淡水和半咸水條件下中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的形態(tài)特征與數量分布

趙 峰，楊 剛，張 濤，王 妤，莊 平

（中國水產科學研究院東海水產研究所，長江口漁業(yè)生態(tài)重點實驗室上海 200090）

淡水和半咸水條件下中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的形態(tài)特征與數量分布

趙 峰，楊 剛，張 濤，王 妤，莊 平

（中國水產科學研究院東海水產研究所，長江口漁業(yè)生態(tài)重點實驗室上海 200090）

為了探討中華鱘幼魚進入長江口半咸水環(huán)境后，滲透壓適應調節(jié)過程中鰓上皮泌氯細胞的適應性變化，將幼魚在淡水（鹽度0）和半咸水（鹽度15）兩種條件下馴養(yǎng)60 d，利用光鏡和掃描電鏡技術對比分析鰓上皮泌氯細胞的形態(tài)、分布與數量特征。結果表明：幼魚鰓上皮泌氯細胞主要集中分布于鰓小片基部和鰓小片之間的鰓絲上，細胞略呈橢圓形。半咸水條件下，幼魚鰓絲上皮泌氯細胞數量和大小顯著增加，鰓小片上皮泌氯細胞數量則未發(fā)生改變，但細胞大小顯著增加；而鰓絲和鰓小片上皮泌氯細胞的形態(tài)在淡水和半咸水中均未發(fā)生顯著變化。掃描電鏡觀察發(fā)現，鰓絲上皮泌氯細胞頂膜開口的形態(tài)分為3種類型：Ⅰ型，突起型；Ⅱ型，凹陷型；Ⅲ型，深洞型。淡水條件下，頂膜開口形態(tài)多為Ⅰ型和Ⅱ型，未發(fā)現Ⅲ型存在；而半咸水條件下，頂膜開口形態(tài)以Ⅲ型為主，Ⅰ型與Ⅱ型也有少量分布。

中華鱘；泌氯細胞；形態(tài)特征；數量分布；頂膜開口；形狀因子；滲透調節(jié)

鰓是魚類進行滲透壓調節(jié)的主要器官，鰓上皮泌氯細胞在離子轉運和維持體內滲透平衡方面發(fā)揮著重要作用［1］。泌氯細胞主要位于鰓絲上皮內，少量分布在鰓小片上［1］。廣鹽性硬骨魚類由低滲的淡水轉入高滲的海水過程中，鰓上皮泌氯細胞的形態(tài)、分布、數量及內部結構均發(fā)生明顯的適應性改變，以排出過量的Cl－離子，從而維持體內滲透平衡，適應高滲環(huán)境［1－2］。有研究表明，納氏鱘（Acipenser naccarii）［3－6］、墨西哥灣鱘（A.oxyrinchus dsotoi）［7］、中吻鱘（A.medirostris）［8］、施氏鱘（A.schrenckii）［9－10］、歐鰉（Huso huso）［11］等鱘類在鹽度刺激下，鰓上皮泌氯細胞形態(tài)結構及數量也會發(fā)生改變，但不同種間存在著一定差異。

中華鱘（A.sinensis）生活史中數次歷經淡水和海水生活環(huán)境，是典型的江海洄游性魚類。每年10～11月性成熟的中華鱘由東海經長江口溯河洄游至長江中上游繁殖產卵，孵出的仔、稚魚順流而下，第二年5月末至6月初，中華鱘幼魚到達長江口水域進行攝食肥育和入海洄游前的生理適應與調節(jié)［12］，尤其是滲透壓的調節(jié)與適應。HE等［13］、趙峰等［14－16］、封蘇婭等［17］研究發(fā)現，中華鱘幼魚與其它廣鹽性硬骨魚類一樣具有類似的滲透壓及離子調節(jié)規(guī)律，但對鰓上皮泌氯細胞的相關研究僅見吳貝貝等［18］進行過免疫定位的研究報道。本研究利用光鏡和電鏡技術，比較分析了中華鱘幼魚在淡水和半咸水條件下鰓上皮泌氯細胞的形態(tài)、分布與數量特征，旨在為深入開展中華鱘滲透壓調節(jié)機制研究提供基礎素材，豐富魚類生理學資料。

