血漿中腫瘤相關(guān)生物活性物質(zhì)的研究進(jìn)展

張冬青　王海濱　趙 嬌　汪德清（.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 00048；.解放軍總醫(yī)院輸血科，北京 000853）

?

血漿中腫瘤相關(guān)生物活性物質(zhì)的研究進(jìn)展

張冬青1,2王海濱1趙 嬌1汪德清2
（1.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100048；2.解放軍總醫(yī)院輸血科，北京 1000853）

研究證實(shí), 免疫、炎癥、腫瘤三者之間具有相關(guān)性，炎癥反應(yīng)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移中占有重要作用，腫瘤相關(guān)炎癥是指腫瘤組織中的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、炎癥介質(zhì)產(chǎn)生、血管增生等，是腫瘤所伴隨的類似炎癥的微環(huán)境，腫瘤相關(guān)炎癥重要的機(jī)制是炎癥細(xì)胞分泌的炎癥介質(zhì)作用于腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤增殖[1]。腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移不僅是腫瘤細(xì)胞的固有特征，還有賴于腫瘤微環(huán)境中各種生物學(xué)活性物質(zhì)。這些生物活性物質(zhì)可引起細(xì)胞的損傷和病理性反應(yīng)，在腫瘤中也具有重要作用，特別是促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)的細(xì)胞因子也可促進(jìn)癌前細(xì)胞的突變，腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移和腫瘤新生血管的發(fā)生[2]，因此，炎癥介質(zhì)與腫瘤的相關(guān)性越來越引起關(guān)注。本文對(duì)血漿中腫瘤相關(guān)生物活性物質(zhì)進(jìn)行了初步總結(jié)，期望對(duì)后續(xù)研究提供參考。

1　細(xì)胞因子

細(xì)胞因子是一類在體內(nèi)具有廣泛生物學(xué)效應(yīng)的物質(zhì)，是由致敏或活化的淋巴細(xì)胞、組織細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞合成與釋放的小分子多肽，相互間形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，不僅參與機(jī)體的免疫反應(yīng)，而且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

1.1腫瘤壞死因子-α（ TNF-α）TNF-α由多種免疫細(xì)胞產(chǎn)生和分泌，TNF-α基因由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成，定位于第6對(duì)染色體上，TNF-α-308位點(diǎn)突變可增強(qiáng)TNF-α的轉(zhuǎn)錄6～7倍，不同個(gè)體攜帶TNF-α-308位點(diǎn)基因型的不同，TNF-α的分泌濃度會(huì)有較大差異。TNF-α具有介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)、抑制造血等多種生物學(xué)功能，TNF-α通過三聚體形式與TNF-α受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用，但是TNF-α能經(jīng)腎臟快速排泄、被各種蛋白酶分解，在體內(nèi)很不穩(wěn)定，半衰期較短（15～30 min）。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，正常人群血漿TNF-α水平為（8.7±5.2）pg/ml[3]；國(guó)外報(bào)道，正常人血漿TNF-α水平為（9.3±3.2）pg/ml[4]。各類感染和外來刺激均可引起TNF-α的表達(dá)和釋放，許多疾病均具有特征性的TNF-α水平升高。

研究發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中TNF-α表達(dá)增多，肝癌患者體內(nèi)TNF-α能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從G0向G1期轉(zhuǎn)化，對(duì)細(xì)胞具有生長(zhǎng)因子樣作用。有研究者發(fā)現(xiàn)TNF-α通過激活p44/42MAPK、Akt和NF-κB信號(hào)途徑促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖[5]。趙文鵬等[6]研究發(fā)現(xiàn)TNF-α可能作為一個(gè)炎癥因子，通過AP-1途徑促進(jìn)慢性炎癥轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤。此外，TNF-α能夠上調(diào)血管生成因子水平[7]，對(duì)腫瘤生長(zhǎng)過程中的纖維血管反應(yīng)具有重要作用，能夠誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）等血管生成因子的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。在肝臟，TNF-α主要由激活的Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生，與各種肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，TNF-α mRNA增加的水平與肝臟病理?yè)p傷的程度是一致的，在肝細(xì)胞向肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)變的早期階段起到一定作用[8]。當(dāng)TNF-α濃度<1×106U/L時(shí)，TNF-α對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)為促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移；高濃度時(shí)則具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫的作用。TNF-α可以通過上調(diào)肝癌細(xì)胞HepG2表面B7-H1分子的表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，而長(zhǎng)期較高水平的TNF-α卻能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

