SYSMEX XN-1000血球儀在腦脊液和胸腹水白細胞計數(shù)中的可行性探討

葉小英，范春麗，陸敏，卞潔

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 昆山 215300)

SYSMEX XN-1000血球儀在腦脊液和胸腹水白細胞計數(shù)中的可行性探討

葉小英，范春麗，陸敏，卞潔

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 昆山 215300)

目的 探討SYSMEX XN-1000血液分析儀(簡稱SYSMEX XN-1000)的體液模式在腦脊液和胸腹水白細胞計數(shù)中應用的可行性。方法分別采用手工顯微鏡鏡檢法和SYSMEX XN-1000對183例腦脊液和胸腹水標本進行白細胞計數(shù)，將所測結果按A：(0～1 000)×106/L，B：(1 001～5 000)×106/L，C：＞5 000×106/L分為三組，分別進行統(tǒng)計學分析。結果與手工顯微鏡鏡檢法相比，SYSMEX XN-1000所測結果差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。A、B、C三組的相關系數(shù)分別為0.993、0.984、0.996，A組回歸方程為y=1.007x-1.072，B組回歸方程為y=1.003x+ 19.776，C組回歸方程為y=1.241x-1419.365。結論SYSMEX XN-1000血液分析儀可用于臨床腦脊液和胸腹水中白細胞計數(shù)，其操作簡單易行，結果穩(wěn)定可靠，但如果儀器進行樣品檢測時報警，應當手工鏡檢復核，以提高結果的準確性和可靠性。

SYSMEX XN-1000血球儀；體液模式；胸水；腹水；腦脊液；白細胞計數(shù)

腦脊液和胸腹水中白細胞計數(shù)對疾病的診斷和治療具有很大的臨床意義，目前其參考方法仍為手工顯微鏡鏡檢法[1]，但其操作繁瑣費時，技術熟練程度要求高，不適應當前日益增多的標本檢測，影響了臨床醫(yī)生對患者病情的診斷和分析[2]。近年來我院引進的SYSMEX XN-1000血球分析儀具有專門的體液模式(BF模式)，可以進行胸腹水和腦脊液的白細胞分析，筆者利用SYSMEX XN-1000血球分析儀進行胸腹水和腦脊液的白細胞計數(shù)，以手工鏡檢法為參考方法，探討其檢測結果的可行性。

1 材料與方法

1.1 標本來源 183例標本均來源于2014年5月1日至2014年12月31日在我院住院患者，排除有凝塊標本，其中胸水95例，腹水29例，腦脊液59例；年齡16～91歲，平均57.13歲。采集標本均以EDTA-K2抗凝，在標本送檢后2 h內完成測定[3]。

1.2 儀器及試劑 SYSMEX XN-1000血球分析儀及配套試劑均由日本SYSMEX公司提供，Olympus光學顯微鏡(日本奧林巴斯公司生產)，改良牛鮑計數(shù)板(江蘇鹽城錦輝玻璃儀器廠生產)，1%冰醋酸及20μl微量吸管(江蘇泰興市諾金醫(yī)療器械廠生產)，EDTA-K2真空抗凝管。

1.3 方法

1.3.1 手工計數(shù) 所有的標本均由高資歷經驗豐富的檢驗人員嚴格按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[4]中體液細胞計數(shù)的操作要求進行分析，每份標本均測定兩次，結果取平均值[5]。

1.3.2 儀器計數(shù) 測定前將SYSMEX XN-1000血液分析儀的進樣分析模式改為體液模式，待儀器模式調整完畢后將標本充分混勻放入儀器內進行檢測，每份標本測定兩次，結果取平均值。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0軟件進行配對t檢驗和線性回歸分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義，采用Kappa檢驗進行一致性分析。

