• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    小分子RNA-9對(duì)上皮細(xì)胞鈣黏蛋白表達(dá)調(diào)控的研究進(jìn)展

    2016-03-09 14:00:43肖建華董自強(qiáng)游艷
    海南醫(yī)學(xué) 2016年7期
    關(guān)鍵詞:黑素瘤調(diào)控分子

    肖建華,董自強(qiáng),游艷

    (1.三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院泌尿外科三峽大學(xué)泌尿外科研究所,湖北 宜昌 443003;2.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院,湖北 宜昌 443000)

    小分子RNA-9對(duì)上皮細(xì)胞鈣黏蛋白表達(dá)調(diào)控的研究進(jìn)展

    肖建華1,董自強(qiáng)1,游艷2

    (1.三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院泌尿外科三峽大學(xué)泌尿外科研究所,湖北 宜昌 443003;2.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院,湖北 宜昌 443000)

    上皮細(xì)胞鈣黏蛋白(E-cadherin)參與多種正常細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的功能活動(dòng),而其自身的表達(dá)水平又受小分子RNA(miRNA)等多種因素的調(diào)節(jié),使得miRNA-E-cadherin通路在多種疾病中的重要作用受到了廣泛關(guān)注。本文就目前發(fā)現(xiàn)的miRNA-9在不同腫瘤疾病或非腫瘤疾病發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中對(duì)E-cadherin表達(dá)的調(diào)控情況作一綜述。

    上皮細(xì)胞鈣黏蛋白;miRNA;腫瘤;調(diào)控

    小分子RNAs是一類長(zhǎng)度為20~28 nt的非編碼小分子RNA,通過(guò)與目標(biāo)信使RNA(mRNAs)特異結(jié)合,抑制翻譯過(guò)程和mRNA降解,從而在轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)性調(diào)控目標(biāo)基因表達(dá)[1-2],影響包括細(xì)胞分化、增殖、代謝及凋亡在內(nèi)的多種病理生理活動(dòng)[3],也參與多種腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及化療耐藥等過(guò)程的調(diào)控[4]。只是不同miRNA的作用靶點(diǎn)各異,參與的信號(hào)通路不一,從而引起下游相應(yīng)的效應(yīng)也各有不同。目前報(bào)道的人類miRNAs已經(jīng)超過(guò)了542種,每一個(gè)miRNA大概可以同近200個(gè)基因靶標(biāo)結(jié)合,控制著人類大概三分之一基因的表達(dá)[5],包括調(diào)控腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的上皮細(xì)胞鈣黏蛋白(E-cadherin),而該通路明顯影響著部分惡性腫瘤和其他疾病的發(fā)展及轉(zhuǎn)歸,現(xiàn)就miRNA-9與E-cadherin之間相互關(guān)系及其可能生物學(xué)功能及意義作一綜述,為后續(xù)研究及相關(guān)疾病新型診治措施的研究應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1 人類miRNA-9的基因定位、序列分析、靶標(biāo)預(yù)測(cè)及可能參與的生物學(xué)功能

    人類成熟的miRNA-9轉(zhuǎn)錄本由分別位于1號(hào)、5號(hào)和15號(hào)染色體上的3個(gè)獨(dú)立基因產(chǎn)生[6],其5′端第2位~第8位堿基和第14位~第18位堿基高度保守,而被稱作“種子序列”的第2-8位堿基主要通過(guò)與目標(biāo)mRNA3′UTR區(qū)域的互補(bǔ)配對(duì)識(shí)別靶基因來(lái)行使轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控元件的重要功能[7]。近期其在各大腫瘤組織中的異常表達(dá)引起了科學(xué)家們的注意,例如在腦腫瘤中表達(dá)水平顯著上調(diào),卵巢癌中異常下調(diào),具體作用機(jī)制還有待研究[8-9]。而根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)分析可知,miRNA-9的靶基因多數(shù)參與新陳代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、跨膜運(yùn)輸和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等生命活動(dòng)過(guò)程[7]。如在中后腦交界處鄰近區(qū)域表達(dá)的miRNA-9通過(guò)作用于成纖維生長(zhǎng)因子(Fibroblast growth factor,F(xiàn)gf)信號(hào)通路調(diào)控該處的組織活性,便說(shuō)明Fgf是miRNA-9的一個(gè)重要作用靶標(biāo);另外,近期研究表明部分G蛋白、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、鋅指蛋白、E-cadherin等都是miRNA-9的作用靶點(diǎn)[10]。其中,miRNA-9-E-cadherin通路被指出參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐藥形成等。

