耕牛日本血吸蟲病診斷技術(shù)及防治綜述

安曉夢，譚 磊，謝麗花，胡麗麗，劉 偉,※

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128;2.湖南省耒陽畜牧水產(chǎn)局，湖南耒陽421800）

耕牛日本血吸蟲病診斷技術(shù)及防治綜述

安曉夢1，譚 磊1，謝麗花2，胡麗麗1，劉 偉1,※

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128;2.湖南省耒陽畜牧水產(chǎn)局，湖南耒陽421800）

了解耕牛日本血吸蟲病對我國大部分疫區(qū)造成的危害，為我國治療與防控血吸蟲病提供一定的依據(jù)與參考。對日本血吸蟲病的病理病因及危害、疾病的診斷及治療進(jìn)行了較詳細(xì)的闡述。

耕牛；日本血吸蟲?。辉\斷；治療；綜述

日本血吸蟲病是由日本血吸蟲成蟲寄生于患體所引起的地方性人畜共患性寄生蟲疾病，也是一種傳染病，嚴(yán)重?fù)p害患體的身體健康，抑制疫區(qū)的社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展。目前日本血吸蟲病已經(jīng)成為一種與環(huán)境變化和社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展聯(lián)系密切的公共衛(wèi)生問題，一直是國內(nèi)外專家學(xué)者關(guān)注的焦點(diǎn)[1-2]。在我國流行情況尤其嚴(yán)重[3-5]，雖然全國血吸蟲病感染率逐漸降低，但是其感染地區(qū)面積逐步擴(kuò)大，形勢十分嚴(yán)峻[6-8]。

1 日本血吸蟲的病理病因及危害

日本血吸蟲患者的糞便內(nèi)含有活卵，糞便的隨意排放是作為血吸蟲病主要傳染源的原因之一，釘螺是血吸蟲的唯一中間宿主。在疫區(qū)內(nèi)，除了洞庭湖的東方田鼠未發(fā)現(xiàn)被感染外，其他的哺乳動物均是血吸蟲病的受害者和傳播者[9]。

當(dāng)患體接觸疫水后，血吸蟲尾蚴通過機(jī)械作用和穿刺腺分泌的酶侵入宿主的皮膚[10]，引起皮炎，局部出現(xiàn)丘疹、紅斑和瘙癢；隨著時間的推移，童蟲在宿主體內(nèi)移行時，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)血管炎，毛細(xì)血管出現(xiàn)充血、栓塞、阻塞等癥狀；成蟲雖然對機(jī)體無致病作用，但是其可以引起機(jī)械性損傷，可導(dǎo)致靜脈周圍炎和靜脈內(nèi)膜炎；血吸蟲病的主要危害階段是蟲卵，臨床上導(dǎo)致宿主的肝、脾等器官腫大，嚴(yán)重導(dǎo)致死亡[11]。

2 日本血吸蟲病的診斷方法

我國自建國以來便一直堅(jiān)持開展日本血吸蟲病的防治工作，診斷學(xué)在防治工作中占據(jù)著至關(guān)重要的作用[12]。我國針對日本血吸蟲病的診斷方法分以下幾種：

2.1 病原診斷

病原檢查法即糞便直接診斷法，截至目前為止，病原檢查仍然是我國血吸蟲病診斷的常用途徑，在較低流行水平狀態(tài)下，病原檢查法的準(zhǔn)確性受到了廣泛地質(zhì)疑，但是由于其不可代替的價(jià)值，目前其仍然是我國評價(jià)疫區(qū)血吸蟲病真實(shí)流行情況的唯一途徑。針對糞便直接診斷法的低準(zhǔn)確性，目前采用“2片6檢”法（2次糞樣，每次檢查3次），可以有效的提高其準(zhǔn)確性[13]

2.2 免疫診斷

2.2.1 皮內(nèi)試驗(yàn)（intraderma1test,IDT）：皮內(nèi)試驗(yàn)是被測試者對血吸蟲抗原的速發(fā)性實(shí)驗(yàn)。但是受檢測部位僅限于患者的皮膚，此法簡便、快速，通常用于現(xiàn)場篩選可疑病例。但如果受試者經(jīng)有效化療治愈多年后仍會檢測出陽性，目前皮內(nèi)實(shí)驗(yàn)在我國很少應(yīng)用[13]。

