流涎、反芻停止、產(chǎn)奶量下降甚至停止產(chǎn)奶、口腔黏膜充血,嚴(yán)重的出現(xiàn)潰瘍灶、鼻腔內(nèi)流出大量黏性分泌物[2]。目前檢測BVDV方法主要有RT-LAMP、RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR等[3]。該病于1946年在美國紐約州首先報(bào)道，隨后在美國的其他州和世界各地也相繼報(bào)道并且得到分離毒株[4]。1971年，美國獸醫(yī)協(xié)會(huì)將該病統(tǒng)一命名為“牛病毒性腹瀉-黏膜病”(BVD-MD)，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國在進(jìn)出境檢疫中將其列為二類動(dòng)物疫病。

1　BVDV病原學(xué)分類與分型

BVDV在分類學(xué)上是黃病毒科(Flaviviridae)、瘟病毒屬(Pestivirus)的成員，且是瘟病毒屬的代表種，該屬病毒還包括豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)和邊界病病毒(Border disease virus，BDV)，這3種病毒存在著結(jié)構(gòu)與抗原相關(guān)性，同時(shí)存在血清學(xué)交叉反應(yīng)[4-5]。根據(jù)BVDV接種細(xì)胞后能否產(chǎn)生細(xì)胞病變，可將其分致細(xì)胞病變型(cytopathic biotype，CP)和非致細(xì)胞病變型(non-cytopathic biotype，NCP)兩個(gè)生物型(biotype)，兩個(gè)生物型毒株雖然與宿主細(xì)胞作用不同，但只有一種血清型[6]。根據(jù)BVDV基因組5′端非編碼區(qū)(5′-untranslated region，5′-UTR)的序列，將其分為基因1型(BVDV-1)和基因2型(BVDV-2)，兩者在抗原性上存在較大差異[7]。傳統(tǒng)毒株如CV24株、Singer株、NADL株與NY-1株等屬于BVDV-1。與牛出血綜合征有關(guān)的毒株和比1型毒力強(qiáng)的毒株屬于BVDV-2[8]。同時(shí)根據(jù)BVDV的其他基因也可進(jìn)行分型，用Npro和E2基因分型結(jié)果與BVDV 5′非編碼區(qū)分型結(jié)果一致,由于E2是BVDV的主要保護(hù)性抗原，很多基因工程疫苗主要都是針對E2基因進(jìn)行設(shè)計(jì)[9-10]。根據(jù)5′-UTR序列分析結(jié)果，可以進(jìn)一步將BVDV-1分為11個(gè)基因亞群，即BVDV 1a-1j群和鹿群(基因亞型)，其中1a和1b已經(jīng)廣泛流行于北美和歐洲，而我國主要是1b和1c亞型[6,9]。目前，BVDV-1型毒株被普遍應(yīng)用于生產(chǎn)疫苗、診斷和研究，而BVDV-2主要出現(xiàn)在由于急性感染引起出血綜合征(HS)，其臨床特點(diǎn)表現(xiàn)為白細(xì)胞減少、發(fā)熱、腹瀉、血小板減少、出血和死亡。

2　BVDV感染與流行

2.1傳染源

患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物是主要的傳染源，感染的懷孕母牛排出的流產(chǎn)胎兒也是BVDV的一個(gè)傳染源?；疾〉目祻?fù)牛仍可帶毒排毒6個(gè)月，是一個(gè)不可忽視的傳染源。臨床上很多無明顯癥狀的隱性感染動(dòng)物也可傳播BVDV?；疾?dòng)物在急性期時(shí)，其血液、排泄物、分泌物、骨髓、免疫器官等都可檢出該病毒。當(dāng)血清中存在中和抗體時(shí),甚至仍能從白細(xì)胞層中分離出病毒。BVDV感染陰性妊娠動(dòng)物能引起胎兒的免疫抑制，導(dǎo)致持續(xù)性的病毒血癥，這種看似健康，但始終帶毒排毒，是BVDV最危險(xiǎn)的傳染源，某些牛源生物制品如細(xì)胞系、血清、精液、胚胎等，也會(huì)污染有BVDV，這也是該病的潛在傳染源[11]。

2.2傳播途徑

該病傳播途徑多樣化，主要通過消化道和呼吸道傳播，直接接觸或間接接觸也可傳播。有的通過胎盤垂直傳播，同時(shí)污染的飼料、飲水、工具以及接種污染有BVDV的疫苗，自然交配或人工授精，當(dāng)精液中帶有的BVDV都可造成感染。在野外，吸血昆蟲則是反芻動(dòng)物感染該病毒的重要媒介和途徑[12]。

