新城疫的合理免疫及常見疫苗使用誤區(qū)

程小果，王　慧，程　寧，陳申秒，朱　杰，張小榮，吳艷濤

(1.山東濱州沃華生物工程有限公司,山東濱州 256606；2.山東畜牧獸醫(yī)?？茖W校,山東濰坊 261061；3.揚州大學獸醫(yī)學院,江蘇揚州 225009)

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新城疫的合理免疫及常見疫苗使用誤區(qū)

程小果1，王慧1，程寧2，陳申秒1，朱杰1，張小榮3，吳艷濤3

(1.山東濱州沃華生物工程有限公司,山東濱州 256606；2.山東畜牧獸醫(yī)專科學校,山東濰坊 261061；3.揚州大學獸醫(yī)學院,江蘇揚州 225009)

摘要：新城疫是由新城疫病毒引起的危害多種家禽特別是陸生禽類的最主要的傳染病之一，疫苗免疫接種是目前國內(nèi)預防該病的主要防疫手段。試驗研究及臨床實踐結果表明，使用與流行株基因型匹配的疫苗株，并采用新城疫活疫苗配合滅活疫苗的免疫方式，可起到體液免疫及細胞免疫的雙重作用，其中黏膜免疫在預防新城疫中也發(fā)揮重要作用。筆者在長期基層養(yǎng)殖技術服務中發(fā)現(xiàn)，很多養(yǎng)殖場在新城疫疫苗的使用方案、方法及免疫程序等方面存在一些誤區(qū)，嚴重干擾了疫苗發(fā)揮作用，從而造成臨床新城疫的發(fā)病。

關鍵詞：新城疫；免疫；疫苗使用；常見誤區(qū)

新城疫(Newcastle disease，ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起的危害多種家禽特別是陸生禽類的最主要傳染病之一。一些發(fā)達國家采用強制撲殺強毒感染禽群為主的方法，已基本控制了本病。由于整體飼養(yǎng)管理水平的限制和強毒感染的普遍存在，免疫接種目前仍是我國控制新城疫的主要辦法[1]。

根據(jù)NDV基因組結構和遺傳差異，NDV毒株可分為兩大類，即Class I和Class Ⅱ。當前所用疫苗株和引起歷史上新城疫4次大流行的毒株均屬于Class Ⅱ。根據(jù)病毒的F基因序列，從分子流行病學角度可以將目前Class Ⅱ中的NDV可被分為Ⅰ～Ⅺ 11個基因型[2]。其中基因Ⅶ型是目前我國流行的最主要NDV基因型，在各地的分離株中均占最大比例[3]。優(yōu)勢流行株與疫苗株的遺傳距離愈來愈遠，即使經(jīng)典疫苗株可誘導家禽產(chǎn)生高滴度的新城疫抗體，但在流行強毒攻擊后機體仍不能得到良好的保護，進而導致免疫失敗[4-5]。目前，很多地方新城疫的疫苗產(chǎn)品和免疫程序仍較混亂，加之新城疫病毒的毒力不斷增強和免疫原性不斷發(fā)生變異等因素的影響，如何利用現(xiàn)有的疫苗產(chǎn)品來有效防制新城疫已成為非常重要的問題。相關研究報道證實，新城疫滅活疫苗配合活疫苗使用，可達到較好的免疫保護效果[6-7]，特別是選擇基因Ⅶ型滅活疫苗，同時配合基因Ⅱ型(La Sota株、Clone 30等)或基因Ⅲ型(CS2)等活疫苗可使雞群建立快速的黏膜免疫和在組織、血液中產(chǎn)生持久高水平的循環(huán)抗體，在強毒感染情況下的臨床保護和有效降低排毒率方面更好[8-9]。

筆者在長期基層養(yǎng)殖技術服務中發(fā)現(xiàn)，很多養(yǎng)殖場(戶)在使用新城疫疫苗過程中存在一些誤區(qū)，嚴重干擾了疫苗作用的發(fā)揮，本文將新城疫疫苗的合理使用及常見使用誤區(qū)加以匯總和說明。