1 材料與方法

1.1 實驗魚及馴養(yǎng)

實驗用中華鱘幼魚于2013年7月取自長江口淡水水域（23 mOsm·kg－1），平均體長（38.41 ±1.31）cm，平均體質量（190.73±18.55）g。實驗前將中華鱘幼魚在直徑2 m的圓形玻璃鋼養(yǎng)殖桶內暫養(yǎng)，暫養(yǎng)2周后，挑選規(guī)格整齊的幼魚各6 ind分別置于淡水和半咸水（鹽度15，440 mOsm·kg－1；除氯自來水與濃縮海水配制而成）中馴化養(yǎng)殖60 d。

實驗及暫養(yǎng)期間，每2 d換水一次，每次換水30%，保持水體溶解氧不低于6 mg·L－1，水溫（24±1）℃，pH 7.5～7.7，自然光照。每天按體質量的1.5%分早晚2次進行飼料投喂，并根據實驗魚攝食情況進行調整，以投喂后15～20 min吃完為宜。實驗過程中，淡水和半咸水（鹽度15）組均未發(fā)生死亡。

1.2 樣品制備

從淡水和半咸水組中分別選取3 ind中華鱘幼魚，用足量MS-222（Argent，Redmond，WA，USA）麻醉后，立即剪取右側第二鰓弓上鰓絲6～8枚，分別用Bouin氏液和2.5%戊二醛固定，置于4℃冰箱保存。

光鏡樣品制備：將Bouin氏液固定的樣品進行酒精梯度脫水，經水楊酸甲酯透明后將單個鰓絲石蠟包埋，切片，切片厚度為5μm，H.E染色，用Olympus CX41顯微鏡觀察拍照。

掃描電鏡樣品制備：將2.5%戊二醛固定的樣品進行如下處理：PBS（0.1 mol·L－1，pH 7.4）沖洗3次，每次15 min；用2%鋨酸PBS（pH 7.4）固定1.5 h；PBS（0.1 mol·L－1，pH 7.4）沖洗2次，每次5 min；不同濃度酒精（30%—50%—70%—80%—90%—95%—100%Ⅰ—100%Ⅱ）逐級脫水，每次10 min；醋酸異戊酯轉換，常規(guī)臨界點干燥，真空離子鍍膜；采用Hitachi S-4800掃描電子顯微鏡觀察、拍照。

1.3 數據分析

用IPP 6.0軟件（Media Cybernetics，USA）分別統計分析淡水組和半咸水組中華鱘幼魚鰓絲（包含鰓小片基部）和鰓小片上的泌氯細胞數量、面積和形狀因子，每尾魚隨機取10個鰓絲，共計30個鰓絲（n＝30）。泌氯細胞計數為每100μm鰓絲或鰓小片上的泌氯細胞個數，細胞形狀因子由4πA/P2求得（A為細胞面積，P為細胞周長），細胞形狀因子接近1表明細胞呈圓形，若小于1則表明細胞呈橢圓形［18］。

實驗數據以平均值±標準差（means±SD）表示，利用STATISTICA 6.0統計軟件中的獨立樣本t檢驗（student’st-test）比較淡水與半咸水組之間差異的顯著性，P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 泌氯細胞形態(tài)、分布與數量

中華鱘幼魚鰓絲顯微結構見圖1。鰓小片呈扁平囊狀，垂直分布于鰓絲兩側。鰓絲和鰓小片均被特化的多層或單層上皮層所覆蓋，上皮層由扁平細胞、泌氯細胞等不同類型細胞組成。泌氯細胞相對較大，為嗜酸性細胞，具有圓形細胞核（圖1-a，b）。

圖1 淡水（a）和半咸水（b）馴養(yǎng)中華鱘幼魚的鰓絲顯微圖片Fig.1 Lightmicrograph of gills in juvenile Acipenser sinensis adapted to freshwater（a）and brackish water（b）

