阿爾茨海默病患者尿中阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白含量的變化

權(quán)彤彤 王海英 劉 斌 楊潞溪 樂(lè)樹(shù)澤

(1.解放軍昆明總醫(yī)院北較場(chǎng)分院傳染結(jié)核科，云南 昆明 650232；2.解放軍昆明療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650200)

阿爾茨海默病患者尿中阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白含量的變化

權(quán)彤彤1王海英2劉 斌1楊潞溪1樂(lè)樹(shù)澤1

(1.解放軍昆明總醫(yī)院北較場(chǎng)分院傳染結(jié)核科，云南 昆明 650232；2.解放軍昆明療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650200)

阿爾茨海默病( Alzheimer's disease，AD)又稱(chēng)原發(fā)性老年癡呆癥，其病因迄今不明，目前診斷主要靠患者病史、癥狀、神經(jīng)心理學(xué)測(cè)試并排除其他類(lèi)型癡呆等，只有待患者死后病理尸檢這一金標(biāo)準(zhǔn)確診。研究表明，AD患者的神經(jīng)元纖維纏結(jié)（NFTs）中存在大量阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白（AD7c-NTP）[1]。我們觀察了50例AD患者尿AD7c-NTP水平的變化，報(bào)告如下。

1 病例與方法

1.1 病例 2007年1月-2016年3月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的AD患者50例，入選病例均符合美國(guó)國(guó)立神經(jīng)病學(xué)、語(yǔ)言功能障礙和和中風(fēng)研究所（NIHCDS-ADR-DA）AD診斷標(biāo)準(zhǔn)[2-3]（血壓、心電圖、血常規(guī)、血糖及血脂等是否正常未作篩選）；50例AD患者中男30例,女20例；年齡58～89歲，平均（70.5±5.8）歲。 對(duì)照組為同期在我院行健康查體的人群中專(zhuān)門(mén)篩查出的智能檢查均正常，無(wú)心腦血管疾病，血壓、心電圖、血常規(guī)、血糖及血脂均在正常范圍，無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)和其他疾病200例中老年人；對(duì)照組中男120例,女80例；年齡50～80歲，平均（65.2 ± 6.9） 歲。兩組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 標(biāo)本采集與檢測(cè) 留取晨尿的中段尿50～100 ml，混勻，肉眼觀察，渾濁和尿色深的標(biāo)本棄除。50例AD患者所留尿液標(biāo)本均符合采集要求，離心5～10 min后，取上清液以專(zhuān)用試管于2～8 ℃冰箱密封保存（保存不超過(guò)1周）備用。AD7c-NTP含量測(cè)定采用ELISA方法，采用KHBST-360酶標(biāo)儀（上?？迫A公司）和AD7c-NTP ELISA檢測(cè)試劑盒（深圳安群公司）進(jìn)行檢測(cè)，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。結(jié)果判定：AD7c-NTP含量≥2.0 ng/mL判定為陽(yáng)性，陽(yáng)性結(jié)果重復(fù)檢測(cè)3次，取平均值；若3次檢測(cè)結(jié)果差異過(guò)大則重新留取標(biāo)本復(fù)檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

AD組尿AD7c-NTP陽(yáng)性43例（86%），陰性7例（14%）；對(duì)照組中尿AD7c-NTP陽(yáng)性20例（10%），陰性180例（90%）；兩組陽(yáng)性率比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=22.3，P＜0.01)。AD組尿AD7c-NTP含量為（2.04±0.14）ng/mL，對(duì)照組尿AD7c-NTP含量為（1.22±0.90）ng/mL，兩組尿AD7c-NTP含量比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01)。

3 討 論

AD是發(fā)生于老年和老年前期、以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和行為損害為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，臨床上表現(xiàn)為記憶障礙、失語(yǔ)、失用、失認(rèn)、視空間能力損害、抽象思維和計(jì)算力損害、人格和行為改變等，是老年期癡呆的最常見(jiàn)類(lèi)型，嚴(yán)重危害老年人身心健康[4]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，≥65歲的老年人約有5%患有AD，隨著年齡的增長(zhǎng)，患病率逐漸上升，至85 歲，每3～5 名老年人中就有1名罹患AD[3]。隨著社會(huì)老齡化進(jìn)程的加速，AD已成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的疾病，并給家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)[5]。早期診斷、早期防治是目前提高AD患者生活質(zhì)量的唯一途徑。AD7c-NTP由腦神經(jīng)元表達(dá)，與NFTs共同定位于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生的軸突。在AD神經(jīng)元退行性變過(guò)程中，AD7c-NTP表達(dá)是早期事件，其發(fā)生在NFTs形成之前，即可在沒(méi)有NFTs的神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)AD7c-NTP表達(dá)，AD7c-NTP在AD患者的腦脊液和尿液中存在，且隨著病程的延長(zhǎng)，含量逐漸升高，與癡呆程度成正相關(guān)[6]。

本研究以中老年人為研究對(duì)象，對(duì)尿液AD7c-NTP含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，AD患者尿中AD7c-NTP含量較同齡非AD患者明顯升高； AD患者尿AD7c-NTP陽(yáng)性率較非AD人群明顯升高。提示中老年人尿AD7c-NTP含量變化對(duì)AD診斷有重要意義。研究顯示，一些藥物如姜黃素可降低小鼠尿液中AD7c-NTP含量，推測(cè)AD患者使用姜黃素可能會(huì)降低尿液中AD7c-NTP含量，延緩AD的進(jìn)展[7]。

在目前的檢測(cè)技術(shù)下，影響尿AD7c-NTP含量檢測(cè)結(jié)果的主要因素是未按要求留取標(biāo)本和檢測(cè)的操作方法。本檢測(cè)為無(wú)創(chuàng)性，標(biāo)本留取方便，易被中老年患者接受；所需時(shí)間較短，一般2～3h即可報(bào)告結(jié)果；且ELISA檢測(cè)方法可操作性強(qiáng)、簡(jiǎn)單、方便，易于在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展，是目前早期發(fā)現(xiàn)和診斷AD的一種有效方法。但未按要求留取標(biāo)本和檢測(cè)的操作方法不規(guī)范會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果，因而在實(shí)際工作中需要引起注意。

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［2］Dubois B,Feldman HH,Jacova Cl.Research criteriafor the diagnosis of Alzheimer' s disease :revising the NINCDS-ADRDA criteria[J].Lancet Neurology,2007,6(8):734-746

［3］龐傳武. 阿爾茨海默病的診斷與治療[J]. 社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志,2013 , 11(19) :82-84

［4］廖玨，廖新品. 阿爾茨海默病的研究現(xiàn)狀[J]. 黑龍江醫(yī)學(xué),2012,36(1):16-18

［5］但秀娟，王曉京，苑萍.老年期癡呆患者衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)狀況分析[J].感染、炎癥、修復(fù)，2016，17（2）：106-108.

［6］王蓉，姬志娟，盛樹(shù)立. 阿爾茨海默病尿神經(jīng)絲蛋白方法的建立及其臨床意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2010，33（1）：46-50

［7］李瑞晟，李勇，王虹，任映，朱志慧，孫海蕓，楊金鐸，王蓬文.動(dòng)態(tài)觀察姜黃素對(duì)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠尿液AD7c-NTP濃度的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2010，18（5）：406-409

2016-04-22)

10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2016. 03. 007