1.2白細(xì)胞介素（IL）-1βIL-1β是一種重要的炎癥細(xì)胞因子。IL-1家族成員主要由IL-1α、IL-1β和IL-1受體拮抗劑（IL-1RA）組成， 由炎癥狀態(tài)或免疫反應(yīng)中的T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等產(chǎn)生，存在于血漿與組織液中，國(guó)內(nèi)正常人群血漿IL-1β水平為52.36～78.56 pg/ml[9]，國(guó)外正常人群血漿IL-1β水平為（2.9±4.7）pg/ml[10]。IL-1β主要激活NF-κB 和c-Jun等信號(hào)通路[11]，IL-1β通過與跨膜受體IL-1R結(jié)合后激活下游信號(hào)通路，促使IRAK4、IRAK1發(fā)生磷酸化激活，并釋放入胞漿形成復(fù)合物，從而激活NF-κB信號(hào)通路[12-13]，該通路在肝細(xì)胞肝癌時(shí)被活化以抗凋亡、維持腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[14-15]。IL-1β具有多種生物學(xué)活性，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，引起發(fā)熱反應(yīng)，誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生，誘導(dǎo)單核細(xì)胞、粒細(xì)胞趨化到炎癥局部部位，因此產(chǎn)生組織損傷等。

急性炎癥條件下的IL-1β可通過激活免疫細(xì)胞起到清除腫瘤細(xì)胞的功能，IL-1β可由腫瘤炎癥微環(huán)境或者腫瘤細(xì)胞分泌產(chǎn)生，在分子水平上能刺激包括基質(zhì)金屬蛋白酶、血管生成因子和黏附分子在內(nèi)的多種有助于腫瘤生長(zhǎng)的物質(zhì)，加速腫瘤血管的生成，參與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[16]，在腫瘤的產(chǎn)生和預(yù)后中起了非常重要的作用[17]。IL-1β在乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌等腫瘤中都有較高水平的表達(dá)，林志娟等[18]發(fā)現(xiàn)IL-1β在肝癌細(xì)胞的高表達(dá)能夠顯著促進(jìn)其在體外的增殖活性，肝癌細(xì)胞中異常高表達(dá)的IL-1β，與其受體結(jié)合，能夠促進(jìn)前列腺素E2、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的合成，從而誘導(dǎo)血管新生，上調(diào)環(huán)氧酶-2（COX-2）的表達(dá)，能夠削弱機(jī)體天然免疫，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，促進(jìn)肝癌的發(fā)生，同時(shí)減弱干擾素的抗病毒活性。但是，IL-1β在原發(fā)性肝癌中的具體作用機(jī)制尚存在眾多爭(zhēng)議。

1.3IL-6IL-6是一種多功能的細(xì)胞因子，由活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生。IL-6由185個(gè)氨基酸構(gòu)成，具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、抗凋亡等作用，同時(shí)具有促炎和抗炎的雙重作用。國(guó)內(nèi)正常人群血清IL-6水平為（1.21±0.63）pg/ml[19]。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道正常人群血漿IL-6水平為（1.04±1.12）pg/ml，系統(tǒng)性紅斑狼瘡血清IL-6水平為（63.00±67.28）pg/ml，達(dá)到正常人的4倍[20]。IL-6可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞的分化與成熟，刺激急性反應(yīng)蛋白的合成，因此可以加重局部炎性反應(yīng)。IL-6還可作為反應(yīng)炎癥程度的指標(biāo)。

IL-6是Notch信號(hào)通路下游的靶基因，Notch是一類進(jìn)化上高度保守的跨膜受體蛋白，調(diào)控人類細(xì)胞等多種生物細(xì)胞的增殖、分化、凋亡，相鄰細(xì)胞表達(dá)的Notch受體與其配體結(jié)合，導(dǎo)致Notch受體激活，并激活下游靶基因，發(fā)揮生物學(xué)作用。越來越多的研究者發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)通路在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的作用，Notch活化可以促進(jìn)IL-6的表達(dá)，因此，IL-6被認(rèn)為是炎癥相關(guān)腫瘤的一個(gè)關(guān)鍵性因子[21-22]， 在多種腫瘤中起著促瘤因子的作用，大量研究結(jié)果證實(shí)IL-6的過表達(dá)與腫瘤發(fā)生有關(guān)，如淋巴瘤、黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌等，同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)血清中IL-6的水平與腫瘤的分期、浸潤(rùn)程度、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，與腫瘤患者的預(yù)后相關(guān)[23]。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3（STAT3）是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)傳遞和基因表達(dá)調(diào)控因子，其靶基因包括與細(xì)胞增殖分化、抗凋亡調(diào)控等密切相關(guān)的基因，STAT3的激活可以通過誘導(dǎo)多個(gè)腫瘤免疫耐受相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，IL-6/STAT3通路可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期中G1/S和G2/M節(jié)點(diǎn)來加快腫瘤細(xì)胞的分裂，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子過度表達(dá)改變細(xì)胞周期進(jìn)展，促進(jìn)血管發(fā)生，在肝癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[24]。血清IL-6水平高和腫瘤局部組織IL-6高表達(dá)的患者腫瘤生物學(xué)特性差。腫瘤細(xì)胞分泌的IL-6通過與自身靶細(xì)胞的IL-6受體（IL-6R）相結(jié)合（即自分泌環(huán)路）或作用于其他細(xì)胞表面的IL-6R（即旁分泌環(huán)路）而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。在模擬人肝癌細(xì)胞腫瘤微環(huán)境條件下，抑制IL-6能夠減弱人肝癌細(xì)胞的血管再生能力。