淡水條件下，鰓上皮泌氯細胞集中分布于鰓小片基部及鰓小片之間的鰓絲上，顯著高于鰓小片泌氯細胞數量（P＜0.05；圖1，表1），但鰓絲與鰓小片上泌氯細胞的平均表面積沒有顯著性差異（P＞0.05；表1）。從表1可以看出，泌氯細胞形狀因子小于1，說明泌氯細胞略呈橢圓形，鰓絲和鰓小片上泌氯細胞形態(tài)不存在顯著性差異（P＞0.05），而且大小也基本一致（P＞0.05）。

半咸水馴養(yǎng)60 d后，鰓小片基部及鰓小片之間鰓絲上泌氯細胞數量顯著增加（P＜0.05；表1），但鰓小片上泌氯細胞數量未呈現顯著差異（P＞0.05）。與淡水組相比，無論是鰓絲還是鰓小片泌氯細胞的平均表面積也顯著增加（P＜0.05），而細胞形態(tài)未呈現顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 泌氯細胞頂膜開口形態(tài)

泌氯細胞頂膜開口位于扁平細胞邊緣（圖2），通過頂膜開口泌氯細胞與胞外環(huán)境相連。泌氯細胞頂膜開口位于鰓絲上皮血管輸入端平坦區(qū)域和邊緣，極少出現在上皮層血管輸出端。

按照泌氯細胞頂膜開口的形態(tài)和大小，可以將中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞頂膜開口大致分為3種類型：Ⅰ型，突起型，呈橢圓形，直徑一般在2～3μm，表面具有大量突起的微絨毛（圖2-i）；Ⅱ型，凹陷型，略呈三角形，直徑一般在2 μm以內，表面粗糙具有許多顆粒呈凹陷狀（圖2-ii）；Ⅲ型，深洞型，狹長而深陷，直徑1μm左右，表面具有許多細小顆粒（圖2-iii）。

比較分析發(fā)現，淡水組中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞頂膜開口類型主要為Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型占絕大部分，少量Ⅱ型出現，未發(fā)現泌氯細胞頂膜Ⅲ型開口（圖2-a）。而半咸水組中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞頂膜開口以Ⅲ型為主，也有少量Ⅰ型和Ⅱ型出現（圖2-b）。

3 討論

鰓上皮泌氯細胞是進行離子調節(jié)的主要場所，在魚類滲透壓調節(jié)方面發(fā)揮著重要功能［1－2，18］。泌氯細胞的形態(tài)結構、分布和數量會隨著生活環(huán)境滲透壓條件的改變而發(fā)生適應性變化，但不同種類間存在著一定差異［2］。一般來講，廣鹽性硬骨魚類在適應高滲或低滲環(huán)境時，鰓上皮泌氯細胞的分布呈現3種類型：（1）無論淡水或海水馴化時，泌氯細胞僅分布在鰓絲上皮內；（2）海水高滲環(huán)境時，泌氯細胞分布在鰓絲上皮內，但經淡水低滲環(huán)境馴化，泌氯細胞在鰓小片上皮內也會有分布；（3）無論淡水或海水馴化，鰓絲和鰓小片上皮內均有泌氯細胞分布［2］。本研究發(fā)現，無論是在淡水還是半咸水馴化后，中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞主要分布在鰓絲上，也有少量分布在鰓小片上?？梢姡腥A鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的分布屬于第3種類型，與在納氏鱘［3－6］、墨西哥灣鱘［7］、中吻鱘［8］、施氏鱘［9－10］和歐鰉［11］等鱘類的研究結果一致。FOSKETT等［19］研究發(fā)現，鰓絲上泌氯細胞較大，主要起離子外排作用，而鰓小片上泌氯細胞較小，主要起離子吸收作用。本研究中，發(fā)現中華鱘幼魚鰓絲上皮泌氯細胞要大于鰓小片上的泌氯細胞，這與洄游性大麻哈魚（Oncorhynchus keta）［20］和馬蘇大麻哈魚（O.masou）［21］及美洲鰣（Alosa sapidissima）［22］的研究結果類似。