    2 E-cadherin的生物學(xué)特性

    人E-cadherin位于16q22.1,編碼產(chǎn)物是一個(gè)5次跨膜的單鏈糖蛋白,主要表達(dá)于上皮細(xì)胞。胞外區(qū)含有一個(gè)依賴Ca2+的功能區(qū)介導(dǎo)同種細(xì)胞之間的粘附。胞內(nèi)近膜部分連接P120連環(huán)蛋白,可以對(duì)自身的結(jié)構(gòu)或功能進(jìn)行調(diào)節(jié);遠(yuǎn)端可以和β連環(huán)蛋白、盤狀球蛋白及Armadillo重復(fù)蛋白相互作用,進(jìn)而結(jié)合α連環(huán)蛋白。而α連環(huán)蛋白的羧基端又直接和絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合。也就是說(shuō)α連環(huán)蛋白作為中間體將膜結(jié)合的鈣黏蛋白-連環(huán)蛋白復(fù)合物同肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架連接起來(lái)。因此,它在細(xì)胞的正常發(fā)育、細(xì)胞極性形成、正?;蚰[瘤細(xì)胞的形態(tài)特征維系以及腫瘤細(xì)胞發(fā)生由上皮到間質(zhì)轉(zhuǎn)變等方面均發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[11];其表達(dá)受很多遺傳控制或外遺傳控制、信號(hào)通路、鋅指蛋白家族及miRNAs等的調(diào)節(jié)[12],而miRNA-9就是其中重要的一員。但是,miRNA-9對(duì)E-cadherin表達(dá)水平的影響并不絕對(duì),因不同組織、不同疾病以及不同腫瘤而異。