1.4轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β1TGF-β是一類具有多功能的細(xì)胞因子，根據(jù)編碼基因不同可分為3種同系物：TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3，其結(jié)構(gòu)和功能相似，其中TGF-β1為表達(dá)最多最普遍的細(xì)胞因子。國(guó)內(nèi)正常人群血漿TGF-β1水平為（1 344.8±80.5）pg/ml[25]，國(guó)外正常人群血漿水平為（13.72±8.17）ng/ml。TGF-β1具有多種生物功能，包括促進(jìn)血管生成、調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和凋亡。在機(jī)體免疫失衡狀態(tài)下，TGF-β1水平升高，機(jī)體失去對(duì)外來病原或腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。TGF-β1通過抑制ILs等細(xì)胞因子，終止了淋巴細(xì)胞的自分泌，抑制T淋巴細(xì)胞分化，抑制B淋巴細(xì)胞分泌免疫球蛋白。

TGF-β1是肝纖維化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，通過激活肝星狀細(xì)胞（HSCs），增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)的合成，從而導(dǎo)致肝纖維化的發(fā)生；TGF-β1通過改變?chǔ)?catenin的亞細(xì)胞定位，增強(qiáng)WNT/β-catenin信號(hào)通路的活性。WNT/β-catenin信號(hào)通路在細(xì)胞增殖、分化的過程中發(fā)揮著重要的作用。目前較為認(rèn)可的是TGF-β1通路在腫瘤發(fā)展的早期階段可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，使細(xì)胞周期阻滯在G1期，同時(shí)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡；但是在腫瘤發(fā)展的后期，腫瘤細(xì)胞可自身合成并分泌大量TGF-β1，或者在細(xì)胞外TGF-β1的作用下，通過上皮間質(zhì)化使腫瘤細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)改變，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。肝癌患者的肝組織及血漿中均有不同程度TGF-β1 mRNA的表達(dá)，并且在一些前列腺癌、直腸癌患者血清中均呈現(xiàn)高表達(dá)[26]。林國(guó)和等[27]研究發(fā)現(xiàn)肝癌組織中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的數(shù)量與TGF-β1的表達(dá)呈正相關(guān)，腫瘤組織表達(dá)的TGF-β1可能增加腫瘤局部的Treg浸潤(rùn)，參與肝癌的免疫逃逸機(jī)制。

0.1～10 μg/L 的TGF-β1可以有效刺激肝癌細(xì)胞BEL-7401的生長(zhǎng)，延長(zhǎng)肝癌細(xì)胞的存活時(shí)間，促進(jìn)DNA合成，增強(qiáng)其活性，其主要機(jī)制是通過誘導(dǎo)Smad2、Smad3、Smad4復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，對(duì)核內(nèi)基因進(jìn)行表達(dá)調(diào)控[28]。

2　血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）

20世紀(jì)80年代Senger等[29]在腫瘤細(xì)胞分泌物中發(fā)現(xiàn)了VEGF，人VEGF編碼基因位于染色體的6p21,3，由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成，目前發(fā)現(xiàn)了VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D和胎盤生長(zhǎng)因子5個(gè)基因產(chǎn)物，相對(duì)分子質(zhì)量為34 000～45 000。VEGF主要由間充質(zhì)、基質(zhì)和上皮來源的細(xì)胞分泌，如血液中的血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞等，正常人體液中含有低量的VEGF，維持正常的血管密度和通透性，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，正常人群血漿VEGF水平為（175.23±120.83）ng/L[30]。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道正常人群血漿VEGF水平為（9.2±64.3）pg/ml[31]。VEGF是生理性或病理性血管新生的主要調(diào)控因子，其表達(dá)受多種因素的影響，缺氧、炎癥刺激、腫瘤的生長(zhǎng)等都可影響VEGF的調(diào)控[32]，VEGF主要通過特異性受體才能發(fā)揮生物學(xué)作用，能夠介導(dǎo)血管通透性、血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移、血管的再生，VEGF受體是跨膜糖蛋白，包括VEGFR1（FLT-1）、VEGFR2（KDR）、VEGFR3（flt4）、肝素硫酸鹽蛋白聚糖和神經(jīng)氈蛋白，VEGFR能夠特異性地作用于血管的內(nèi)皮細(xì)胞， VEGF與VEGFR1結(jié)合能夠發(fā)揮炎性作用，促進(jìn)巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞的活化和遷移，增強(qiáng)各種促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生；VEGF與VEGFR1結(jié)合后會(huì)誘導(dǎo)一氧化氮合酶（NOS）的活化，使一氧化氮（NO）增多，從而激活細(xì)胞質(zhì)中的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶，可以增加血管的通透性[33]。

腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和進(jìn)展與腫瘤血管形成有密切關(guān)系，腫瘤細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中需要營(yíng)養(yǎng)及血供。腫瘤細(xì)胞釋放的VEGF與VEGFR結(jié)合，激活級(jí)聯(lián)酪氨酸激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，釋放相關(guān)的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和酶等，促進(jìn)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞表型的變化、增殖、遷移，最終生成大量的新生血管，為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)提供保障[34]。因此，血中VEGF水平可以作為判斷肝癌進(jìn)展的指標(biāo)[35]。

3　調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞的表達(dá)與分泌因子（RANTES）

趨化因子及其受體在慢性炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，并且與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，RANTES是趨化因子超家族的重要成員之一，又稱為CC趨化因子配體5 （chemokine ligand5, CCL5），主要的受體為CCR1、3、5，由68個(gè)氨基酸殘基組成，是分子量為8 kD的蛋白質(zhì)，它是一類可誘導(dǎo)的、分泌型的炎癥性細(xì)胞因子，國(guó)內(nèi)正常人群血漿RANTES水平為（5 374.27±927.87）pg/ml[36]。國(guó)外正常人群血漿RANTES范圍為（60.0±24.6）ng/ml[37]。血漿RANTES水平在抗磷脂綜合征患者中顯著升高[38]。RANTES具有誘導(dǎo)、分泌、趨化和活化T細(xì)胞和單核細(xì)胞的功能，能夠參與組織損傷的修復(fù)，在感染過程中對(duì)炎癥細(xì)胞具有運(yùn)輸和調(diào)節(jié)作用，同時(shí)在腫瘤免疫中發(fā)揮重要作用。正常狀態(tài)下T淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）均能表達(dá)RANTES，炎癥反應(yīng)中CD8+細(xì)胞、血小板、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞均能分泌RANTES[39]，低表達(dá)的RANTES可以使T細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用，而RANTES高表達(dá)與多種炎癥細(xì)胞有密切關(guān)系，可使T細(xì)胞激活，產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)[40]。大部分RANTES與其受體CCR5相結(jié)合而產(chǎn)生信號(hào)轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞防御和應(yīng)激刺激等多種生物效應(yīng)，特別是在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用；還有一部分RANTES可通過旁分泌直接作用于腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，腫瘤細(xì)胞也可直接分泌RANTES，促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移。

研究者發(fā)現(xiàn)肝癌患者血清中RANTES的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組，可能與Th2細(xì)胞因子的升高以及腫瘤免疫逃逸有關(guān)，RANTES在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用，RANTES表達(dá)水平的升高可能預(yù)示著腫瘤的發(fā)生，RANTES可能作為肝癌臨床診斷的輔助檢查項(xiàng)目[41]。

4　MMP-9

MMPs是一種Zn2+依賴性蛋白酶，首個(gè)MMP在1962年由Gross和Lapiere發(fā)現(xiàn)[42]，以潛在形式泌出，需要激活才能作用于細(xì)胞外基質(zhì)，可被MMP的組織抑制劑所抑制。MMPs存在于正常人體內(nèi)，參與傷口愈合、骨吸收、妊娠等過程，并且在腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中具有重要作用。MMPs根據(jù)功能可分為4種：基質(zhì)溶解素、間質(zhì)膠原酶、明膠酶和膜型基質(zhì)金屬蛋白酶[43]。MMPs在正常組織中不表達(dá)或呈低表達(dá)，在惡性腫瘤中呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與惡性腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[44]。

MMP-9又稱明膠酶B，是降解細(xì)胞外基質(zhì)的Ⅳ型膠原酶，可酶解細(xì)胞間基質(zhì)成分[43]。國(guó)內(nèi)正常人群血清MMP-9水平為24.52～36.41 ng/ml，平均30.47 ng/ml[45]。目前研究發(fā)現(xiàn)，許多腫瘤細(xì)胞都有MMP-9的異常表達(dá)，MMP-9在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移、惡性變中發(fā)揮重要作用[46]，其作用機(jī)制為：MMP-9能夠特異降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的Ⅳ型膠原；能夠以自分泌和旁分泌的形式，促進(jìn)細(xì)胞存活的能力或絲裂原素的活性，從而在腫瘤增殖中發(fā)揮重要作用；能夠降低腫瘤細(xì)胞之間的黏附性，使腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落，提高腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)能力，導(dǎo)致腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。MMP-9的表達(dá)水平還與結(jié)直腸癌的分化程度、臨床病理分期、生存期以及復(fù)發(fā)有相關(guān)性，將MMPs抑制劑應(yīng)用于腫瘤的臨床治療中，已取得了良好的效果，對(duì)MMP-9的深入研究將對(duì)臨床腫瘤的預(yù)防和早期診斷提供可靠的證據(jù)。