1新城疫的合理免疫

1.1新城疫疫苗的種類及特性

1.1.1活疫苗 常見的活疫苗有Ⅰ系(Mukteswar株)、Ⅱ系(Hitchner B1株)、Ⅲ系(F株)和Ⅳ系(La Sota株)苗等，因疫苗的特性差異，在使用方法及使用方式上也存在不同，故生產(chǎn)臨床需合理使用現(xiàn)有疫苗[10]。Ⅰ系苗為中等毒力疫苗毒株，適用于經(jīng)兩次弱毒苗免疫或2月齡以上的雞群，一般通過肌肉注射，產(chǎn)生抗體快，免疫期可達1年。因其毒力較強，接種雞群易出現(xiàn)精神不好、產(chǎn)蛋率減少、食欲不振等應激反應，且接種雞群的散毒容易污染養(yǎng)殖環(huán)境，故產(chǎn)蛋雞最好在產(chǎn)蛋前期或休蛋期做?；谝陨峡紤]，被列入農(nóng)業(yè)部公告的廢止獸用生物制品標準目錄，于2016年1月1日起，停止生產(chǎn)雞新城疫中等毒力活疫苗(即Ⅰ系苗)，且2017年1月1日起，全面停止經(jīng)營與使用Ⅰ系苗[11]。Ⅱ系、Ⅲ系和Ⅳ系苗均為弱毒株，可采用滴鼻、點眼、噴霧、飲水等多種方式進行免疫。Ⅱ系苗適用于各日齡段雞，在雛雞7日齡～10日齡使用效果較為確實，接種后7 d～9 d即產(chǎn)生保護力，一般采用點眼或滴鼻方式接種；Ⅲ系苗可用于各個日齡的雞，可飲水或滴鼻免疫；Ⅳ系苗毒力較Ⅱ系苗稍強，可滴鼻、點眼、噴霧、飲水等多種方式進行免疫，臨床應用也最為廣泛。此外，還有Ⅴ4、Clone30、ZM10等常見弱毒疫苗。Ⅴ4株因其耐熱性的特點，在熱帶及亞熱帶等氣溫較高地區(qū)應用廣泛，且其同群感染能力強，飲水免疫的效果較好；Clone30可突破母源抗體的干擾，安全性高，免疫力強，穩(wěn)定性好；ZM10株具有明顯的嗜腸道特性，在腸道和組織中均能快速繁殖，從而迅速誘導機體產(chǎn)生循環(huán)抗體和持續(xù)廣泛的黏膜免疫雙重功效，免疫保護更全面，更適合采用飲水免疫。

1.1.2滅活疫苗滅活疫苗依據(jù)佐劑的不同，可分為油乳劑苗、鋁膠苗和蜂膠苗，目前最常使用的為油乳劑苗。用于制備油乳劑滅活苗的毒株包括La Sota株、Ulster 2C株、A-Ⅶ等[12]，良好的毒株免疫原性和充足的抗原含量是其發(fā)揮作用的有效保證。油乳劑滅活苗免疫副反應小，抗體水平整體比較高，維持時間長，不受母源抗體的干擾，利于制備聯(lián)苗或多價苗，但因其采用皮下或肌肉等注射等方式故使用較費時費力，且生產(chǎn)成本較高。

1.2新城疫疫苗的合理使用

1.2.1新城疫疫苗的使用方案 NDV主要經(jīng)消化道、呼吸道和眼結膜等途徑感染禽類，因此在局部建立有效的黏膜免疫對于NDV的早期感染的控制意義重大?；钜呙缤ㄟ^點眼、滴鼻或飲水、噴霧等方式免疫后，誘導消化道和呼吸道產(chǎn)生黏膜免疫反應，誘導局部合成和分泌抗體并激發(fā)機體的細胞免疫途徑，還可引起全身性的體液免疫應答，但容易受母源抗體的干擾，且與免疫日齡存在相關性，較小日齡時不能誘導消化道黏膜產(chǎn)生抗體[13]。體液免疫與細胞免疫協(xié)同發(fā)揮作用，在新城疫的免疫和感染中的作用十分重要。雛雞初免后一段時間，再進行二次免疫，能出現(xiàn)強烈的免疫應答反應，抗體水平也顯著提升，二次免疫可選用毒力相對較強的疫苗毒株，免疫反應相應地會更強。