2 結 果

183例標本分別用手工鏡檢法和儀器法進行細胞計數(shù)，以手工鏡檢結果為參考標準，將結果按A (0～1 000)×106/L、B(1 001～5 000)×106/L、C＞5 000×106/L三個梯度將標本分為三組進行統(tǒng)計學分析。結果見表1和表2。另按標本類型區(qū)分為腦脊液標本和漿膜腔標本[4]，漿膜腔積液按＜100×106/L區(qū)分滲出液和非滲出液[4]，非滲出液視為異常標本，按標本類型分組進行統(tǒng)計學分析，漿膜腔標本K=0.792，P＜0.001，腦脊液標本K=0.567，P＜0.001，結果顯示不同類型的標本用兩種方法的檢查結果存在一致性，見表3。

表1 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法結果相關性比較

表2 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法均值和標準差比較

表3 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法測定不同類型標本的一致性比較

3 討 論

手工顯微鏡鏡檢法仍為當前腦脊液和胸腹水細胞計數(shù)公認的參考方法[6]。但由于該法對檢驗人員的技術和熟練程度要求高，操作費時繁瑣，且由于各大醫(yī)院的相關檢驗標本量增長迅速，使得其可行性下降[7]。目前已有不少文章報道了各型號全自動血液分析儀在腦脊液和胸腹水細胞計數(shù)的應用研究，其結果得到了檢驗人員的認同。筆者比較了SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法結果，顯示兩方法相比A、B、C三組結果P值均大于0.05，差異無統(tǒng)計學意義，相關性良好，同時檢測了兩方法的一致性比較，證明具有良好的一致性，可以替代手工顯微鏡鏡檢法，該實驗結果與Fleming等[8]的研究結果具有一致性。

SYSMEX XN-1000血液分析儀是采用電阻抗法的工作原理，脈沖次數(shù)代表了細胞數(shù)，次數(shù)越多計數(shù)的細胞數(shù)就越多，脈沖幅度表示細胞體積的大小，幅度越大，細胞體積越大。它以激光為光源，經分色鏡后分為3束光，側向光主要是檢測核酸和細胞器的種類和多少，側向散射光測定細胞內部信息，前向散射光測定細胞大小信息?；谶@些特點，它能準確的對細胞進行分類和計數(shù)[9]。SYSMEX XN-1000血液分析儀具有專門的體液（BF）模式，測定細胞時使用WDF通道，可計數(shù)WBC-BF、單個核細胞、多個核細胞及其百分比。其相對于手工顯微鏡鏡檢法具有以下幾個優(yōu)點：①反應速度快，節(jié)省時間，從將樣本充分混勻后放入儀器中測定到接收測定結果(包括細胞總數(shù)及分類)總時間不超過2 min。②BF模式下WDF通道測定時所需樣本分析量為199μl，實際計數(shù)的白細胞值為101 810個，手工鏡檢采用牛鮑計數(shù)板法，分析量為1μl，如細胞量多還需將其用冰醋酸稀釋，增加了誤差的產生，儀器法使用的樣本分析量遠遠多于手工顯微鏡鏡檢法，增加了檢測結果的準確性和可靠性。③儀器法在對細胞計數(shù)的同時還將細胞精確分類，節(jié)省了人工染色涂片計數(shù)分類時間。④與手工法相比，操作簡單方便，降低了檢驗人員對細胞手工計數(shù)熟練程度的要求，任何只要能操作SYSMEX XN-1000血液分析儀的人都能準確的得到結果。⑤儀器分析的同時提供細胞的散點圖，可以排除標本中可能的間皮細胞和腫瘤細胞等干擾物質，提高了結果的準確性。⑥與手工法相比結果更穩(wěn)定，重復性更好，精密度更高。手工法因檢驗人員對牛鮑計數(shù)板使用的熟練程度的不同和對細胞認識的不同，其計數(shù)結果可能有很大的差異，精密度和準確度都不如儀器法。⑦提高了生物安全，降低了工作人員職業(yè)暴露的危險性。但目前該儀器BF模式只能區(qū)分白細胞的單個核和多個核，可能滿足不了某些疾病的臨床診斷，對于有凝塊標本本儀器不能適用，其凝塊有可能會導致儀器通道堵塞。