    3 MiRNA-9對(duì)E-cadherin表達(dá)的影響

    3.1 MiRNA-9在腫瘤疾病中對(duì)E-cadherin表達(dá)的影響及該通路的可能生物活性 一方面,研究發(fā)現(xiàn)同原發(fā)黑素瘤相比,轉(zhuǎn)移性黑素瘤組織或細(xì)胞株中miRNA-9的表達(dá)水平顯著下調(diào),且其水平在體內(nèi)外均和黑素瘤細(xì)胞的增生和轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)[13]。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)MiRNA-9的過(guò)表達(dá)導(dǎo)致Snail 1的顯著低表達(dá),伴隨E-cadherin表達(dá)增加。因?yàn)镾nail 1在腫瘤進(jìn)展中也發(fā)揮著重要作用,是調(diào)節(jié)E-cadherin表達(dá)的一個(gè)重要轉(zhuǎn)錄因子,E-cadherin表達(dá)的潛在抑制因子[14],敲出miRNA-9則出現(xiàn)相反的變化。此外,考慮到Snail 1在轉(zhuǎn)錄水平受NF-κB1的調(diào)節(jié),是其下游靶標(biāo)及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)和腫瘤轉(zhuǎn)移的誘導(dǎo)因子[15];而作為腫瘤細(xì)胞高侵襲性穩(wěn)定信標(biāo)、參與細(xì)胞骨架重塑的NF-κ B1在卵巢癌中是miRNA-9的作用靶點(diǎn)[16],其3-′UTR包含一個(gè)假定的miRNA-9結(jié)合位點(diǎn)[17],兩者特異結(jié)合后相互調(diào)節(jié)各自的功能。如此以來(lái),筆者便將miRNA-9、NF-κB1、Snail1及E-cadherin四者聯(lián)系起來(lái),進(jìn)行深入的研究,最終揭示在轉(zhuǎn)移性黑素瘤中miRNA-9的表達(dá)下調(diào),對(duì)NF-κB1的抑制減弱,導(dǎo)致Snail的上調(diào),抑制E-cadherin的表達(dá),致使腫瘤細(xì)胞彼此的粘附能力下降,非運(yùn)動(dòng)性的細(xì)胞轉(zhuǎn)變成運(yùn)動(dòng)性細(xì)胞,運(yùn)動(dòng)能力和侵襲性增加,從而使腫瘤細(xì)胞容易侵襲其他組織細(xì)胞,介導(dǎo)黑素瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。因此,若人為上調(diào)黑素瘤細(xì)胞中miRNA-9的表達(dá),E-cadherin的表達(dá)水平就可能增加,從而阻斷或者削弱腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,限制黑素瘤的發(fā)展。另一方面,在高侵襲性肝癌和乳腺癌等腫瘤中細(xì)胞的侵襲性同miRNA-9的表達(dá)水平呈現(xiàn)出正相關(guān)性。在有肝內(nèi)轉(zhuǎn)移發(fā)生的高侵襲性肝癌細(xì)胞株SK-Hep-1中8種miRNA顯著上調(diào),miRNA-9居首位[18],推測(cè)miRNA-9可能參與SK-Hep-1細(xì)胞侵襲性獲得;向該細(xì)胞株轉(zhuǎn)入miRNA-9靶向抑制劑后,可以明顯降低細(xì)胞侵襲基質(zhì)層的能力,甚至降至對(duì)照組的46%;同樣,轉(zhuǎn)染miRNA-9抑制劑前后SK-Hep-1細(xì)胞中E-cadherin表達(dá)水平的顯著差異及蛋白活力的明顯改變表明miRNA-9抑制劑可以緩和miRNA-9引起的E-cadherin表達(dá)抑制。乳腺癌中有著類似的現(xiàn)象,檢測(cè)穩(wěn)定表達(dá)miRNA-9的永生化乳腺上皮細(xì)胞HMLE和乳腺癌細(xì)胞SUM149中E-cadherin的水平顯示前者E-cadherin含量降低了近70%,間質(zhì)標(biāo)記物波形蛋白Vimentin則增加了近5倍;后者E-cadherin含量降低了近50%,但波形蛋白等含量未上升;對(duì)應(yīng)的是體外實(shí)驗(yàn)中兩種細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力和侵襲性均增長(zhǎng)3~5倍[19]。緊接著,他們又利用報(bào)告基因分析驗(yàn)證了之前的結(jié)果并闡述了可能的發(fā)生機(jī)制:(1)miRNA-9是直接作用于E-cadherin mRNA 3′UTR,下調(diào)其表達(dá)水平,進(jìn)一步激活β-catenin信號(hào)途徑,使編碼血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的基因表達(dá)上調(diào),腫瘤血管增生,而增強(qiáng)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力和侵襲性;(2)E-cadherin釋放的β-連環(huán)蛋白分子可能進(jìn)入細(xì)胞核并激活調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移基因;(3)E-cadherin的丟失觸發(fā)EMT或介導(dǎo)系列下游基因的轉(zhuǎn)錄水平或信號(hào)通路發(fā)生改變,參與轉(zhuǎn)移細(xì)胞的擴(kuò)散[20]。也就是說(shuō),在這部分腫瘤中,miRNA-9上調(diào)可以負(fù)性調(diào)控E-cadherin的表達(dá),啟動(dòng)腫瘤轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)反應(yīng),增加腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力及對(duì)基質(zhì)層的侵襲力,促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生。反之,在高度惡性腫瘤的臨床治療過(guò)程中如果能應(yīng)用miRNA-9抑制劑則可以反轉(zhuǎn)這一過(guò)程的發(fā)生,提高腫瘤患者的生存時(shí)間。

    3.2 MiRNA-9在非腫瘤性疾病中對(duì)E-cadherin表達(dá)的影響及其可能的生物活性 柔毛水楊梅活性因子Cardiogenin治療的心肌梗死患者心臟組織中miRNA-9的表達(dá)顯著下調(diào)(4.92倍),同時(shí)RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)這些組織中E-cadherin的表達(dá)水平相應(yīng)地顯著上調(diào)[21-23]。因此推測(cè),作為miRNA-9的靶向分子,E-cadherin可能參與調(diào)控心肌梗死患者再生心肌相鄰心肌細(xì)胞之間閏盤的形成過(guò)程,促進(jìn)梗死心肌的修復(fù)。當(dāng)然,在體外培養(yǎng)細(xì)胞或者心肌梗死動(dòng)物模型中上調(diào)或者敲除miRNA-9的表達(dá)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)或疾病康復(fù)的影響還需要進(jìn)一步探索,以期能進(jìn)一步驗(yàn)證miRNA-9對(duì)E-cadherin表達(dá)的調(diào)控和兩者相互作用對(duì)心肌梗死患者心肌修復(fù)過(guò)程的卓越貢獻(xiàn)。

    4 小 結(jié)