新城疫滅活疫苗主要激發(fā)體液免疫，接種后產(chǎn)生抗體比活疫苗慢，但抗體高峰持續(xù)的時間較活疫苗長。對于已免疫過活疫苗的雞群，再接種滅活疫苗，可顯著的提高抗體水平。故初免雞活疫苗配合滅活疫苗同時接種，可產(chǎn)生較高水平的抗體維持時間長，且可有效彌補滅活疫苗免疫空白期長的缺陷，在臨床上達到較好的保護效果。

1.2.2新城疫免疫效果的監(jiān)測 免疫后及時準確的效力評估對于保障雞群健康至關重要。新城疫活苗免疫雞后2周，滅活苗免疫后3周，抗體可達峰值。活苗免疫雞后HI抗體滴度可達7 log2～8 log2，一般低于10 log2，滅活苗可高達12 log2，且抗體水平均應符合正態(tài)分布。因此雞免疫后2周～3周進行免疫監(jiān)測，若達不到要求，1周后重測1次，若仍不合格，則提示免疫失敗，需要及時補免[14]。

2常見使用誤區(qū)

2.1制定的新城疫防控體系不健全

2.1.1使用方案存在問題很多養(yǎng)殖場存在重滅活疫苗防疫而輕視活疫苗防疫或重活疫苗防疫而輕視滅活疫苗防疫的現(xiàn)象。有些養(yǎng)殖場只使用單一種類疫苗，例如活疫苗或滅活疫苗來防疫，從而使雞群的防疫體系不健全，雞群獲得的免疫力較差，感染NDV的風險大。

新城疫活疫苗因黏膜免疫和體液免疫在抗NDV感染過程中起到重要作用；新城疫滅活疫苗特別是基因Ⅶ型滅活疫苗，刺激雞群產(chǎn)生的高水平抗體可有效控制NDV野毒特別是基因Ⅶ型強毒感染后雞群的排毒率，對于雞群新城疫凈化意義重大，而傳統(tǒng)疫苗在這方面展現(xiàn)的效果較差。

2.1.2使用種群的差異化水禽(鴨和鵝等)是NDV野毒的天然儲存庫，在新城疫病毒的傳播和流行中起到重要作用，尤其是鴨。近年來造成水禽感染和發(fā)病的病例越來越多，且可造成雞、鴨、鵝等禽群之間的交叉混合感染，引起巨大經(jīng)濟損失[14-15]。但在臨床生產(chǎn)中，很多水禽養(yǎng)殖業(yè)主往往不重視新城疫的防疫，不給水禽免疫新城疫疫苗，現(xiàn)有的多種品種禽類的混合飼養(yǎng)的現(xiàn)狀及總體養(yǎng)殖環(huán)境較差的情況下會帶來不同種群間NDV的交叉感染，導致NDV進化速度加快等諸多問題。

2.2對新城疫疫苗的相關特性不甚了解

2.2.1疫苗選擇及免疫方法不當新城疫活疫苗可采取滴鼻、點眼等多種途徑免疫，滅活苗可采取皮下或肌肉注射等方式進行免疫，適合免疫的日齡及劑量因禽的品種和日齡而異，但一些養(yǎng)殖戶在使用過程中，采用不恰當?shù)姆绞?。如新城疫活疫苗首免最好以點眼或滴鼻方式，但有些養(yǎng)殖戶圖省事，直接采用飲水免疫，造成免疫效果不整齊；Ⅰ系疫苗的毒力較強，不適合無基礎免疫的雞群使用。但有些養(yǎng)殖戶盲目使用Ⅰ系疫苗進行基礎免疫，造成雞群帶毒率太高，甚至造成幼禽免疫抑制或免疫損傷。