5　高遷移率族蛋白B1（HMGB1）

HMGB1是位于細(xì)胞核內(nèi)的非組蛋白核蛋白，由215個(gè)氨基酸殘基組成，含有兩個(gè)DNA結(jié)合端，編碼基因位于13號(hào)染色體長(zhǎng)臂12區(qū)上，主要由巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞主動(dòng)分泌，或者由壞死細(xì)胞釋放[47]。國(guó)內(nèi)正常人血漿HMGB1水平為0.53～1.39 ng/ml[48]。HMGB1能夠參與DNA的轉(zhuǎn)錄、重組以及修復(fù)，并且參與多種生物化學(xué)反應(yīng)過程，如炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等，能夠影響凝血、纖溶系統(tǒng)、血管內(nèi)皮功能，影響神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)與發(fā)育。在不同年齡及疾病發(fā)展的不同階段，HMGB1發(fā)揮的作用也不相同。釋放到細(xì)胞外環(huán)境中的HMGB1作為一個(gè)內(nèi)源性炎癥介質(zhì)發(fā)揮著重要功能，可以促進(jìn)TNF-α、IL-1β及其他炎癥介質(zhì)的釋放，同時(shí)可以影響腫瘤的微環(huán)境。

HMGB1與腫瘤密切相關(guān)，HMGB1的高表達(dá)可以使細(xì)胞獲得腫瘤表現(xiàn)而免于凋亡，并通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌等患者外周血或腫瘤組織內(nèi)HMGB1水平均明顯升高。HMGB1與多種腫瘤的發(fā)生、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移有關(guān)。利用重組人HMGB1刺激肝癌HepG2細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，HMGB1可通過促進(jìn)MMP-2、MMP-9和VEGF表達(dá)從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移[49]。HMGB1在胃腸道腫瘤中可通過NF-κB、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信號(hào)通路調(diào)節(jié)下游相關(guān)因子產(chǎn)生。

現(xiàn)已明確HMGB1與肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，HMGB1直接或間接參與了乙肝病毒相關(guān)性肝炎的發(fā)病。作為炎性介質(zhì)，HMGB1參與了早期肝組織損傷，早期炎性刺激介導(dǎo)HMGB1的釋放，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放TNF-α、IL-1等多種炎性介質(zhì)；HMGB1可通過上調(diào)PCNA、cyclin D1蛋白的表達(dá)，從而促進(jìn)肝癌細(xì)胞Hep G2的增殖轉(zhuǎn)化過程，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞失控性增殖[50]；組織缺氧環(huán)境下HMGB1可通過TLR4/RAGE信號(hào)通路產(chǎn)生IL-1β、IL-18等炎性介質(zhì)，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)肝癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移[51]。HMGB1還與腫瘤血管新生有關(guān)。HMGB1通過受體TLR2、TLR4、RAGE活化NF-κB，誘導(dǎo)促炎癥細(xì)胞因子和血管生成因子的生成，并可在體內(nèi)外促進(jìn)VEGF和血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）的表達(dá)，促進(jìn)血管生成；在體內(nèi)外使用HMGB1抗體都可以抑制血管生長(zhǎng)。

HMGB1在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和治療中具有雙重效應(yīng)，HMGB1在腫瘤發(fā)展的不同階段表現(xiàn)出不同的功能特征。一方面，HMGB1為促腫瘤因子，另一方面HMGB1還表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)作用，被抗腫瘤藥物處理的腫瘤細(xì)胞會(huì)分泌HMGB1，與TLR2、TLR4相互作用激發(fā)抗腫瘤免疫反應(yīng)，增強(qiáng)抗腫瘤藥物的療效。但如何利用好這一雙重功能還有賴于深入研究。