    綜上所述,隨著醫(yī)學(xué)對(duì)miRNA研究的不斷深入,各類miRNA的生物結(jié)構(gòu)和功能日趨清晰。近年來(lái),miRNA-9以其獨(dú)特的生物學(xué)特性引起了廣大科學(xué)愛(ài)好者的興趣。研究表明其分布具有組織特異性和非對(duì)稱性,在不同腫瘤疾病中表達(dá)情況不一,對(duì)眾多下游靶分子的調(diào)控效應(yīng)各異。如本綜述所述,在高侵襲性肝癌、乳腺癌和永生化的乳腺上皮細(xì)胞以及用柔毛水楊梅活性因子Cardiogenin治療的心肌梗死患者心肌組織中miRNA-9和E-cadherin的表達(dá)水平呈負(fù)性相關(guān),而在黑素瘤細(xì)胞中二者表達(dá)水平卻呈現(xiàn)出正性相關(guān)。該現(xiàn)象的可能解釋為miRNA-9既可直接作用于E-cadherin的mRNA,也可通過(guò)NF-κB1等中間分子中轉(zhuǎn)作用于E-cadherin,而不同腫瘤組織中各基因表達(dá)譜不盡相同,故miRNA-9發(fā)揮作用的微環(huán)境也不同,對(duì)靶分子E-cadherin的調(diào)節(jié)通路起作用程度主次不一而產(chǎn)生不同的影響[19]。但是,其共同的作用特點(diǎn)是都參與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和梗死心肌修復(fù)的調(diào)控,只是具體到個(gè)別腫瘤其調(diào)控機(jī)制不完全一致。這樣臨床就可以在弄清單一腫瘤類型中其作用機(jī)制的基礎(chǔ)上采取不同的措施遏制其對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的誘導(dǎo),從而控制晚期腫瘤的發(fā)展,延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間;促進(jìn)其對(duì)梗死心肌修復(fù)作用的正向調(diào)控,提升心血管疾病的康復(fù)可能性和康復(fù)速度,以期同時(shí)貢獻(xiàn)于腫瘤和心血管疾病兩大嚴(yán)重影響人類生存質(zhì)量病患的轉(zhuǎn)歸。

    [1]Bracken CP,Khew-Goodall Y,Goodall GJ.Network-Based Approaches to Understand the Roles of miR-200 and Other microRNAs in Cancer[J].Cancer Res,2015,75(13):2594-2599.

    [2]Hammond SM.An overview of microRNAs[J].Adv Drug Deliv Rev,2015,87:3-14.

    [3]Su Z,Yang Z,Xu Y,et al.MicroRNAs in apoptosis,autophagy and necroptosis[J].Oncotarget,2015,6(11):8474-8490.

    [4]Wang Z,Li Y,Ahmad A,et al.Targeting miRNAs involved in cancer stem cell and EMT regulation:An emerging concept in overcoming drug resistance[J].Drug Resist Updat,2010,13(4):109-118.

    [5]Davalos A,Chroni A.Antisense oligonucleotides,microRNAs,and antibodies[J].Handb Exp Pharmacol,2015,224:649-689.

    [6]Yuva-Aydemir Y,Simkin A,Gascon E,et al.MicroRNA-9:functional evolution of a conserved small regulatory RNA[J].RNA Biol, 2011,8(4):557-564.

    [7]羅丹丹,羅玉萍,彭娟,等.miRNA-9基因家族進(jìn)化分析及其靶基因預(yù)測(cè)[J].中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào),2011,33(5):510-519.

    [8]Laios A,O′Toole S,Flavin R,et al.Potential role of miR-9 and miR-223 in recurrent ovarian cancer[J].Mol Cancer,2008,7(35): 1-14.

    [9]Nass D,Rosenwald S,Meiri E,et al.MiR-92b and miR-9/9*are speci fically expressed in brain primary tumors and can be used to differentiate primary from metastatic brain tumors[J].Brain Pathol,2009,19 (3):375-383.

    [10]Lin X,Peng P,Cheng L,et al.A natural compound induced cardiogenic differen-tiation of endogenous MSCs for repair of infracted heart[J].Differentiation,2012,83(1):1-9.

    [11]Gama A,Schmitt F.Cadherin cell adhesion system in canine mammary cancer:a review[J].Vet Med Int,2012,2012:357187.

    [12]Lecuit T,Yap AS.E-cadherin junctions as active mechanical integrators in tissue dynamics[J].Nat Cell Biol,2015,17(5):533-539.

    [13]Liu S,Kumar SM,Lu H.MicroRNA-9 up-regulates E-cadherin through inhibition of NF-κB1-Snail1 pathway in melanoma[J].J Pathol,2012,226(1):61-72.