胞內大量的Na＋，K＋-ATPase是泌氯細胞進行離子轉運的重要能量來源，通常廣鹽性魚類鰓上皮泌氯細胞數量和體積會隨著鹽度增高而增加，為適應高滲環(huán)境提供更多動力［1－2，23］。半咸水條件下，中華鱘幼魚鰓絲上皮泌氯細胞明顯增多且體積增大，這與ALTINOK等［7］在墨西哥灣鱘、CARMONA等［3］在納氏鱘和ZHAO等［9］在施氏鱘中觀察到的結果一致；中華鱘幼魚鰓小片上泌氯細胞個體盡管有所增大但數量未發(fā)生改變，而CATALDI等［4］和MCKENZIE等［5］卻發(fā)現納氏鱘進入高滲環(huán)境時鰓小片泌氯細胞呈現下降趨勢。通常廣鹽性魚類進入高滲環(huán)境時，鰓小片上泌氯細胞會消失，可能是因為高滲條件下不需要主動吸收離子所致［24］。這種中華鱘幼魚與其它鱘類研究中鰓小片泌氯細胞變化的差異，可能與鱘的種類和規(guī)格大小有關，也可能與馴化鹽度及時間等有關。自然條件下，由于長江口受到徑流和潮汐的作用，中華鱘幼魚棲息水域鹽度變化較大（在0～15之間）［12］，鰓上皮泌氯細胞的這種變化可能是中華鱘幼魚對長江口波動鹽度環(huán)境的適應性表現，也可能存在著獨特的調節(jié)機制，需要進一步對中華鱘幼魚在長江口棲息水域的滲透調節(jié)生理進行持續(xù)深入研究。

表1 中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的數量、面積及形狀因子Tab.1 Number，area and shape factor of branchial chloride cells of juvenile Acipenser sinensis

圖2 中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的頂膜開口形態(tài)（a.淡水組；b.半咸水組；i、ii、iii：分別為I型、II型、III型3種頂膜開口類型的放大圖）Fig.2 Apical opening morphology of brachial chloride cells in juvenile Acipenser sinensis（a.freshwater group；b.brackish water group；i，ii，iii：magnification of three types of chloride cell apical opening）

胞外環(huán)境通過泌氯細胞頂膜開口被感知，從而刺激泌氯細胞結構改變、調整離子轉運功能以適應外部環(huán)境變化；進而，頂膜開口形態(tài)也可以反映泌氯細胞形態(tài)功能的改變［2］。1996年，LEE等［25］率先開展了不同鹽度下莫桑比克羅非魚（Oreochromismossambicus）鰓上皮泌氯細胞頂膜形態(tài)與功能相關研究，將泌氯細胞頂膜開口劃分為3種類型，即突起型（Ⅰ型）、凹陷型（Ⅱ型）和深洞型（Ⅲ型）。這一結果CHOI等［26］在后續(xù)研究中也予以了證實，然而FRIDMAN等［27］發(fā)現在尼羅羅非魚（O.niloticus）中除上述3種類型外，還具有第4種類型，可能為Ⅲ型的過渡類型。本研究發(fā)現，中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞頂膜開口也呈現上述3種類型，其中淡水中存在Ⅰ型和Ⅱ型；半咸水中以Ⅲ型為主，Ⅰ型和Ⅱ型也有分布；與上述研究基本一致。研究證實，具有Ⅰ型和Ⅲ型頂膜開口的泌氯細胞分別在Cl－的吸收和外排中發(fā)揮重要作用［28－30］，而具有Ⅱ型頂膜開口的泌氯細胞主要功能是吸收Ca2＋［31］。從本研究來看，高滲條件下中華鱘幼魚鰓上皮Ⅲ型頂膜開口的泌氯細胞代替了低滲條件下的I型頂膜開口的泌氯細胞，泌氯細胞形態(tài)結構發(fā)生了改變，其功能也從Cl－的吸收轉變?yōu)橥馀?，進行離子和滲透壓調節(jié)，從而適應高滲環(huán)境。中華鱘幼魚鰓上皮泌氯細胞的超微結構變化還需要進一步研究，以證實其是否存在著不同類型，或鹽度刺激下其結構發(fā)生怎樣的改變。