6　結(jié) 語

綜上所述，腫瘤是受多種基因、多種因素調(diào)控的疾病，隨著對(duì)腫瘤研究的不斷深入，人們逐漸意識(shí)到微環(huán)境與腫瘤之間的動(dòng)態(tài)相互干擾成為惡性腫瘤進(jìn)展的關(guān)鍵因素。腫瘤細(xì)胞的固有特性和腫瘤炎癥微環(huán)境中的各種因子均決定了腫瘤的轉(zhuǎn)移。微環(huán)境中多種炎性因子作用于腫瘤細(xì)胞，可以促進(jìn)腫瘤增殖；微環(huán)境中多種血管生成因子和抑制因子可以調(diào)控腫瘤新生血管的生成，參與腫瘤細(xì)胞的進(jìn)一步浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移；腫瘤患者術(shù)前輸血、手術(shù)中應(yīng)激反應(yīng)、術(shù)后感染性炎癥等因素均會(huì)使腫瘤微環(huán)境中的促炎gn 抗炎因子平衡被打破，這也是造成腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的不利因素，因此，對(duì)腫瘤微環(huán)境中生物活性物質(zhì)的質(zhì)和量上進(jìn)行干擾，可能成為免疫、炎癥以及腫瘤之間關(guān)系研究的新方向。

參考文獻(xiàn)

［1］Grivermikov SI, Greten FR, KarinM. Immunity, inflammation, and cancer[J]. Cell, 2010,140(6):83-99.

［2］Grivennikov SI, Karin M. Inflammation and oncogenesis: a vicious connection [J]. CurrOpin Genet Dev, 2010, 20 (1): 65-71.

［3］楊崇哲,劉豐,王妍,尚丹丹,譚文亮.慢性心功能不全患者血漿Chemerin的變化及臨床意義[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2013,11(22):1-4.

［4］Dutta K, Prasad P, Sinha D. Chronic low level arsenic exposure evokes inflammatory responses and DNA damage[J]. Intern J Hygiene Envir Health,2015, 218(6):654-574.

［5］Rivas MA, Carnevale RP, Proietti C J, Rosemblit C, Beguelin W, Salatino M, Charreau EH, Frahm I, Sapia S, Brouckaert P, Elizalde PV, Schillaci R. TNF alpha acting on TNFR1 promotes breast cancer growth via p42/P44 MAPK,JNK, Akt and NF-kappa B-dependent path ways [J]. Exp Cell Res, 2008,314(3): 509-529.

［6］趙文鵬,苗戰(zhàn)會(huì),路平,徐芬.TNF-a基因多態(tài)性與食管癌相關(guān)性的研究[J].中國(guó)醫(yī)療前沿,2010,5(7):6-8.

［7］Nabors LB, Suswam E, Huang Y, Yang X, Johnson MJ, King PH. Tumor necrosis factor alpha induces angiogenic factor upregulation in malignant glioma cells: a role for RNA stabilization and HuR[J].Cancer Res,2003,63(14):4181-4187.

［8］Wheelhouse NM, Chart YS, Gillies SE, Caldwell H, Ross JA, Harrison DJ, Prost S. TNF alpha induced DNA damage in primary murine hepatocytes[J]. Int J Mol Med, 2003,12(6):889-894.

［9］莫志銘.肝癌患者血清中細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α的表達(dá)及臨床特征相關(guān)性分析[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué),2011.

［10］Czepiel J, Biesiada G, Brzozowski T, Ptak-Belowska A, Perucki W, Birczynska M, Jurczyszyn A, Strzalka M, Targosz A, Garlicki A. The role of local and systemic cytokines in patients infected with Clostridium difficile[J]. J Physiol Pharmacol, 2014,65(5):695-703.

［11］Albanito L, Reddy CE, Musti AM. c-Jun is essential for the induction of Il-1beta gene expression in vitro activated Bergmann glial cells[J]. Glia,2011,59(12): 1879-1890.

［12］Dunne A, Carpenter S, Brikos C, Gray P, Strelow A, Wesche H, Morrice N, O'Neill LA. IRAK1 and IRAK4 promote phosphorylation, ubiquitination, and degradation of MyD88 adaptor-like (Mal) [J]. J Biol Chem, 2010，285(24): 18276 -18282.

［13］Oliveira FS, Carvalho NB, Brand?o AP, Gomes MT, de Almeida LA, Oliveira SC. Interleukin-1 receptor-associated kinase 4 is essential for initial host control of Brucella abortus infection[J]. Infect Immun, 2011,79(11): 4688-4695.

［14］Hagemann T, Biswas SK, Lawrence T, Sica A, Lewis CE.Regulation of macrophage function in tumors: the multifaceted role of NF-kappa B[J].Blood,2009, 113(14):3139-3146.

［15］Mauro C, Zazzeroni F, Papa S, Bubici C, Franzoso G.The NF-kappa B transcription factor pathway as a therapeutic target in cancer:methods for detection of NF-kappa B activity[J]. Methods Mol Bio,2009,512:169-207.

［16］李青春,梁淑娟,王雪凈,劉艷艷,王煥芹,張素華.AFP 啟動(dòng)子調(diào)控的小鼠IL-1β重組載體的構(gòu)建及其在肝癌H22細(xì)胞中的表達(dá)[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2009,25(7):603-605.