由于BVDV可造成牛的持續(xù)性感染和免疫耐受，感染動(dòng)物可長期或終生帶毒，經(jīng)?；虿欢ㄆ谂哦荆且粋€(gè)重要的傳染源[13]。BVDV多是通過垂直傳播引起的，某些持續(xù)性感染動(dòng)物在出生后便死于腸道或呼吸道病原感染，給養(yǎng)殖戶造成經(jīng)濟(jì)損失。甚至產(chǎn)生一些弱胎，常因發(fā)育不良而影響生產(chǎn)性能[14]，因此在根除BVD過程中持續(xù)性感染是遇到的最大障礙。

2.3易感動(dòng)物

BVDV的最易感動(dòng)物主要是牛，不分種類、年齡段，但6月齡～18月齡的犢牛最易感染且發(fā)病。在新疫區(qū)多是急性病例，發(fā)病率不高，病死率很高，甚至達(dá)到90%～100%。在老疫區(qū)多是隱性感染病例，發(fā)病率和病死率均較低[15]。BVDV還可感染豬、綿羊、鹿及野生反芻動(dòng)物，Doyle的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，50種反芻動(dòng)物可感染BVDV[16-17]。BVD呈地方性流行，在封閉牛群中呈現(xiàn)暴發(fā)式流行。該病流行無明顯的季節(jié)性，但冬春季常發(fā)，自然發(fā)病病例全年可見。

3　國內(nèi)外現(xiàn)狀

該病自1946年在紐約被發(fā)現(xiàn)以來，已經(jīng)在全球范圍內(nèi)廣泛流行和傳播，特別在畜牧業(yè)發(fā)達(dá)國家和地區(qū)比較普遍。在印度南部地區(qū)對奶牛的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，BVDV抗體陽性率為24.7%[18]。韓國國家獸醫(yī)局的調(diào)查顯示，2013年韓國奶牛BVDV抗體陽性率高達(dá)66.4%。BVDV1和BVDV2的感染普遍存在，有報(bào)道薩能奶山羊感染BVDV的不同基因亞型，分別是BVDV-1a和BVDV-2a[19]。在西班牙南部，紅鹿的BVDV抗體陽性率為19.5%，牛的BVDV抗體陽性率為45.6%，感染的主要是1b亞型[20]。同時(shí)，BVDV能夠突破宿主特異性而感染其他動(dòng)物，已有多種野生動(dòng)物感染BVDV，如駱駝和鹿等。野生動(dòng)物感染BVDV的相關(guān)調(diào)查顯示，在美國野牛的感染率超過30%，羊駝血清陽性率為25.4%，秘魯羊駝的血清陽性率為11.1%，可見BVDV已經(jīng)成為影響羊駝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一種重要傳染病。在其他國家和地區(qū)，野生動(dòng)物都存在著不同程度的感染情況[21-22]。因此，該病毒不論在家畜，還是野生動(dòng)物中的感染情況比較普遍，加之野生動(dòng)物活動(dòng)范圍廣闊且常呈持續(xù)性感染，這就給BVDV的科學(xué)防控帶來一定的困難。

我國自1984年發(fā)現(xiàn)本病，目前在國內(nèi)廣泛存在，已有20多個(gè)省、市、自治區(qū)分離到病毒或查出抗體。Deng M L等[23]對我國8個(gè)省份的奶牛、肉牛、牦牛、水牛進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，血清BVDV抗體陽性率分別為89.49%、63.27%、45.38%和14.18%，RT-PCR檢測BVDV陽性率為22.64%。何美琳等[24]對川西北阿壩州牦牛3種病毒性腹瀉病的血清型調(diào)查發(fā)現(xiàn)，阿壩州8縣牦牛中BVDV感染普遍存在，血清抗體陽性率平均為44.3%。王曉亮等[25]對寧夏部分地區(qū)牛病毒性腹瀉的血清學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，寧夏4個(gè)地級市犢牛BVDV抗體陽性率高達(dá)64.92%，并有一定程度的抗原陽性，且主要發(fā)生在1月齡以內(nèi)的犢牛。董永森等[26]對青海省5個(gè)縣的BVDV血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，血清抗體陽性率平均為49.59%，最高的高達(dá)96.40%。王淑娟等[14]通過對北京、天津、陜西、山西、山東、新疆、河南、河北等地的11個(gè)奶牛場的BVDV流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，所調(diào)查的牛場都不同程度的存在BVDV感染，群陽性率高達(dá)100%，其中牛場中最高的陽性率達(dá)95.2%，最低的陽性率為28.8%，抗體陽性率50%以上的牛場占了72.7%。王文等[27]對新疆10個(gè)地區(qū)的牛血清BVDV抗體檢測發(fā)現(xiàn)BVDV感染較為嚴(yán)重，平均陽性率高達(dá)86.7%。國內(nèi)各地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查資料表明，在我國不同地區(qū)廣泛存在該病，并且一些地區(qū)還存在嚴(yán)重感染。這可能與我國近年來規(guī)?；⒓s化養(yǎng)殖的發(fā)展，存欄量的大量增加及頻繁引種和活畜貿(mào)易有一定的關(guān)系。