綜上，鰓絲上皮泌氯細胞數量增多、體積增大和泌氯細胞頂膜開口形態(tài)發(fā)生改變是中華鱘幼魚進行滲透壓調節(jié)、維持滲透平衡的結構基礎，是其適應長江口半咸水環(huán)境及入海洄游而作出的適應性調整，這些結果可為深入研究中華鱘滲透壓調節(jié)機制奠定基礎，豐富鱘類基礎生物學資料。

［1］ EVANSD H，PIERMARINIPM，CHOE K P.The multifunctional fish gill：dominant site of gas exchange，osmoregulation，acid-base regulation，and excretion of nitrogenous waste［J］.Physiological Review，2005，85（1）：97－177.

［2］ HWANG P P，LEE T H.New insights into fish ion regulation and mitochondrion cells［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，2007，148A（3）：479－497.

［3］ CARMONA R，GARCIA-GALLEGO M，SANZ A，et al.Chloride cells and pavement cells in gill epithelia ofAcipenser naccarii：ultrastructure modifications in seawater-acclimated specimens［J］.Journal of Fish Biology，2004，64（2）：553－566.

［4］ CATALDIE，CICCOTTIE，DIMARCO P，et al. Acclimation trials of juvenile Italian sturgeon to different salinities：morpho-physiological descriptors［J］.Journal of Fish Biology，1995，47（4）：609－618.

［5］ MCKENZIE D J，CATALDI E，DIMARCO P，etal.Some aspects of osmotic and ionic regulation in Adriatic sturgeonAcipenser naccariiⅡ：morphophysiological adjustments to hyperosmotic environments［J］.Journal of Applied Ichthyology，1999，15（2）：61－66.

［6］ MARTINEZ-ALVAREZ R M，SANZ A，GARCIAGALLEGOM，etal.Adaptive branchialmechanisms in the sturgeonAcipenser naccariiduring acclimation to saltwater［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，2005，141A（2）：183－190.

［7］ ALTINOK I，GALLI SM，CHAPMAN F A.Ionic and osmotic regulation capabilities of juvenile Gulf of Mexico sturgeon，Acipenser oxyrinchus desotoi［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，1998，120A（4）：609－616.

［8］ ALLEN P J，CECH J J，KULTZ D.Mechanisms of seawater acclimation in a primitive，anadromous fish，the green sturgeon［J］.Journalof Comparative Physiology，2009，179B（7）：903－920.

［9］ ZHAO F，ZHUANG P，ZHANG L Z，et al.Changes in growth and osmoregulation during acclimation to saltwater in juvenile Amur sturgeonAcipenser schrenckii［J］.Chinese Journal of Oceanology and Limnology，2010，28（3）：603－608.

［10］ 侯俊利，陳立僑，莊 平，等.不同鹽度馴化下施氏鱘幼魚鰓泌氯細胞結構的變化［J］.水產學報，2006，30（3）：316－322.

HOU J L，CHEN L Q，ZHUANG P，et al.Structural changes of chloride cells in gills epithelia of juvenileAcipenser schrenckiiacclimated to various salinities［J］.Journal of Fisheries of China，2006，30（3）：316－322.

［11］ KRAYUSHKINA LS，KISELEVASG，MOISEYENKOS N.Functional changes in the thyroid gland and the chloride cells of the gills during adaptation of the young Beluga sturgeon Huso huso to a hypertonic environment［J］.Journal of Ichthyology，1976，16（5）：834－841.

［12］ 莊 平，劉 健，王云龍，等.長江口中華鱘自然保護區(qū)科學考察與綜合管理［M］.北京：海洋出版社，2009：239－240.

