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    中藥有效成分抗雞球蟲病研究進展

    2016-03-10 20:18:00付文濤周變?nèi)A黃婷婷田二杰曹建文閆文朝
    動物醫(yī)學(xué)進展 2016年6期
    關(guān)鍵詞:球蟲病防治中藥

    付文濤,周變?nèi)A,黃婷婷,田二杰,曹建文,閆文朝

    (河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院,河南洛陽 471003)

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    中藥有效成分抗雞球蟲病研究進展

    付文濤,周變?nèi)A*,黃婷婷,田二杰,曹建文,閆文朝

    (河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院,河南洛陽 471003)

    摘要:雞球蟲病是家禽常見的腸道寄生原蟲病,在全國乃至世界范圍內(nèi)以其高發(fā)病率和病死率給養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展帶來了巨大的經(jīng)濟損失,目前主要依賴于化學(xué)藥物預(yù)防。然而,隨著耐藥性的產(chǎn)生及對無公害動物食品的需求,尋找新穎、經(jīng)濟環(huán)保的治療措施備受關(guān)注。研究表明,中藥提取物具有良好的抗球蟲功效,為抗球蟲新藥的研發(fā)開辟了新的領(lǐng)域。論文就常山、青蒿素、姜黃素、甘蔗和蘆薈五種單味中藥及成分防治雞球蟲病的研究做一綜述,為開發(fā)新型中藥制劑來防治雞球蟲病提供新參考。

    關(guān)鍵詞:雞;球蟲??;中藥;成分;防治

    雞球蟲病是由7種艾美耳屬球蟲寄生于腸道特定部位的上皮細胞而引起的一種專性細胞內(nèi)寄生蟲病。目前雞球蟲病在全世界分布十分廣泛、危害極其嚴重,全世界每年因預(yù)防和治療球蟲病造成的費用高達30多億美元,給集約化養(yǎng)禽業(yè)健康穩(wěn)定的發(fā)展造成了威脅[1]。目前該病主要依靠化學(xué)藥物的治療和疫苗預(yù)防,取得了較好的效果,但伴隨藥物的長期使用,球蟲耐藥性問題及藥物殘留問題越來越受到人們的關(guān)注,加之疫苗的使用過程中也暴露出很多現(xiàn)實問題,如活疫苗有不易保存、使用不當會引起球蟲病暴發(fā)等缺點[2]。另外,DNA疫苗的研究和推廣尚存在一定的難度,在短期內(nèi)還很難應(yīng)用于臨床實踐[3]。因此,考慮到動物性食品和人類健康問題的重要性,致力于尋找新穎、經(jīng)濟環(huán)保的中藥來防治雞球蟲病備受關(guān)注。研究證明許多中藥提取物對控制球蟲病非常有效。為此,本文就幾種單味中藥及成分防治雞球蟲病研究進展做一綜述。

    1常山抗球蟲的效果

    常山為虎耳草科常山屬(Dichroa)植物黃常山(DichroafebrifugaLour.)的根。早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載:常山具有抗瘧疾、抗癌、催吐、解熱、殺蟲等功效[4-5]?,F(xiàn)已證實,常山具有較好的抗球蟲功效,研究認為常山中富含的喹唑酮類生物堿是抗球蟲的主要活性成分[6]。Zhang D F等[7]分別用20 mg/kg和40 mg/kg的常山提取物進行抗球蟲試驗,發(fā)現(xiàn)20 mg/kg的常山提取物能夠顯著的增加雞體重,減少血便,降低病變記分和卵囊的排泄,抗球蟲指數(shù)在125左右。一項利用常山水提液抗柔嫩艾美耳球蟲感染肉雞的療效試驗發(fā)現(xiàn),常山的水提取液能夠有效控制球蟲引起的血便,提高抗球蟲指數(shù),減輕腸道損傷,顯著降低感染球蟲雞血清中因產(chǎn)生大量一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)而導(dǎo)致增加的氧自由基含量,說明常山提取物能夠提高抗氧化酶的活性,減輕因自由基過多而產(chǎn)生的氧化反應(yīng),避免腸道炎癥的發(fā)生,從而發(fā)揮抗球蟲的作用[8]。還有研究證實,在飼料中添加不同濃度的常山提取物,能夠有效減輕腸道病變程度,抗球蟲指數(shù)169~172,均達到中等抗球蟲水平[6]。張德福等[9]通過對氫溴酸常山酮抗柔嫩艾美耳球蟲作用研究發(fā)現(xiàn),氫溴酸常山酮在球蟲生活史的早期階段能夠發(fā)揮顯著的作用,在處于生活史末期階段時則完全沒有作用。在體內(nèi),氫溴酸常山酮能夠作用于第一代裂殖體向裂殖子分裂階段,并使裂殖子表現(xiàn)出空泡化和降解現(xiàn)象,從而抑制了裂殖體和裂殖子的發(fā)育,為刺激機體免疫系統(tǒng)進而消除蟲體獲得了充足的時間。在體外,經(jīng)過一系列試驗首次推測出氫溴酸常山酮的作用靶點可能是通過作用糖酵解途徑,進而抑制能量代謝,并結(jié)合其能夠破壞卵囊壁結(jié)構(gòu),使藥物進入卵囊內(nèi)部,破壞細胞超微結(jié)構(gòu),使其失去活力達到抗球蟲效果。