2.2.2 檢測抗體：抗體檢測作為一種間接診斷的方法，雖然血吸蟲病的抗體檢測特異性沒有直接檢測法和病原檢測法效果好，但是其敏感性卻比兩者高，因此抗體檢測廣泛地應(yīng)用于日本血吸蟲病的流行病學(xué)調(diào)查[14]。目前檢測抗體的血吸蟲病血清學(xué)診斷方法很多，常用的有以下幾種：

（1）環(huán)卵沉淀試驗(yàn)：環(huán)卵沉淀實(shí)驗(yàn)在我國應(yīng)用較早，但是國內(nèi)外學(xué)者均認(rèn)為其不失為一種高效而敏感的血清試驗(yàn)[15]。當(dāng)受檢者血清的特異性抗體與干卵抗原之間達(dá)到一定的比例后才可以發(fā)生沉淀反應(yīng)，故檢測的環(huán)沉率結(jié)果容易因血清濃度和干卵抗原的免疫活性的不同而受到影響[16]。

（2）間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)(IHA)：間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)廣泛的應(yīng)用于日本血吸蟲病的檢測，其具有高度的敏感性與特異性，但是由于實(shí)驗(yàn)所用的紅細(xì)胞樣品制備手續(xù)相對復(fù)制，且紅細(xì)胞抗原不能長期得到保存，在使用上受到了較大的限制。當(dāng)使用冰凍干燥的紅細(xì)胞作為間接血凝試驗(yàn)對血吸蟲病患者進(jìn)行診斷時，其結(jié)果具有準(zhǔn)確度高、觀察結(jié)果試驗(yàn)短、操作簡便及血用量少、相對較適合現(xiàn)場應(yīng)用[17]。

（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是目前我國臨床試驗(yàn)檢測血吸蟲病免疫學(xué)指標(biāo)最受歡迎、應(yīng)用范圍廣泛的技術(shù)之一。其具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、方法簡便和重復(fù)性高等特點(diǎn)[18]。目前有較多的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的改良方法，如微波聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和Dot-ELISA快速診斷試驗(yàn)法等，與常規(guī)的ELISA試驗(yàn)相比較，具有縮短了試驗(yàn)時間、無需特殊儀器和結(jié)果易保存等特點(diǎn)，更加易于基礎(chǔ)推廣血吸蟲病的診斷與流行調(diào)查。

（4）免疫酶染色試驗(yàn)：免疫酶染色采取切片固相抗原，此法可以使日本血吸蟲蟲卵暴露抗原，從而使抗原與血清中的抗體更有效的結(jié)合反應(yīng)，且此法可以使結(jié)果得到放大，故其檢測的敏感性極高。另外，免疫酶染色法具有簡單經(jīng)濟(jì)、檢測時間短（約1.5h～2h）、檢測具有高度準(zhǔn)確性等特點(diǎn)，根據(jù)我國的日本血吸蟲病流行情況，認(rèn)為此法是一種比較適合我國的日本血吸蟲病的診斷技術(shù)。

2.2.3 檢測循環(huán)抗原：循環(huán)抗原檢測法是我國調(diào)查日本血吸蟲病的急性感染和感染情況調(diào)查所用的理想方法，由于宿主接受有效的治療后，其體內(nèi)不會再有循環(huán)抗原的存在，故而此法也可以用于判斷藥物的療效甚至寄生蟲病的耐藥性。

3 日本吸血蟲病的防治

3.1 藥物抗血吸蟲病療法

(1)硝硫氰胺(nighiocyamine，amoscanate)：硝硫氰胺為一種高效率的抗血吸蟲病藥物，對血吸蟲蟲卵具有直接殺滅作用，且導(dǎo)致蟲體死亡的最低濃度為1u1/m1，系一種廣譜驅(qū)蟲藥。目前我國有硝硫氰胺水溶性衍生物，其有效地簡化了血吸蟲宿主的給藥方式，更加能減少對大型動物給藥時的藥物損耗，提高了生物利用度。

(2)吡喹酮：在損害蟲體皮層及促進(jìn)Ca2+內(nèi)流使得蟲體發(fā)生痙攣方面效果顯著，該藥物可使血吸蟲的性粒細(xì)胞的趨化活性增強(qiáng)，同時促使淋巴細(xì)胞對血吸蟲成蟲抗原的應(yīng)答以及輔助性T細(xì)胞活力明顯增強(qiáng)。吡喹酮對各個發(fā)育階段的血吸蟲具有不同的殺傷作用，特別是對3h的童蟲，21d的童蟲及21d的成蟲有明顯的效果。