ZHUANG P，LIU J，WANG Y L，et al.The Yangtze Estuary nature reserve for Chinese sturgeon：scientific studies and management［M］.Beijing：China Ocean Press，2009：239－240.

［13］ HE X G，ZHUANG P，ZHANG L Z，et al.Osmoregulation in juvenile Chinese sturgeon（Acipenser sinensisGray）during brackish water adaptation［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2009，35（2）：223－230.

［14］ ZHAO F，QU L，ZHUANG P，et al.Salinity tolerance as well as osmotic and ionic regulation in juvenile Chinese sturgeon（Acipenser sinensisGray）exposed to different salinities［J］.Journal of Applied Ichthyology，2011，27（2）：231－234.

［15］ 趙 峰，張 濤，侯俊利，等.長江口中華鱘幼魚血液水分、滲透壓及離子濃度的變化規(guī)律［J］.水產學報，2013，37（12）：1795－1800.

ZHAO F，ZHANG T，HOU J L，et al.Changes in blood moisture，osmolality and ion concentration of juvenile Chinese sturgeon（Acipenser sinensis）in the Yangtze Estuary［J］.Journal of Fisheries of China，2013，37（12）：1795－1800.

［16］ ZHAO F，ZHUANG P，ZHANG T，et al.Isosmotic points and their ecological significance for juvenile Chinese sturgeonAcipenser sinensis［J］.Journal of Fish Biology，2015，86（4）：1416－1420.

［17］ 封蘇婭，趙 峰，莊 平，等.中華鱘幼魚鰓絲Na＋－K＋－ATPaseα亞基滲透調節(jié)的分子機制初步研究［J］.水產學報，2012，36（9）：1386－1391.

FENG S Y，ZHAO F，ZHUANG P，et al.Preliminary studies on molecular mechanism of salinity regulation of Na＋，K＋－ATPaseα-subunit in gills of juvenile Chinese sturgeon（Acipenser sinensis）［J］.Journal of Fisheries of China，2012，36（9）：1386－1391.

［18］ 吳貝貝，趙 峰，張 濤，等，中華鱘幼魚鰓上氯細胞的免疫定位研究［J］.上海海洋大學學報，2015，24（1）：20－27.

WU B B，ZHAO F，ZHANG T，et al.Immunolocalization of chloride cell on the gills of juvenileAcipenser sinensis［J］.Journal of Shanghai Ocean University，2015，24（1）：20－27

［19］ FOSKETT JK，LOGSDON C D，TURNER T，et al.Differentiation of the chloride extrusion mechanism during seawater adaptation of a teleost fish，the cichlid Sarotherodon mossambicus［J］.The Journal of Experimental Biology，1981，93（1）：209－224.

［20］ UCHIDA K，KANEKO T，YAMAUCHI K，et al.Morphometrical analysis of chloride cell activity in the gill filaments and lamellae and changes in Na＋，K＋－ATPase activity during seawater adaptation in chum salmon fry［J］.Journal of Experimental Zoology，1996，276（3）：193－200.

［21］ MIZUNO S，URA K，OKUBO T，et al.Ultrastructural changes in gill chloride cells during smoltification in wild and hatchery-reared masu salmonOncorhynchus masou［J］.Fisheries Science，2000，66（4）：670－677.

［22］ ZYDLEWSKIJ，MCMORMICK SD.Developmental and environmental regulation of chloride cells in young American shad，Alosa sapidissima［J］.Journal of Experimental Zoology，2001，290（2）：73－87.

［23］ EVANSD H.The Physiology of Fishes［M］.Boca Raton：CRC Press，1993：315－341.

［24］ LAURENT P，CHEVALIER C，WOOD C M.Appearance of cuboidal cells in relation to salinity in gills ofFundulus heteroclitus，a species exhibiting branchial Na＋butnotCl－uptake in freshwater［J］.Cell and Tissue Research，2006，325（3）：481－492

［25］ LEE T H，HWANG P P，LIN H C，et al.Mitochondria-rich cells in the branchial epithelium of the teleost，Oreochromismossambicus，acclimated to various hypotonic environments［J］.Fish Physiology and Biochemistry，1996，15（6）：513－523.