    2青蒿素抗球蟲的效果

    青蒿素(artemisinin)是從中藥青蒿即菊科植物黃花蒿(ArtemisiaannuaL)的葉和花蕾中分離獲得的有過氧基團的新型倍半萜內(nèi)酯物質(zhì)[10],早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有記載黃花蒿(青蒿)有殺蟲作用。近幾年研究證實青蒿素具有抗雞柔嫩艾美耳球蟲的功效,其抗球蟲效果與添加劑量呈正相關(guān)[11]。研究發(fā)現(xiàn)青蒿素能夠有效改善球蟲病雞的臨床癥狀,對雞群的存活率、增重率均有所提高,抗球蟲指數(shù)達到145.4,且青蒿素能夠抑制球蟲病雞血清中NO和NOS含量的升高,降低氧自由基含量,從而避免了氧自由基過多導(dǎo)致的氧化反應(yīng),減輕了球蟲對腸上皮細胞損傷引起的炎癥反應(yīng),有效恢復(fù)機體正常生理功能[12]。Del Cacho E等[13]研究發(fā)現(xiàn),通過人工復(fù)制雞球蟲感染模型,用體內(nèi)外相結(jié)合的方法研究了青蒿素的抗球蟲功效。結(jié)果顯示,與感染對照組相比,青蒿素可有效降低球蟲卵囊孢子形成率和卵囊排出量,雞腸道病變記分值也顯著降低。在電鏡下可觀察到,青蒿素能夠使球蟲卵囊壁的兩端發(fā)生殘缺,從而破壞卵囊壁的形成,這可直接導(dǎo)致卵囊形成率降低甚至死亡。進一步通過免疫熒光研究發(fā)現(xiàn),青蒿素能夠抑制球蟲大配子中肌漿內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣三磷酸腺苷酶的表達,所有這些充分證明青蒿素可通過破壞球蟲早期卵囊壁形成而達到抗球蟲效果。莫平華等[14]在青蒿素對雞柔嫩艾美耳球蟲第二代裂殖子微線基因mRNA轉(zhuǎn)錄及雞盲腸組織結(jié)構(gòu)的影響的研究中發(fā)現(xiàn),青蒿素可顯著降低球蟲第二代裂殖子數(shù)量,進而明顯的改善盲腸的病變。同時對參與球蟲入侵宿主細胞黏附關(guān)鍵分子表達進行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)微線蛋白的轉(zhuǎn)錄顯著下調(diào),尤其是微線蛋白3和微線蛋白5的下調(diào)極其顯著(P<0.01),提示青蒿素可能通過以上作用,阻止了球蟲對宿主細胞的黏附,降低球蟲對宿主細胞的損害。