［17］Nazarenko I, Marhaba R, Reich E, Voronov E, Vitacolonna M, Hildebrand D, Elter E, Rajasagi M, Apte RN, Z?ller M. Tumorigenicity of IL-1alpha-and IL-1beta-deficient fibrosarcoma cells[J]. Neoplasia, 2008,10(6): 549-562.

［18］林志娟,梁淑娟,王煥芹,李艷平,肖偉玲.IL-1β對(duì)Hepal-6細(xì)胞增殖、遷移及IFN應(yīng)答的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2011,27(2):139-142.

［19］宋麗紅.塵肺病患者D-二聚體、纖維蛋白原檢測(cè)意義及與C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素6的相關(guān)性分析[D]. 青島：青島大學(xué),2014.

［20］Umare V, Pradhan V, Nadkar M, Rajadhyaksha A, Patwardhan M, Ghosh KK, Nadkarni AH. Effect of proinflammatory cytokines (IL-6, TNF-α, and IL-1β)on clinical manifestations in Indian SLE patients[J]. Mediators Inflammation,2014,Article ID 385297.

［21］Nakagawa H, Maeda S, Yoshida H, Tateishi R, Masuzaki R, Ohki T, Hayakawa Y, Kinoshita H, Yamakado M, Kato N, Shiina S, Omata M. Serum IL-6 levels and the risk for hepatocarcinogenesis in chronic hepatitis C patients: an analysis based on gender differences[J]. Int J Cancer, 2009, 125(10): 2264-2269.

［22］Wong VW, Yu J, Cheng AS, Wong GL, Chan HY, Chu ES, NgEK, Chan FK, Sung JJ, Chan HL. High serum interleukin-6 level predicts future hepatocellular carcinoma development in patients with chronic hepatitis B[J]. Int J Cancer, 2009, 124(12): 2766-2770

［23］Tang LP, Cho CH, Hui WM, Huang C, Chu KM, Xia HH, Lam SK, Rashid A, Wong BC, Chan AO. An inverse correlation between interleukin-6 and select gene promoter methylation in patients with gastric cancer[J]. Digestion, 2006，74(2)：85-90.

［24］Naugler WE, Karin M. The wolf in sheep's clothing: the role of interleukin-6 in immunity, inflammation and cancer[J].Trends Mol Med,2008, 14(3):109-119.

［25］姚環(huán).腦梗死動(dòng)脈周要硬化斑塊穩(wěn)定性與血漿MMP-9、. TGF-β1、TIMP-1表達(dá)相關(guān)性研究[D].長(zhǎng)沙：中南大學(xué),2014.

［26］Chen HN, Fan S, Weng CF. Down-regulation of TGF betal and leptin ameliorates thioacetamide-induced liver injury in lipopolysaccharide-primed rats[J]. J Endotoxin Res,2007,13(3):176-188.

［27］林國(guó)和,王俊,李書紅,王謹(jǐn),徐立,李升平.肝癌組織中TGF-β1表達(dá)與Treg浸潤(rùn)的關(guān)系及其臨床意義[J].癌癥,2010,29:442-447.

［28］解軍,牛勃,張悅紅,楊琦,王慧珍.TGF-β對(duì)原代培養(yǎng)細(xì)胞及肝癌細(xì)胞BEL-7401生長(zhǎng)作用的影響[J].中國(guó)藥物與臨床,2001,12(1):10-12.

［29］Senger DR, Galli SJ, Dvorak AM, Perruzzi CA, Harvey VS, Dvorak HF. Tumour cells secrete a vascular permeability factor that promotes accumulation of ascites fluid[J]. Science, 1983,219:983-985.

［30］王博,劉群.腦出血患者血清Hpa、VEGF動(dòng)態(tài)變化的臨床研究[D].吉林：吉林大學(xué),2014.

［31］Lee KM， Park SH, Park KS, Hwang JH, Hwang SK. Analysis of circulating endostatin and vascular endothelial growth factor in patients with pituitary adenoma treated by stereotactic radiosurgery: a preliminary study [J]. Brain Tumor Res Treat,2015,3(2):89-94.

［32］Ernens I, Leonard F, Vausort M, Rolland-Turner M, Devaux Y, Wagner DR. Adenosine up-regulates vascular endothelial growth factor in human macrophages[J]. Biochem Biophys Res Commun,2010,39(2):351-356.