(3)青蒿琥酯：該藥物對日本血吸蟲童蟲能產(chǎn)生直接的損害作用。通過抑制酸性磷酸酶（ACPH）、蘋果酸脫氫酶（MDH）等的能量代謝和腸壁對紅細(xì)胞的消化，從而促使童蟲的腸壁上層細(xì)胞腫脹、壞死、溶解、脫落。

此外，還有蒿甲醚等藥物對血吸蟲有明顯的殺滅作用。

3.2 疫苗抗血吸蟲病療法

血吸蟲疫苗的研制已達(dá)八十余年，經(jīng)歷過死疫苗、活疫苗、分子疫苗三個階段。死疫苗基本上沒有保護(hù)效果；活疫苗有一定的保護(hù)性，但是其潛在的危險(xiǎn)性無法在血吸蟲病防治中得到應(yīng)用推廣；分子疫苗中的候選分子谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GST）、磷酸丙糖異構(gòu)酶（TPI）、23KD膜蛋白（Sj23）等獲得國際公認(rèn)，并在動物模型上獲得一定的保護(hù)性效果。但是這些疫苗保護(hù)性效果差，且血吸蟲具有逃避宿主免疫攻擊作用，目前并沒有合適的疫苗進(jìn)入實(shí)際生產(chǎn)階段。

3.2.1 不同有效抗原抗原肽的聯(lián)合：從不同有效的抗原分子中篩選出幾種有效抗原肽，利用這些有效抗原肽制成多價(jià)合成多肽疫苗，能夠增強(qiáng)免疫動物的免疫保護(hù)力。

3.2.2 不同的單價(jià)抗原混合免疫：用不同的單價(jià)抗原分子混合在一起，而2個單價(jià)抗原疫苗簡單混合，其空間結(jié)構(gòu)不受影響，各組分的協(xié)同性良好，均能夠發(fā)揮其免疫作用，致使最終的免疫保護(hù)力增強(qiáng)[19]。

3.3 免疫防治

經(jīng)試驗(yàn)被治愈的感染血吸蟲患者體內(nèi)含有較高水平的IgE抗體，比那些體內(nèi)含有低水平IgE的人再次感染蟲卵的幾率要小10倍多。此外，體外血液濾過實(shí)驗(yàn)證明體內(nèi)的血吸蟲是非常有效的。

3.4 預(yù)防血吸蟲病措施

3.4.1 消滅釘螺，切斷傳播途徑。釘螺是日本血吸蟲的唯一中間宿主，消滅釘螺是切斷傳播途徑的重要措施。對有螺地區(qū)采取水泥管道和水泥磚砌等方法實(shí)施硬化措施，有效的改變釘螺的滋生環(huán)境，降低釘螺面積，減少人群的感染幾率。

3.4.2 加強(qiáng)糞便管理，保護(hù)水資源。對人、畜糞便進(jìn)行有效的管理，防止血吸蟲蟲卵進(jìn)入水源，此法是控制血吸蟲病流行的重要環(huán)節(jié)；推廣沼氣池建設(shè)，將人、畜糞便進(jìn)行無害化處理，并可成為有機(jī)肥料；盡可能減少人、畜接觸疫水的機(jī)會；對疫水周圍地區(qū)進(jìn)行藥物處理，殺滅尾蚴。

4 未來展望

目前我國缺乏較為理想的防治措施和高效、低毒、價(jià)廉且適合大面積使用的滅螺藥物，總之我國的血吸蟲防治形勢仍然比較嚴(yán)峻，尚需艱苦的努力，需要大量的人力物力作后盾，還有科學(xué)技術(shù)的支持。我國診斷血吸蟲的主要方法是糞孵法，需要研制出更為操作簡便，準(zhǔn)確性高，適用于現(xiàn)場的診斷試劑。今后必須加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)和科學(xué)研究，深入開展血吸蟲病防治工作，逐步控制疫情，減輕危害，以達(dá)到消滅血吸蟲病的目的。

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S858.23

A

1006-4907（2016）02-0046-03

10.3969/j.issn.1006-4907.2016.02.022

2015-11-19

湖南省科技廳一般項(xiàng)目（2014NK3049）；湖南省畜牧水產(chǎn)局項(xiàng)目；湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)院學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目（dycx1505）。

※通訊作者：劉偉，研究方向：獸醫(yī)寄生蟲學(xué)，wei1iupro@163.com。