2.2.2疫苗使用劑量不當 疫苗的用量不能隨便減少或超量。劑量太低，不足以刺激機體產(chǎn)生足夠的保護力；劑量過大，機體可能產(chǎn)生免疫麻痹或較大的副反應，盲目加大劑量是沒有必要的，并有因此而造成發(fā)病的報道[16]。筆者在走訪中發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖場隨意加大或減少疫苗使用劑量的現(xiàn)象較為普遍。個別養(yǎng)殖場新城疫 Ⅳ系疫苗飲水的使用量竟高達10倍量，Ⅰ系疫苗肌肉注射量高至6倍量，給家禽養(yǎng)殖的生物安全和養(yǎng)殖環(huán)境造成很大安全隱患。

2.2.3不同活疫苗混亂使用

2.2.3.1 新城疫活疫苗與其他活疫苗的干擾作用雛雞前期的免疫強度較大，需要免疫的疫苗的種類及次數(shù)均較多，故臨床上不可避免的出現(xiàn)免疫擁擠現(xiàn)象。防控不同疫病的活疫苗若間隔期太短，則相互之間產(chǎn)生干擾的可能性較大，故臨床使用中應盡量避免同時或時間間隔較短使用，以盡可能避免相互干擾。NDV疫苗與其他種類疫苗，特別是雞痘活疫苗、雞傳染性法氏囊病活疫苗、雞傳染性喉氣管炎活疫苗等干擾作用較強的疫苗免疫時，免疫間隔期要足夠長(7 d以上)，以保證相互之前免疫干擾最小。生產(chǎn)中，一些養(yǎng)殖業(yè)主為了降低勞動強度，節(jié)省免疫成本，將干擾性較強的活疫苗同時使用或間隔期太短等情況較為多見，從而造成免疫效果下降甚至免疫失敗。

2.2.3.2不同新城疫活疫苗的混亂使用新城疫活疫苗的種類較多，不同疫苗所適用的對象和范圍也有區(qū)別。頻繁且超量使用多種新城疫活疫苗，新城疫毒株和野毒株同源重組的幾率則會加大，毒力返強成為強毒株而流行的可能性也相應加大[17]。筆者在臨床中發(fā)現(xiàn)，許多養(yǎng)殖業(yè)主不注重免疫間隔期，不同新城疫活疫苗的亂用現(xiàn)象較為多見。

2.2.4與藥物的搭配不合理臨床中保健藥物的使用極其常見與頻繁，有些藥物對新城疫疫苗，特別是活疫苗影響較大，故使用中應特別注意。

中藥類：近來來中草藥因其毒副作用小、使用效果好等原因得到一些養(yǎng)殖業(yè)主的青睞。一些中藥多糖能顯著增強雛雞的體液免疫，提高新城疫抗體效價，此外還可促進T淋巴細胞增殖，增強抗NDV感染的能力。中藥多糖的促生長和免疫調節(jié)作用呈現(xiàn)一定的量效關系，其發(fā)揮最佳的效果不是劑量越高則越好，而是在一個合適的劑量范圍內(nèi)[18]；此外，一些中草藥或其提取物可用于抵抗或治療NDV感染[19]。因此需對中藥的特性有充分的了解和認識，特別是和新城疫活疫苗聯(lián)合使用時。一些養(yǎng)殖場有使用中藥做藥物保健的習慣，但亂用現(xiàn)象較為常見，不清楚其對新城疫活疫苗或新城疫免疫的影響，并因此而使得免疫效果下降，造成不必要的損失。

抗生素類：研究表明，青霉素、鏈霉素和頭孢噻呋等常用抗生素與新城疫疫苗聯(lián)合使用不會降低免疫效果，但是不宜在免疫時將抗菌藥物直接加入疫苗內(nèi)，以防可能改變疫苗稀釋的滲透壓或pH，使得疫苗病毒滅活加速，從而降低疫苗效價，或是采用較高劑量，產(chǎn)生免疫抑制作用。給雞群大劑量使用一些抗菌藥物會影響免疫效果，如磺胺嘧啶等能夠顯著降低免疫效果，3倍～5倍治療量可降低新城疫抗體效價及疫苗免疫效果，并不可逆損傷雞中樞免疫器官，且隨劑量增大損傷加重；硫酸安普霉素、氟苯尼考等獸醫(yī)臨床常用藥物也會出現(xiàn)類似的情況[20]。生產(chǎn)中，長期且大劑量的使用抗生素的情況較為多見，造成了機體免疫系統(tǒng)的損傷的同時，也給新城疫疫苗的免疫效果造成很大影響。