［33］Morbidelli L, Pyriochou A, Filippi S, Vasileiadis I, Roussos C, Zhou Z, Loutrari H, Waltenberger J, St?ssel A, Giannis A, Ziche M, Papapetropoulos A.The soluble guanylyl cyclase inhibitor NS-2028 reduces vascular endothelial growthfactor-induced angiogenesis and permeability[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol, 2010, 298(3): R824-R832

［34］Ren Z, Wang Y, Jiang W, Dai W, Jiang Y. Anti-tumor effects of a novel soluble recombinant human endostatin: administered as a single agent or in combination with chemotherapy agents in mouse tumor models[J]. PloS One,2014,9(9):2837-2842.

［35］Schoenleber SJ, Kurtz DM, Talwalkar JA, Roberts LR, Gores GJ. Prognostic role of vascular endothelial growth factor in hepatocellular carcinoma: systematic review and metaanalysis[J]. British Journal of Cancer,2009,100(9):1385-1392.

［36］宋景春,林兆奮,王湞,楊洋,陳自力.應(yīng)用血清RANTES診斷嚴(yán)重膿毒癥及預(yù)后判斷的價(jià)值評(píng)價(jià)[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2014,8(13):2424-2427.

［37］Naumnik B, Koc-Zórawska E, Mysliwiec M. Overdialysis plasma RANTES increase depends on heparin dose and cardiovascular disease status[J]. Advances Med Sci,2013,58(2):311-319.

［38］Patsouras MD, Sikara MP, Grika EP, Moutsopoulos HM, Tzioufas AG, Vlachoyiannopoulos PG. Elevated expression of platelet-derived chemokines in patients with antiphospholipid syndrome[J]. J Autoimmunity,2015,65:30-37.

［39］Jay A, Levy. The Unexpected pleiotropic activities of RANTES[J]. J Immunol,2009,182(7):314-324.

［40］Bacon KB, Premack BA, Gardner P, Schall TJ. Activation of dual T cell signaling pathways by the chemokine RANTES[J]. Science,1995, 269(5231):1727 -1730.

［41］劉寧,江娜,羅娜,喬桂芳,孫煥芹,劉金花,張永宏.RANTES、MIP-1α、MIP-1β和MCP-1趨化因子在慢性肝病患者的水平[J].北京醫(yī)學(xué),2014,36(6):426-428.

［42］Gross J, Lapiere CM. Collagenolytic activity in amphibian tissues: a tissue culture assay[J].Proc Natl Acad Sci USA, 1962,48(6):1014-1022.

［43］Zitka O, Kukacka J, Krizkova S, Huska D, Adam V, Masarik M, Prusa R, Kizek R. Matrix metalloproteinases[J]. Curr Med Chem, 2010, 17(31):3751-3768.

［44］Velinov N, Poptodorov G, Gabrovski N, Gabrovski S.The role of matrixmetallo -proteinases in the tumor growth and metastasis[J]. Khirurgiia(Sofiia), 2010,(1):44-49.

［45］Lin Y, Wang JF，Gao GZ, Zhang GZ, Wang FL, Wang YJ. Plasma levels of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 correlate with diagnosis and prognosis of glioma patients[J]. Chin Med J,2013,126 (22):4295-4299.

［46］Bendardaf R, Buhmeida A, Hilska M, Laato M, Syrj?nen S, Syrj?nen K, Collan Y, Pyrh?nen S. MMP-9( gelatinase B ) expression is associated with disease-free survival and diseasespecific survival in colorectal cancer patients[J]. Cancer Invest,2010, 28(1):38-43.

［47］Tang D, Shi Y, Kang R, Li T, Xiao W, Wang H, Xiao X. Hydrogen peroxide stimulates macrophages and monocytes to actively release HMGB1[J].J Leukoc Biol,2007,81(3):741-747.

［48］Wang C, Gou SJ, Chang DY, Yu F, Zhao MH, Chen M. Association of circulating level of high mobility group box 1 with disease activity in antineutrophil cytopsmic autoantibody–associated vasculitis[J]. Arthritis Care Research, 2013,65(11):1828-1834.

［49］楊超,孫航,吳傳新.HMGB1在肝臟炎癥環(huán)境及肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2015,40(2):159-162.

［50］賀新春,范學(xué)工,劉洪波,周蓉蓉. 小干擾RNA干擾高遷移率族蛋白1對(duì)HepG2細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J].中華肝臟病雜志,2010,18(5):361-365.

［51］Yan W, Chang Y, Liang X, Cardinal JS, Huang H, Thorne SH, Monga SP, Geller DA, Lotze MT, Tsung A. High mobility group box 1 activates caspase-1 and promotes hepatocellular carcinoma invasiveness and metastases[J]. Hepatology, 2012,55(6):1863-1875.

DOI:10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2016. 01. 021

基金項(xiàng)目：解放軍總醫(yī)院科技創(chuàng)新苗圃基金（15KMM34）

通訊作者：汪德清，主任醫(yī)師（E-mail:deqingw@vip.sina.com）

收稿日期：（2015-12-10）