    [14]Muqbil I,Wu J,Aboukameel A,et al.Snail nuclear transport:the gateways regulating epithelial-to-mesenchymal transition?[J].Semin Cancer Biol,2014,27:39-45.

    [15]Yun SJ,Kim WJ.Role of the epithelial-mesenchymal transition in bladder cancer:from prognosis to therapeutic target[J].Korean J Urol,2013,54(10):645-650.

    [16]Guo LM,Pu Y,Han Z.MicroRNA-9 inhibits ovarian cancer cell growth through regulation of NF-kappaB1[J].FEBS J,2009,276 (19):5537-5546.

    [17]Wan HY,Guo LM,Liu T,et al.Regulation of the transcription factor NF-kappaB1 by microRNA-9 in human gastric adenocarcinoma[J]. Mol Cancer,2010,9:16.

    [18]Tan HX,Wang Q,Chen LZ,et al.MicroRNA-9 reduces cell invasion and E-cadherin secretion in SK-Hep-1 cell[J].Med Oncol, 2010,27(3):654-660.

    [19]Ma L,Young J,Prabhala H,et al.miR-9,a MYC/MYCN-activated microRNA,regulates E-cadherin and cancer metastasis[J].Nat Cell Biol,2010,12(3):247-256.

    [20]Onder TT,Gupta PB,Mani SA,et al.Loss of E-cadherin promotes metastasis via multiple downstream transcriptional pathways[J].Cancer Res,2008,68(10):3645-3654.

    [21]Jovanovic M,Reiter L,Picotti P,et al.A quantita-tive targeted proteomics approach to validate predicted microRNA targets in C.elegans[J].Nat Methods,2010,7(10):837-842.

    [22]Delaloy C,Gao FB.A new role for microRNA-9 in human neural progenitor cells[J].Cell Cycle,2010,9(15):2913-2914.

    [23]Delaloy C,Liu L,Lee JA,et al.MicroRNA-9 coordinates proliferation and migration of human embryonic stem cells-derived neural progenitors[J].Cell Stem Cell,2010,6(4):323-335.

    Research progress of the regulation of small molecule RNA-9 to epithelial cell calcium sticky protein.

    XIAO Jian-hua1,DONG Zi-qiang1,YOU Yan2.1.Department of Urology,the First College of Clinical Medical Sience,China Three Gorges University/Institute of Urology,China Three Gorges University,Yichang 443003,Hubei,CHINA;2.Renhe Hospital of China Three Gorges University,Yichang 443003,Hubei,CHINA

    Epithelial cell calcium sticky protein(E-cadherin)is involved in the functional activities of many normal cells and tumor cells.Its expression level is regulated by microRNAs(miRNA)and other factors,which makes the important roles of miRNA-E-cadherin signaling pathway in variety of diseases have been widely concerned.In this paper,the regulation of miRNA-9 to expression of E-cadherin in different tumor diseases,non-cancer diseases or during tumor progression were reviewed.

    E-cadherin;miRNA;Tumor;Regulation

    R329.2+8

    A

    1003—6350(2016)07—1135—03

    10.3969/j.issn.1003-6350.2016.07.036

    2015-04-29)