    3姜黃素抗球蟲的效果

    姜黃素(curcumin)是從姜科姜黃屬(CurcumaL)植物的根莖中分離出來的一種相對分子質(zhì)量低的多酚類天然色素[15]。由于其廣泛的藥理學(xué)活性且副作用小,安全性高,近年來國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界對姜黃素開展了廣泛的研究,發(fā)現(xiàn)姜黃素具有抗炎、抗氧化、抗纖維化、抗微生物、抑制腫瘤生長等多方面的藥理作用[16]。同時,大量的研究顯示,姜黃素已經(jīng)被開發(fā)作為飼料或者飲水添加劑來防治家禽的球蟲病。Khalafalla R E等[17]研究發(fā)現(xiàn)濃度在100 μmol/L~400 μmol/L之間的姜黃素能夠顯著的影響子孢子的形態(tài)和生存能力,并使其發(fā)生膨脹或皺縮。100 μmol/L 和200 μmol/L的姜黃素抑制球蟲入侵宿主細胞的百分比分別為41.6%和73%(P<0.05),顯著降低了球蟲對宿主細胞的入侵率。Kim D K等[18]報道雞的日糧中添加姜黃提取物能夠有效增加雞的體重,減少卵囊的排出量,降低腸道病變記分。對其機制進行深入研究發(fā)現(xiàn),姜黃提取物可以顯著提高雞血清中微線蛋白2抗體水平,能夠促進刀豆球蛋白A誘導(dǎo)脾淋巴細胞的增殖,來增強機體的體液和細胞免疫。同時,姜黃提取物能夠誘導(dǎo)抗炎作用基因的轉(zhuǎn)錄來減輕球蟲感染導(dǎo)致的炎癥。Burt S A等[19]將姜黃素與子孢子共同孵育2 h后,感染牛腎細胞,發(fā)現(xiàn)與對照組相比,子孢子入侵率顯著減低了78%。劉麗丹等[20]研究發(fā)現(xiàn)球蟲免疫前日糧中添加姜黃素,在疫苗反應(yīng)期時,姜黃素能夠有效的減輕卵囊活疫苗對腸道組織損傷,減弱壞死性腸炎炎癥反應(yīng)。免疫后21 d使用強毒株攻蟲試驗發(fā)現(xiàn),姜黃素組和未加姜黃素組的雞都能夠耐受球蟲毒株的入侵,但姜黃素組雞的病變記分和糞便計分更低,增重率也好于未加姜黃素組,但是差異不明顯。試驗充分證明了姜黃素是效果較好的腸道修復(fù)劑,可以作為球蟲疫苗增強劑來提高免疫效果。綜上所述,姜黃素能夠改變球蟲子孢子的形態(tài),抑制子孢子的入侵,并對腸道損傷有較好的修復(fù)作用,同時還可以增強畜禽機體的免疫力,是防治球蟲病較好的藥物選擇。

    4甘蔗提取物抗球蟲的效果

    甘蔗(sugar cane)為多年生高大實心禾本科植物,系熱帶、亞熱帶經(jīng)濟作物,在中國華南及臺灣等地區(qū)廣泛種植。研究表明其莖、葉、汁、渣等提取物有抗氧化、抗腫瘤、促生長、免疫刺激等生物學(xué)和免疫學(xué)活性[21]。近年來,甘蔗提取物對雞球蟲病的防治也受到人們的重視。有學(xué)者研究甘蔗提取物(sugar cane extract,SCE)對雞球蟲病的效果時發(fā)現(xiàn),SCE(每天500 mg/kg)能夠有效改善雞球蟲病引起的增重率下降、血便、卵囊排出量、病變記分等臨床癥狀。通過盲腸病理學(xué)發(fā)現(xiàn),口服SCE后,雞盲腸組織中裂殖體、配子體和卵囊的數(shù)量均較少,同時檢測到SCE能夠提高球蟲病雞盲腸扁桃體淋巴細胞中Bu-1a+和CD4+相對比例,說明SCE對機體產(chǎn)生較好的保護作用,且能夠刺激機體建立免疫應(yīng)答反應(yīng)[22]。Awais M M等[23]分別用甘蔗的水提取液和乙醇提取液研究其對感染球蟲的免疫保護作用,結(jié)果顯示,甘蔗的乙醇提取液和水提取液可以顯著減少卵囊的排泄量、提高日增重量、降低死亡率,改善臨床癥狀,乙醇提取組和水提取組的抗球蟲指數(shù)分別達到227.61和192.32,且兩種方法提取液都能夠使各種免疫器官與體重比提高,ELISA試驗結(jié)果也顯示兩組球蟲病雞有較好的免疫應(yīng)答,可見甘蔗提取液有利于增強機體的免疫機能,都能夠通過增強機體免疫力來達到抗球蟲效果。Khan U J等[24]對甘蔗提取物抗球蟲效果試驗發(fā)現(xiàn),與感染對照組相比,1 d口服藥物組(500 mg/kg)和連續(xù)3 d口服藥物組雞糞便中卵囊減少率分別為83.54%和98.73%,兩組雞增重率分別為65.84%和61.90%,說明連續(xù)3 d口服甘蔗提取物更能夠有效的減少卵囊的排出量,有效改善了雞體重的增長。