4　BVD的防控

目前，BVD已成為危害全球畜牧業(yè)的重要疫病之一，臨床表現(xiàn)形式多樣。要徹底消除牛病毒性腹瀉病的傳播，首先應(yīng)該加強(qiáng)動(dòng)物檢疫力度，控制傳染源，淘汰或撲殺患病動(dòng)物；其次對易感動(dòng)物進(jìn)行免疫接種，加強(qiáng)監(jiān)測。在歐洲等發(fā)達(dá)國家主要通過集中捕殺持續(xù)性感染的動(dòng)物消滅此病，而在發(fā)展中國家，由于國情和各方面的限制，主要通過免疫接種防控BVD，也有一些國家實(shí)施根除計(jì)劃控制本病[28]。各個(gè)國家和地區(qū)應(yīng)根據(jù)其經(jīng)濟(jì)狀況和畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展水平，制定出符合本國實(shí)際的防控措施。

疫苗免疫是防控本病的一個(gè)重要手段，由于我國對BVDV的研究起步較晚，尚無商品化的疫苗。目前，很多牛場主要使用豬瘟兔化弱毒疫苗進(jìn)行免疫接種，對該病具有一定的免疫保護(hù)效果。然而，由于BVDV是生物制品的常見污染源，活疫苗中可能本身含有BVDV，這就給檢疫帶來很大困難，也可能是造成BVD流行的重要原因。因此，提高牛源生物制品的安全，減少BVDV污染，加強(qiáng)BVD流行病學(xué)監(jiān)測，弄清BVDV流行毒株的基因型、致病力，建立完整的BVD流行病學(xué)資料，研究和制定出一套行之有效的綜合性防控措施，對于BVD的防控具有重要意義，也可確保畜牧業(yè)的健康快速發(fā)展。

[1]Givens M D,Marley M S.Immunology of chronic BVDV infections[J].Biolog J Inter Ass Biolog Stand,2013,41(1):26-30.

[2]李鵬,張淑琴,溫永俊,等.牛病毒性呼吸道疾病診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2013,34(4):90-93.

[3]李家偉,郭利,楊勇.等.牛病毒性腹瀉病毒LAMP檢測方法的建立與應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī),2015,42(12):3111-3118.

[4]殷震,劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].2版.北京：科學(xué)出版社,1997:631-645.

[5]李晶梅,劉丹,薛霜,等.豬瘟病毒和牛病毒性腹瀉病毒雙重RT-PCR鑒別檢測方法的建立及應(yīng)用[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,35(4):64-71.

[6]王煒,武華.牛病毒性腹瀉病毒的多型性及疫病防控[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2008,29(4):96-99.

[7]Monica G,Letizia C,Elisabetta R,et al.Increased genetic diversity of BVDV-1:recent findings and implications thereof[J].Virus Genes,2015,50:147-151.

[8]Rodrigo A,Alice F A,Stelamaris D,et al.The diversity of BVDV subgenotypes in a vaccinated dairy cattle herd in Brazil[J].Trop Anim Health Prod,2014,46(1):87-92.

[9]Gao S D,Luo J H,Du J Z,et al.Serological and molecular evidence for natural infection of Bactrian camels with multiple subgenotypes of bovine viral diarrhea[J].Vet Microbiol,2013,163(1/2):172-176 .

[10]張?jiān)?郝俊偉,劉紅娜,等.牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒C24V株E0截短基因密碼子優(yōu)化及其在卡介苗中的表達(dá)[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,41(3):71-76.