    董自強(qiáng)。E-mail:dzq8678@yahoo.com.cn

    猜你喜歡
    黑素瘤調(diào)控分子
    分子的擴(kuò)散
    兒童黑素瘤診斷進(jìn)展
    如何調(diào)控困意
    經(jīng)濟(jì)穩(wěn)中有進(jìn) 調(diào)控托而不舉
    “精日”分子到底是什么?
    新民周刊(2018年8期)2018-03-02 15:45:54
    米和米中的危險(xiǎn)分子
    順勢(shì)而導(dǎo) 靈活調(diào)控
    臭氧分子如是說(shuō)
    SUMO修飾在細(xì)胞凋亡中的調(diào)控作用
    黑素瘤前哨淋巴結(jié)活檢與淋巴結(jié)觀察的最終對(duì)照研究報(bào)告
    日韩三级视频一区二区三区| 日本 av在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美极品一区二区三区四区| 怎么达到女性高潮| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久这里只有精品中国| 久久久国产精品麻豆| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 国产精品久久久久久久电影 | 国产男靠女视频免费网站| 美女大奶头视频| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 男人和女人高潮做爰伦理| svipshipincom国产片| 超碰成人久久| 国产三级在线视频| 国产精品精品国产色婷婷| tocl精华| 亚洲人成网站高清观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 宅男免费午夜| 男插女下体视频免费在线播放| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 不卡av一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久国产精品人妻蜜桃| 色哟哟哟哟哟哟| 久久中文看片网| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产三级黄色录像| 久久午夜亚洲精品久久| 日日夜夜操网爽| 身体一侧抽搐| 国产精品一及| 久久九九热精品免费| 亚洲天堂国产精品一区在线| 老汉色∧v一级毛片| 天堂动漫精品| 女警被强在线播放| 亚洲av成人一区二区三| 波多野结衣高清无吗| 国产午夜精品久久久久久| 午夜精品在线福利| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品1区2区在线观看.| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久久久久久精品吃奶| 国产人伦9x9x在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 一二三四社区在线视频社区8| 好男人在线观看高清免费视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲成人免费电影在线观看| 天堂√8在线中文| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久久久国产a免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 色播亚洲综合网| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 禁无遮挡网站| 丁香六月欧美| 国产精品影院久久| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美中文综合在线视频| 成年女人看的毛片在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 欧美丝袜亚洲另类 | a级毛片在线看网站| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 美女黄网站色视频| 国产成人aa在线观看| 国产精品野战在线观看| 色在线成人网| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 中文字幕最新亚洲高清| 午夜视频精品福利| 欧美日韩乱码在线| 国产av一区在线观看免费| 欧美日韩综合久久久久久 | 色av中文字幕| 一区二区三区激情视频| 国产精品九九99| 热99re8久久精品国产| 成人精品一区二区免费| 欧美在线黄色| 亚洲五月婷婷丁香| 在线观看舔阴道视频| 男女午夜视频在线观看| 成人无遮挡网站| 国产综合懂色| 嫩草影视91久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲欧美激情综合另类| 免费无遮挡裸体视频| 草草在线视频免费看| 午夜福利在线观看吧| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 动漫黄色视频在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 人妻久久中文字幕网| 免费无遮挡裸体视频| 国产私拍福利视频在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 一级毛片精品| 一区福利在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 久久久久久久久中文| 日本与韩国留学比较| 亚洲av熟女| 中文字幕最新亚洲高清| 日本五十路高清| 我要搜黄色片| 亚洲第一电影网av| 国产乱人视频| a级毛片在线看网站| 91老司机精品| 久久国产乱子伦精品免费另类| 91av网站免费观看| 国产综合懂色| 色在线成人网| 香蕉国产在线看| 色综合婷婷激情| 精华霜和精华液先用哪个| 老鸭窝网址在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产精品av久久久久免费| 欧美一级毛片孕妇| 999久久久精品免费观看国产| 欧美性猛交黑人性爽| 美女高潮的动态| 老司机在亚洲福利影院| 九色成人免费人妻av| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产精品1区2区在线观看.| 五月玫瑰六月丁香| 久久草成人影院| 国产视频一区二区在线看| www.999成人在线观看| 三级毛片av免费| 757午夜福利合集在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 很黄的视频免费| 99国产精品一区二区三区| 久久这里只有精品中国| 国产成人一区二区三区免费视频网站| av福利片在线观看| 床上黄色一级片| 亚洲成a人片在线一区二区| 日韩精品中文字幕看吧| 九色成人免费人妻av| 国产69精品久久久久777片 | aaaaa片日本免费| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一区福利在线观看| 国产美女午夜福利| 黄色日韩在线| 国产一区二区激情短视频| 日本黄色片子视频| 亚洲专区国产一区二区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 婷婷丁香在线五月| 91字幕亚洲| 日韩av在线大香蕉| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲专区中文字幕在线| 成人无遮挡网站| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品久久久av美女十八| 香蕉国产在线看| 国产伦在线观看视频一区| 在线永久观看黄色视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 曰老女人黄片| АⅤ资源中文在线天堂| 国产激情久久老熟女| 国产99白浆流出| 天天添夜夜摸| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 成人无遮挡网站| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 美女黄网站色视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| a级毛片在线看网站| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 