抗病毒類：干擾素(IFN)因其具有廣譜、高效的抗病毒功能，且對機體免疫系統(tǒng)起關鍵調節(jié)作用而在獸醫(yī)臨床上應用越來越廣泛。連續(xù)使用一定劑量即可顯著改善新城疫病毒造成的病理損傷，還可對機體起到免疫調節(jié)作用。臨床中盲目使用干擾素的現(xiàn)象也較多，給新城疫活疫苗的免疫也帶來一定的負面影響。

2.3免疫程序不合理

2.3.1首免日齡不恰當種禽場所用新城疫疫苗的種類及免疫程序的差異，造成其子代禽母源抗體水平差異較大，給新城疫疫苗特別是活疫苗的首免日齡確定帶來了一些問題。首免日齡的確定應依據(jù)幼禽群的母源抗體的情況，一般認為4 log2的HI抗體是免疫的臨界值[10]。但好多養(yǎng)禽場往往采取“一刀切”的免疫程序，不論幼禽的母源抗體水平，而將首免日齡固定在某一日齡，這是不恰當?shù)?，會造成NDV的早期感染或新城疫疫苗的免疫效果下降甚至免疫失敗。

2.3.2免疫程序一成不變免疫程序的制定要綜合考慮疫苗的特點、禽的種類甚至不同地區(qū)、季節(jié)等因素而制定，故沒有標準的范本，須據(jù)實際情況做合適的調整與優(yōu)化。有些養(yǎng)殖場在制定防疫程序時，主觀性太強或盲目相信某些廠家提供的所謂“標準”免疫程序，未按照疫苗特點及產(chǎn)生保護的規(guī)律來合理使用疫苗，從而造成新城疫免疫效果的差異。

2.4未及時評價免疫效果

在條件允許的情況下，需對新城疫疫苗的免疫效果進行監(jiān)測與評估，并根據(jù)雞群免疫抗體水平的高低，決定何時需要加免或者對免疫程序進行相應調整。不同雞群新城疫抗體水平偏低且離散度較大是當前我國很多雞場和雞群的現(xiàn)狀，新城疫感染及帶毒狀況相當嚴重，高比例帶毒雞群的存在是我國控制新城疫的最大難題。但許多養(yǎng)殖業(yè)主“重防疫輕監(jiān)測”的觀點仍然很嚴重，以為進行了疫苗免疫，就可以產(chǎn)生保護作用，殊不知很多因素在制約疫苗刺激機體產(chǎn)生保護力從而影響免疫效果。

類似的使用誤區(qū)還有很多，不一而足。大家在使用新城疫疫苗的過程中會遇到各種各樣的問題，但結合實際情況把握好新城疫疫苗使用的幾個基本原則，就可以制定出適合本場區(qū)的免疫方案與程序。在抓好飼養(yǎng)管理以及注重養(yǎng)殖環(huán)境生物安全控制的同時，科學合理的使用疫苗，就能對新城疫做到有效的防控。

3討論

3.1新城疫活疫苗噴霧免疫的實施

活疫苗多采用滴鼻、點眼、飲水、噴霧等方式。滴鼻或點眼常用于雛雞的首免，是新城疫基礎免疫的最佳途徑，特別是點眼免疫，因其刺激哈德氏腺，產(chǎn)生的保護更佳，Ⅱ系、Ⅲ系和Ⅳ系苗多采用此類方法。噴霧免疫常用于60日齡及以上的雞群，工作效率高、免疫效果好，但需結合雞群的情況，大群有呼吸道或其他疾病發(fā)生時等情況應謹慎使用[10]。