［26］ CHOI J H，LEE K，INOKUCHI M，et al.Morphofunctional modifications in gill mitochondriarich cells of Mozambique tilapia transferred from freshwater to 70%seawater，detected by dual observation ofwhole-mount immunocytochemistry and scanning electron microscopy［J］.Comparative Biochemistry and Physiology，2011，158A（4）：132－142.

［27］ FRIDMAN S，RANA K J，BRON J E.Structural differentiation of apical opening in active mitochondria-rich cells during early life stage of Nile tilapia（Oreochromis niloticusL.）as a response to osmotic challenge［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2013，39（5）：1101－1114.

［28］ CHANG I C，LEE T H，YANG C H，et al.Morphology and function of gill mitochondria-rich cells in fish acclimated to different environments［J］.Physiological and Biochemical Zoology，2001，74（1）：111－119.

［29］ CHANG I C，WEI Y Y，CHOU F I，et al.Stimulation of Cl－uptake and morphological changesin gill mitochondria-rich cells in freshwater tilapia（Oreochromismossambicus）［J］.Physiological and Biochemical Zoology，2003，76（4）：544－552.

［30］ 廖雅麗，張晨捷，高權新，等.魚類離子細胞及離子通道的研究進展［J］.海洋漁業(yè)，2015，37（1）：77－86.

LIAO Y L，ZHANG C J，GAO Q X，et al.New insights into ionocytes and ion channels［J］.Marine Fisheries，2015，37（1）：77－86.

［31］ TSAI J C，HWANG P P.Effects of wheat germ agglutinin and colchicine on microtubules of the mitochondria-rich cells and Ca2＋uptake in tilapia（Oreochromismossambicus）larvae［J］.The Journal of Experimental Biology，1998，201（15）：2263－2271.

Characters ofmorphology，distribution and quantity of branchial chloride cells of juvenile Acipenser sinensis acclimated in freshwater and brackish water

ZHAO Feng，YANG Gang，ZHANG Tao，WANG Yu，ZHUANG Ping
（Key laboratory of Fisheries Ecology of the Yangtze Estuary，East China SeaFisheries Research Institute，Chinese Academy Fishery Sciences，Shanghai 200090）

To understand the adaptive changes of branchial chloride cells（CCs）in juvenile Chinese sturgeon Acipenser sinensis in the Yangtze Estuary，juveniles were acclimated to 0（freshwater，FW）and brackish water（salinity 15，BW）for 60 days.Histological and ultrastructural observation on branchial CCs were comparatively studied in juveniles adapted either in FW or BW.Results showed that：CCswere slightly oval，and mainly distributed in the base of lamellae and interlamellar regions of filaments.When juveniles were adapted in BW，the number and size of branchial CCs on filaments increased significantly.However，there was no change on number of CCs，and there was a significant increase on size of CCs on lamellae.The morphology of CCs on filaments and lamellae did not change in fish adapted to FW or BW.Apical opening of CCswas largely classified into the following three types：I，convex type；II，concave type；III，deep-hole type.In FW，apical opening of CCs on juvenile Chinese surgeon gills presented as type Iand II，and no type IIIwas found.After the fish was adapted in BW，apical opening of CCs on juvenile gillswasmainly type III，and a small amountof type Iand IIapical opening appeared.The increase of number and size of branchial CCs on filaments and the morphological changes of apical opening of CCs is the adapting adjustment of juvenile Acipenser sinensis for osmoregulation and maintaining osmotic balance.

Acipenser sinensis；chloride cell；morphology and distribution；quantity character；apical opening；osmoregulation

S 917

A

1004－2490（2016）01－0035－07

2015－08－01

公益性行業(yè)（農業(yè)）科研專項資金項目（201203065）

趙 峰（1978－），男，博士，副研究員，主要從事河口漁業(yè)生態(tài)與保護生物學研究。E-mail：zhaof＠ecsf.ac.cn

莊 平，研究員。E-mail：pzhuang＠ecsf.ac.cn