[11]張志,張美晶,董雅琴,等.豬用疫苗中牛病毒性腹瀉病毒污染的檢測與分析[J].中國動(dòng)物檢疫,2015,32(11):76-79.

[12]蔡寶祥.家畜傳染病[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2000,5:181-183.

[13]范晴,謝芝勛,謝志勤,等.牛病毒性腹瀉病毒NS3蛋白的原核表達(dá)及鑒定[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,35(5):36-39.

[14]王淑娟,王華,宋曉暉,等.牛病毒性腹瀉/黏膜病的診斷流行病學(xué)調(diào)查及防控[J].中國獸醫(yī)雜志,2014,50(3):38-40.

[15]Lanyon S R,Hill F I,Reichel M P,et al.Bovine viral diarrhoea:Pathogenesis and diagnosis[J].Vet J,2014,199(2):201-209.

[16]Doyle L G,Heuschele W P.Bovine viral diarrhea virus infection in captive exotic ruminants[J].J Am Vet Med Assoc，1983,183:1257-1259.

[17]Seong G,Oem J K,Lee K H,et al.Experimental infection of mice with bovine viral diarrhea virus[J]. Arch Virol,2015,160(6):1565-1571.

[18]Kulangara V,Joseph A,Thrithamarassery N,et al.Epidemiology of bovine viral diarrhoea among tropical small holder dairy units in Kerala,India[J].Trop Anim Health Prod,2015,47(3):575-579.

[19]Han Y J,Chae J B,Chae J S,et al.Identification of bovine viral diarrhea virus infection in Saanen goats in the Republic of Korea[J].Trop Anim Health Prod,2016,48(5):1079-1082.

[20]Victor R,Deborah K,Belén R,et al.Evidence of shared bovine viral diarrhea infections between red deer and extensively raised cattle in south-central Spain[J].BMC Vet Res,2016,12(1):1-11.

[21]Mahony T J,McCarthy F M,Gravel J L,et al.Genetic analysis of bovine viral diarrhea viruses from Australia[J].Vet Microbiol,2005,106(1):1-6.

[22]Mishra N,Rajukumar K,Tiwari A,et al.Prevalence of bovine viral diarrhea virus(BVDV) antibodies among sheep and goats in India[J].Trop Anim Health Prod,2009,41(7):1231-1239.

[23]Deng M L,Ji S K,Fei W T,et al.Prevalence study and genetic typing of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in four bovine species in China[J].PLoS One,2015,10(4):1-16.

[24]何美琳,張煥容,王永,等.川西北牦牛3種病毒性腹瀉病血清學(xué)調(diào)查[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,41(3):248-250.

[25]王曉亮,王玉梅,張玉玲,等.寧夏部分地區(qū)牛病毒性腹瀉的血清學(xué)檢測[J].中國動(dòng)物檢疫,2016,33(2):17-19.

[26]董永森,劉秀清,李煥榮,等.青海省牛病毒性腹瀉/黏膜病血清學(xué)調(diào)查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014(4):66-67.

[27]王文,張娟,員麗娟,等.牛病毒性腹瀉病毒血清抗體檢測[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,32(9):51-53.

[28]Givens M D,Newcomer B W.Perspective on BVDV control programs[J].Anim Health Res Rev,2015,16(1):78-82.

Introduction to Bovine Viral Diarrhea-Mucosal Disease

WANG Guo-chao,BAI Ge,WANG Xuan,WU Qi-qiang

(WeinanAnimalDiseaseControlCenter，Weinan,Shaanxi,714000,China)

As an acute and febrile infectious disease caused by bovine viral diarrhea virus(BVDV),bovine viral diarrhea-mucosal disease (BVD-MD) is characterized by diarrhea,mucosa exfoliative,pregnant cow abortion,dead fetus and abnormal fetus,persistent infection and immunotolerance,immunosupression.The epidemiological studies showed that BVD is widely prevalent in many countries and regions with developed cattle industry.The disease has been prevalent in more than 20 provinces with a high infection rates.Furthermore,cattle with BVDV are the potential source of contamination to bioproducts and bioactive materials，cause severe economic loss to animal husbandry production and related industry.This paper mainly introduced the pathogen classification and typing，infection and epidemic states at home and abroad，preventive strategies.

Bovine viral diarrhea;pathogen;epidemiology；prevention and control

2016-03-18

王國超(1985-)，男，陜西韓城人，助理獸醫(yī)師，碩士研究生，主要從事病原分子生物學(xué)研究。*通訊作者

S852.659.6

A

1007-5038(2016)10-0108-04