男女下面进入的视频免费午夜| av女优亚洲男人天堂 | 一夜夜www| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产又色又爽无遮挡免费看| 热99re8久久精品国产| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲中文av在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 好男人电影高清在线观看| cao死你这个sao货| netflix在线观看网站| 久久这里只有精品中国| 又爽又黄无遮挡网站| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久久久精品国产欧美久久久| 男人舔奶头视频| 国模一区二区三区四区视频 | 夜夜爽天天搞| 搞女人的毛片| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲欧美精品综合久久99| 成人av一区二区三区在线看| 又大又爽又粗| 757午夜福利合集在线观看| 国产av不卡久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 亚洲av第一区精品v没综合| 免费观看精品视频网站| 久久99热这里只有精品18| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲性夜色夜夜综合| 天堂影院成人在线观看| 美女免费视频网站| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品不卡国产一区二区三区| 观看美女的网站| 亚洲在线观看片| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美色视频一区免费| 超碰成人久久| 99国产综合亚洲精品| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 最新中文字幕久久久久 | 黄色 视频免费看| 两个人视频免费观看高清| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品一及| 亚洲人与动物交配视频| 老司机在亚洲福利影院| 91av网站免费观看| 在线播放国产精品三级| 久久欧美精品欧美久久欧美| 最近在线观看免费完整版| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲无线在线观看| 国产激情欧美一区二区| 在线免费观看的www视频| 精品日产1卡2卡| 神马国产精品三级电影在线观看| 毛片女人毛片| 久久国产精品影院| 欧美成人性av电影在线观看| 在线观看舔阴道视频| 波多野结衣高清作品| 日本三级黄在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 在线观看日韩欧美| 成年女人看的毛片在线观看| 嫩草影院入口| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美激情在线99| 久久精品国产综合久久久| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产真人三级小视频在线观看| 一进一出抽搐动态| 国内精品美女久久久久久| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美高清成人免费视频www| 99热只有精品国产| 久久久久精品国产欧美久久久| 美女免费视频网站| 少妇的丰满在线观看| 久久久久久人人人人人| 欧美成狂野欧美在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲av熟女| 亚洲av成人一区二区三| 露出奶头的视频| 免费在线观看日本一区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美午夜高清在线| 午夜福利成人在线免费观看| 成人三级黄色视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜福利在线在线| 亚洲人与动物交配视频| 男人舔女人的私密视频| 午夜精品在线福利| 国内精品美女久久久久久| 国产成人影院久久av| 曰老女人黄片| 久久亚洲真实| 亚洲av五月六月丁香网| 母亲3免费完整高清在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 天堂网av新在线| 久久精品国产清高在天天线| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲,欧美精品.| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲成人精品中文字幕电影| 性欧美人与动物交配| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 又粗又爽又猛毛片免费看| 精品一区二区三区视频在线 | 欧美黑人欧美精品刺激| 伦理电影免费视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 最新中文字幕久久久久 | 午夜免费成人在线视频| 午夜激情福利司机影院| 婷婷精品国产亚洲av在线| 一进一出抽搐动态| 波多野结衣高清无吗| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲成人久久性| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线播放国产精品三级| www日本黄色视频网| 欧美色欧美亚洲另类二区| 久久久久久人人人人人| 无人区码免费观看不卡| 日韩精品青青久久久久久| 久9热在线精品视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日韩中文字幕欧美一区二区| 午夜精品在线福利| 国产高清视频在线播放一区| 黄色片一级片一级黄色片| 我的老师免费观看完整版| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲电影在线观看av| 男人的好看免费观看在线视频| 国产亚洲av高清不卡| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲精品在线美女| 午夜精品在线福利| 久久久久久九九精品二区国产| 午夜精品久久久久久毛片777| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲欧美日韩高清专用| 九九在线视频观看精品| 男人的好看免费观看在线视频| 国产视频一区二区在线看| 国产成人影院久久av| 亚洲熟女毛片儿| 国模一区二区三区四区视频 | 午夜激情欧美在线| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 桃色一区二区三区在线观看| av国产免费在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产高清激情床上av| svipshipincom国产片| 久久久成人免费电影| 国产高清videossex| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲男人的天堂狠狠| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品久久久人人做人人爽| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品久久久久久精品电影| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 免费电影在线观看免费观看| 午夜久久久久精精品| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲av成人av| 国产1区2区3区精品| 综合色av麻豆| 不卡av一区二区三区| 成人午夜高清在线视频| 又紧又爽又黄一区二区| 后天国语完整版免费观看| 欧美三级亚洲精品| 午夜精品久久久久久毛片777| 精品电影一区二区在线| 免费在线观看成人毛片| av国产免费在线观看| 国产激情久久老熟女| 国产精品久久久久久精品电影| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲,欧美精品.