    5蘆薈防治球蟲效果

    蘆薈(Aloe)是百合科(Liliaceae)植物的一種,為灌木狀多肉質(zhì)草本,原產(chǎn)于非洲。蘆薈被認為是最古老的草藥之一,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)可以追溯到幾千年的歷史。包括變種和品種在內(nèi)全世界約有500種[25]。蘆薈中含有豐富的生物活性物質(zhì),研究證明蘆薈具有抗細菌、抗病毒、抗真菌、抗腫瘤、抗炎、抗衰老、抗糖尿病、免疫調(diào)節(jié)、創(chuàng)傷愈合等大量特殊功效。近年來,研究發(fā)現(xiàn)蘆薈對雞球蟲病的防治有一定的療效。Yim D等[26]評估了在日糧中添加不同濃度的蘆薈對口服感染巨型艾美耳球蟲雞的保護作用,結(jié)果證實,在雞日量中添加濃度為0.1%、0.3%和0.5%的蘆薈,均可顯著減少雞糞便中卵囊的排出量,且0.5%蘆薈提取物組的雞顯示的病變記分最低。而Darabighane B等[27]研究認為,2.5%蘆薈膠的抗球蟲效果最好,雞糞便中卵囊的排泄量最少。這可能與試驗時球蟲的接種計量和卵囊的毒力有關(guān)。此外,蘆薈提取物的純度及其產(chǎn)地對其抗球蟲效果也有一定的影響。Akhtar M等[28]發(fā)現(xiàn),連續(xù)3 d口服蘆薈乙醇和水提取物,均可顯著降低每克糞便卵囊數(shù),表明蘆薈能夠有效減少卵囊的排出。其結(jié)果還證實,蘆薈提取物具有緩解腸組織損傷,提高雞增重率和體內(nèi)抗體水平的作用。

    6結(jié)語

    綜上所述,常山、青蒿素、姜黃素、蘆薈、蔗糖提取物等對雞球蟲病的防治具有較好效果,目前對其研究還多停留在臨床應(yīng)用上。因此,進一步深入探討和研究中藥及其成分防治雞球蟲病的作用效果,發(fā)現(xiàn)和闡明其防治球蟲病的作用機制,為中藥復(fù)方的組成和臨床應(yīng)用提供新思路。

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    Progress on Several Kinds of Traditional Chinese Medicines in Control of Chicken Coccidiosis

    FU Wen-tao, ZHOU Bian-hua, HUANG Ting-ting, TIAN Er-jie, CAO Jian-wen, YAN Wen-chao

    (CollegeofAnimalScienceandTechnology,HenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang,Henan,471003,China)

    Abstract:Coccidiosis is a major protozoan parasitic disease of poultry. It has high morbidity and mortality, resulting in great economic losses to the poultry industry. Currently,coccidiosis is mainly controlled by using chemotherapeutic agents. However, drug resistance in the field and needs for the pollution-free food encourage the development of alternative methods to control this desease. Extracts of traditional Chinese herbs were reported to have good activity in the control of coccidiosis. In this paper, anticoccidial activities ofDichroafebrifuga, artemisinin, curcumin, sugar cane andAloeveraanticoccidials or compositions were reviewed, and this will help to develop new traditional Chinese medicine preparations in prevention of chicken coccidiosis.

    Key words:chicken;coccidiosis; traditional Chinese medicine;composition;prevention and treatment

    收稿日期:2015-11-23

    基金項目:國家自然科學(xué)基金項目(31472238);河南科技大學(xué)青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人項目(20140706)

    作者簡介:付文濤(1989-),男,河南新密人,碩士研究生,主要從事獸醫(yī)藥理學(xué)研究。 *通訊作者

    中圖分類號:S858.31;S852.723

    文獻標識碼:A

    文章編號:1007-5038(2016)06-0098-04

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