3.2基因Ⅶd亞型NDV的流行與防控

基因Ⅶd亞型NDV在我國已流行逾20年，且所占的流行比率不斷升高，已占到了NDV流行株的絕大部分的比例，成為國內(nèi)絕對優(yōu)勢流行株，因其與我國使用最廣泛的基因Ⅱ型疫苗毒(La Sota株)之間存在明顯的抗原差異和遺傳差異，雖然在高滴度抗體情況下異型疫苗和同型疫無苗免疫雞死亡保護沒有顯著差異，但是攻毒后雞體內(nèi)的病毒載量和病毒復制差異極顯著，臨床表現(xiàn)也出現(xiàn)差異，這是國內(nèi)免疫雞群發(fā)生非典型新城疫的最重要原因。較傳統(tǒng)的疫苗毒株，Ⅶ型疫苗具有毒力低，毒價高，免疫原性優(yōu)良，有效抑制排毒，對高峰產(chǎn)蛋雞影響小，能有效控制免疫雞群中非典型新城疫等特點[21]。

3.3新型疫苗的研制

近年來隨著分子生物學技術的快速發(fā)展，相關學者研制一些新型新城疫疫苗。例如以馬立克病病毒(MDV)、雞痘病毒等為載體，表達NDV的F基因或HN基因的重組病毒，或加入白介素-2(IL-2 )基因來輔助增強新城疫弱毒疫苗的免疫原性的重組病毒，或表達NDV F基因的DNA疫苗，或以減毒鼠傷寒沙門菌為載體的重組NDV HN基因的疫苗等，有的可通過口服、刺種等方式對雞群進行免疫，免疫效果較傳統(tǒng)疫苗有明顯優(yōu)勢，且制備簡便，成本降低，可與常規(guī)疫苗聯(lián)合使用來提高免疫效果，成為新城疫疫苗研究的新方向[22-23]。

3.4加強生物安全

就群體免疫而言，即使頻繁接種各種新城疫疫苗，由于個體免疫的差異，也不可能產(chǎn)生100%的保護。正因為如此，建立健全的生物安全體系對于綜合防控新城疫至關重要[21]。全面認識新城疫的發(fā)病原因及其流行現(xiàn)狀，改變目前粗放的養(yǎng)殖模式，盡量實行全進全出的養(yǎng)殖模式，避免不同禽群的混合飼養(yǎng)，提高生物安全管理水平和質量，制定適合本場、本區(qū)域免疫程序，通過中長期的免疫和凈化方案來達到局部乃至全國范圍內(nèi)對本病的凈化。

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Appropriate Vaccination of Newcastle Disease and Common Mistakes in Vaccine Use

CHENG Xiao-guo1，WANG Hui1，CHENG Ning2，CHEN Shen-miao1，ZHU Jie1，ZHANG Xiao-rong3，WU Yan-tao3

(1.WohuaBiotechCo.,Ltd，Binzhou，Shandong，256606，China；2.ShandongVocationalCollegeofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，Weifang，Shandong，261061，China；3.CollegeofVerterinaryMedicineYangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu，225009，China)

Abstract:Newcastle disease(ND) caused by Newcastle disease virus(NDV) is one of the most devastating contagious disease in poultry especially terrestrial birds.Currently,vaccination is the major method for controlling this disease in China.The results of many experimental researches and clinical applications showed that the match of vaccine genotype with the pandemic strains and the use of live vaccine combination with inactivated vaccine could play a dual role in controlling ND because of humoral immunity and cellular immunity, in which the role of mucosal immunity is also very important in preventing ND.The authors found lots of poultry households take some misunderstandings in using schemes, methods as well as immunization programs in ND vaccination in the long-term breeding technology service, which seriously hamper the vaccine work, and lead to some clinical onset of ND.

Key words:Newcastle disease；immunity；vaccine application；common mistakes

收稿日期：2015-12-01

作者簡介：程小果(1985-)，男，山東泰安人，碩士，主要從事畜禽疫病防控研究。

中圖分類號:S852.4

文獻標識碼:A

文章編號:1007-5038(2016)06-0116-05