| 怎么达到女性高潮| 精品久久久久久久毛片微露脸| 9191精品国产免费久久| 岛国在线免费视频观看| 在线观看免费视频日本深夜| 久久午夜亚洲精品久久| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99久久综合精品五月天人人| 香蕉av资源在线| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲成av人片在线播放无| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 欧美中文综合在线视频| 深夜精品福利| 一级毛片女人18水好多| 淫秽高清视频在线观看| 超碰成人久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲成人久久性| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 午夜福利18| 精品久久久久久成人av| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲午夜理论影院| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲国产高清在线一区二区三| 麻豆成人午夜福利视频| 村上凉子中文字幕在线| 久久伊人香网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 看黄色毛片网站| 床上黄色一级片| 久久久久免费精品人妻一区二区| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲欧美日韩东京热| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲五月天丁香| 日本成人三级电影网站| 可以在线观看的亚洲视频| 午夜福利18| 亚洲国产精品久久男人天堂| 在线观看午夜福利视频| 手机成人av网站| 最近最新免费中文字幕在线| 国产高潮美女av| 国产视频内射| 久久99热这里只有精品18| 天堂网av新在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 搞女人的毛片| 十八禁人妻一区二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 色视频www国产| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产三级黄色录像| 亚洲最大成人中文| 久久性视频一级片| 精品人妻1区二区| 91麻豆av在线| 男女床上黄色一级片免费看| 欧美日本视频| 久久精品91无色码中文字幕| 免费在线观看影片大全网站| 首页视频小说图片口味搜索| 18禁国产床啪视频网站| 日韩欧美在线乱码| 99久久无色码亚洲精品果冻| 成人av一区二区三区在线看| 久久草成人影院| 国产91精品成人一区二区三区| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 精品免费久久久久久久清纯| 99视频精品全部免费 在线 | 久久精品aⅴ一区二区三区四区| xxx96com| 一个人免费在线观看的高清视频| 网址你懂的国产日韩在线| 后天国语完整版免费观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久久久九九精品影院| 欧美+亚洲+日韩+国产| 人妻久久中文字幕网| 欧美黑人欧美精品刺激| 成人永久免费在线观看视频| а√天堂www在线а√下载| 国产黄片美女视频| 久9热在线精品视频| 精品久久久久久,| 亚洲天堂国产精品一区在线| 天天添夜夜摸| 在线观看免费视频日本深夜| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 搡老岳熟女国产| 中文在线观看免费www的网站| 淫秽高清视频在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 99精品久久久久人妻精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 日本一本二区三区精品| 舔av片在线| 麻豆成人av在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲熟女毛片儿| 成年人黄色毛片网站| 欧美最黄视频在线播放免费| 搞女人的毛片| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 90打野战视频偷拍视频| 韩国av一区二区三区四区| 国产精品av久久久久免费| 亚洲专区字幕在线| 一夜夜www| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲黑人精品在线| 国产熟女xx| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 男人舔女人的私密视频| 在线免费观看不下载黄p国产 | 亚洲国产精品合色在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女| www.www免费av| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 好男人在线观看高清免费视频| 午夜福利高清视频| 在线看三级毛片| 久久久久亚洲av毛片大全| 99久国产av精品| 亚洲乱码一区二区免费版| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 免费看a级黄色片| 亚洲欧美精品综合久久99| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 麻豆国产97在线/欧美| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 黄色成人免费大全| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 色播亚洲综合网| 身体一侧抽搐| 99久久精品国产亚洲精品| 国产精品影院久久| 青草久久国产| 亚洲真实伦在线观看| 老司机福利观看| 黄色女人牲交| 国产精品一区二区免费欧美| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 日本熟妇午夜| 精品久久久久久久末码| 国产99白浆流出| 女警被强在线播放| 美女免费视频网站| 国产精品一区二区免费欧美| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲色图av天堂| 久久久久国内视频| 国产乱人伦免费视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲成人久久爱视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产成人啪精品午夜网站| 天堂√8在线中文| 超碰成人久久| 毛片女人毛片| 久久久久久人人人人人| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久成人免费电影| 91老司机精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 黄色日韩在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 人人妻人人澡欧美一区二区| 精品久久久久久成人av| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品99久久久久久久久| 99久久无色码亚洲精品果冻| 精品国产亚洲在线| 99热6这里只有精品| 久久这里只有精品中国| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产成人精品久久二区二区91| 成人特级黄色片久久久久久久| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品久久久av美女十八| 观看免费一级毛片| 亚洲av电影在线进入| av天堂中文字幕网| 99热6这里只有精品| 丰满的人妻完整版| 成人欧美大片| 成在线人永久免费视频| 精品不卡国产一区二区三区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 嫩草影视91久久| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 一本综合久久免费| 岛国在线免费视频观看| 黄色成人免费大全|