陰道微生物群落結(jié)構(gòu)與復發(fā)型外陰陰道念珠菌病的相關(guān)性研究

羅南玲

[廣東省深圳市南山區(qū)人民醫(yī)院（深圳市第六人民醫(yī)院） 高新社康中心，廣東 深圳 518000]

外陰陰道念珠菌在女性人群中十分常見，約50%的患者接受治療后仍會復發(fā)，其中10%左右的患者在1年內(nèi)復發(fā)次數(shù)≥4次的稱之為復發(fā)性外陰陰道念珠菌病[1]。復發(fā)性外陰陰道念珠菌病根治的幾率十分小，影響女性患者的生活質(zhì)量。隨著對陰道微生態(tài)的研究不斷加強，發(fā)現(xiàn)陰道菌群在生殖道疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著顯著的作用[2]。目前，臨床上對外陰陰道念珠菌病與陰道微生物群落結(jié)構(gòu)之間的相關(guān)性仍然缺乏深入的了解，本研究主要分析了陰道微生物群落結(jié)構(gòu)與外陰陰道念珠菌病的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

觀察組：在本院接受治療的外陰陰道念珠菌病女性患者，共110例。納入標準：①有外陰瘙癢、尿痛、灼痛感、白帶黏稠的癥狀；②白帶涂片發(fā)現(xiàn)存在酵母菌或假菌絲；③發(fā)病次數(shù)1年內(nèi)≥4次；④有接受抗真菌治療，診斷檢查仍然是陽性；⑤治療前15天沒有接受抗真菌治療。排除標準：①有嚴重免疫系統(tǒng)疾病、糖尿病患者；②聯(lián)合應(yīng)用抗生素和糖皮質(zhì)激素者；③無定期診治者。對照組：110例正常健康體檢女性。兩組研究對象均知情同意、自愿參加。對照組平均年齡（35.1±5.2） 歲，平均產(chǎn)次（2.3±0.7）次，孕次（2.9±0.6）次，體重（57.9±10.6）kg，體質(zhì)量指數(shù)（Body Mass Index, BMI）（23.7±2.8）kg/m2；觀察組平均年齡（34.7±5.6） 歲，平均產(chǎn)次（2.4±0.8） 次，孕次（3.0±0.7）次，體重（57.1±10.3）kg，BMI（23.6±2.6） kg/m2；兩組在年齡、產(chǎn)次、孕次、體重及BMI等一般資料上比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

檢測兩組女性的陰道pH值，把精密pH試紙置于陰道分泌物中，根據(jù)試紙說明讀取pH值。在陰道側(cè)壁上方1/3區(qū)域，使用無菌棉拭子采集女性的陰道分泌物，并將陰道分泌物放在載玻片上，然后制成涂片并染色，充分干燥后應(yīng)用10×100 倍油鏡進行檢查，進而區(qū)分乳酸桿菌、陰道加特納菌、動彎桿菌、擬桿菌及革蘭菌等。從油鏡中觀察到的細菌數(shù)量進行打分，0分表示無細菌，1分：細菌數(shù)量＜1×1 000，2分：細菌數(shù)量介于（1～ 4） ×1 000，3分：細菌數(shù)量介于（5～30） ×1 000，4分：細菌數(shù)量＞30×1 000。使用Nugent革蘭染色評分系統(tǒng)計算Nugent革蘭染色評分。比較兩組的菌群多樣性和陰道菌群優(yōu)勢菌，主要應(yīng)用10×100倍油鏡，其中依據(jù)可辨認的細菌種類來劃分菌群的多樣性，觀察細菌的種類，判斷優(yōu)勢菌。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 14.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，配對t檢驗；計數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 陰道pH值和Nugent革蘭染色評分

觀察組的陰道pH值和Nugent革蘭染色評分高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 陰道pH值和Nugent革蘭染色評分比較 （±s）

表1 陰道pH值和Nugent革蘭染色評分比較 （±s）

注：?與對照組相比，P ＜0.05。

組別 例數(shù) 陰道pH值 Nugent革蘭染色評分/分觀察組 110 4.52±0.33? 4.20±0.80?對照組 110 4.08±0.30 1.35±1.18

2.2 菌群多樣性

觀察組菌群多樣性主要集中在Ⅰ-Ⅱ級，Ⅲ和Ⅳ級比較少見，對照組菌群多樣性主要集中在Ⅰ級，Ⅱ級比較少見，觀察組的菌群多樣性Ⅰ級低于對照組、Ⅱ級高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表 2。

表2 兩組菌群多樣性比較 例（%）

2.3 陰道菌群優(yōu)勢菌

觀察組和對照組在陰道菌群優(yōu)勢菌比例方面比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組陰道菌群優(yōu)勢菌比較 例（%）

3 討論

陰道中占優(yōu)勢的乳酸桿菌具有生物屏障的保護功效，主要通過免疫調(diào)節(jié)、生物拮抗以及化學反應(yīng)等機制發(fā)揮作用[3]。乳酸桿菌通過糖酵解功能會引起乳酸的大量積聚，使得陰道處于酸性的微環(huán)境中，從而有效抑制病原微生物[4]。另外，乳酸分子自身也是一種抗微生物成分，具有保護宿主的作用[5]。另外，最近研究顯示乳酸菌能夠促進外周IL-23的合成，激活Thl7淋巴細胞激活通路，進而有效抑制細菌的入侵[6]。本次研究結(jié)果顯示觀察組人群的乳酸桿菌的優(yōu)勢地位明顯喪失，觀察組的陰道pH值為（4.52±0.33），高于對照組的（4.08±0.30），說明拮抗作用和生物屏障受到抑制，是引起外陰陰道念珠菌病反復發(fā)作的重要原因。

現(xiàn)階段，臨床上對復發(fā)性外陰陰道念珠菌病的治療主要通過鞏固性抗真菌的方法，然而全身或局部用藥的治療效果都不是十分理想[7]，患者的復發(fā)率仍然十分高，所以尋找有效的治療方法是臨床關(guān)注的重點。目前，臨床上達成的共識是乳酸桿菌不可直接用于外陰陰道念珠菌病的治療，但在一定程度上可以恢復乳酸桿菌的優(yōu)勢地位，顯著降低外陰陰道念珠菌病的發(fā)病率。目前，臨床上應(yīng)用的乳酸桿菌制劑的種類較多，然而陰道專用的乳酸桿菌種類并不多，陰道專用的乳酸桿菌可在陰道中定居、繁殖，保證陰道菌群的平衡[8]。臨床上對于乳桿菌制劑治療復發(fā)性外陰陰道念珠菌病的療效有較大的爭議，需要更多的研究和實踐來證明。

綜上可知，外陰陰道念珠菌病患者的陰道微生物群落結(jié)構(gòu)較正常人群會發(fā)生明顯變化，主要體現(xiàn)在陰道pH值升高、菌群多樣性集中在Ⅰ-Ⅱ級、陰道菌群優(yōu)勢菌改變，造成陰道生物屏障嚴重被削 弱。

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