綜上所述，SYSMEX XN-1000血液分析儀可用于腦脊液和胸腹水的細胞計數(shù)，其操作簡單迅速，結果準確可靠，重復性好，但是仍不能取代顯微鏡鏡檢法，當儀器報警計數(shù)結果明顯異常時應手工計數(shù)復檢，提高結果的準確性和可靠性[10]，實際工作中應兩者相互結合。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Reference leukocyte(WBC)differential count(proportional)and evaluation of instrumental methods[S].H20-A,NCCLS,1992.

[2]溫小梅,孫嘉峰.SYSMEX XE-5000血細胞分析儀用于體液白細胞計數(shù)及分類的評價[J].福建醫(yī)藥雜志,2014,36(3):91-92.

[3]王剛,張延京.胸腹水有核細胞計數(shù)XE-5000全自動血液分析儀與手工法檢測比較[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2013,12(6):441-442.

[4]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:312-317.

[5]沈軍,陳因,王國鎮(zhèn),等.自動血細胞分析儀體液模式對腦脊液白細胞計數(shù)及分類檢測的能力評估[J].中華血液學雜志,2013,34(7): 629-631.

[6]鐘樹奇,鄧秋萍,梁敏華,等.不同方法在胸腹水細胞成分檢測中的應用價值[J].海南醫(yī)學,2014,25(2):218-220.

[7]程雪,李克,陳安輝,等.自動分析儀在腦脊液和胸腹水細胞計數(shù)中的應用研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2013,34(17):2309-2310.

[8]Fleming C,Brouwer R,Lindemans J,et al.Validation of the body fluid module on the new Sysmex XN-1000 for counting blood cells in cerebrospinal fluid and other body fluids[J].Clin Chem Lab Med, 2012,50(10):1791-1798.

[9]陳廣紅.Sysmex XN-1000全自動血細胞分析儀嗜酸性粒細胞計數(shù)性能的評價[J].中國保健營養(yǎng),2013,12(上):7491.

[10]de Jonge R,Brouwer R,van Rijin M,et al.Automated analysis of pleural fluid and differential leukocyte counts with Sysmex XE-2100 [J].Clin Chem Lab Med,2006,44(11):1367-1371.

Feasibility study of white blood cell count in cerebrospinal fluid and hydrothorax and ascites with Sysmex XN-1000 hematology analyzer.

YE Xiao-ying,FAN Chun-li,LU Min,BIAN Jie.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Kunshan,Kunshan 215300,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo analyze the feasibility of using body fluid module of Sysmex XN-1000 hematology analyzer for white blood cell count in the cerebrospinal fluid(CSF),hydrothorax and ascites.MethodsMicroscope method and Sysmex XN-1000 hematology analyzer were used to analyze 183 samples of CSF,hydrothorax and ascites at the same time.The measured results were divided into three groups:group A:0～1 000×106/L,B:1 001～5 000×106/L, C:＞5 000×106/L.The results were statistically analyzed.ResultsCompared with the results of microscope,the results of Sysmex XN-1000 hematology analyzer showed no statistically significant difference(P＞0.05).The correlation coefficients of group A,B,C were 0.993,0.984,0.996,with the regression equation of y=1.007x-1.072,y=1.003+19.776x,y= 1.241-1 419.365x,respectively.ConclusionThe body fluid module of Sysmex XN-1000 hematology analyzer can be used for white blood cell count in clinical CSF and hydrothorax and ascites,with simple operation and reliable results. When the instrument is alarmed on the sample test,we should use manual microscopy review to improve the veracity and reliability of the results.

Sysmex XN-1000 hematology analyzer;Body fluid module;Hydrothorax;Ascites;Cerebrospinal fluid(CSF);White blood cell count

R446.11+3

A

1003—6350（2016）06—0955—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.06.034

2015-09-16)

葉小英。E-mail：fengling1cn@sina.com