老年肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷細(xì)胞的臨床及意義

姚　斕　王燕嬉　張　偉

(白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，吉林　白城　137000)

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老年肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷細(xì)胞的臨床及意義

姚斕王燕嬉張偉1

(白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，吉林白城137000)

〔摘要〕目的探討老年肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷(NK)細(xì)胞水平及臨床意義。方法該校附屬醫(yī)院80例老年肺癌患者作為觀察組，回顧分析外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞檢測結(jié)果，與另選的80例健康受檢者(對(duì)照組)進(jìn)行對(duì)比分析，并于術(shù)后20 d復(fù)查肺癌患者的外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞，對(duì)比緩解者與未緩解者的檢查結(jié)果。結(jié)果外周血T淋巴細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞表達(dá)水平檢測中，觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值與NK細(xì)胞水平較對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，CD8+表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組于術(shù)后20 d復(fù)查T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞，根據(jù)結(jié)果分為兩組進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)緩解組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表達(dá)均較化療前明顯上升，CD8+表達(dá)顯著降低(P<0.05)。而未緩解組各項(xiàng)指標(biāo)化療前后無明顯變化(P>0.05)。結(jié)論NK細(xì)胞與外周血T淋巴亞群對(duì)診斷、評(píng)價(jià)肺癌的療效、判斷預(yù)后具有重要價(jià)值。

〔關(guān)鍵詞〕肺癌；T 淋巴細(xì)胞；自然殺傷細(xì)胞

肺癌的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢，生存率只有10%~20%，預(yù)后差〔1〕。細(xì)胞免疫是機(jī)體抗腫瘤免疫的重要機(jī)制，T細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞是判斷和監(jiān)測免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)〔2〕。本研究旨在探討肺癌患者 T 淋巴細(xì)胞亞群和 NK 細(xì)胞變化及臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2010年1月至2014年12月在我校附屬醫(yī)院住院確診的肺癌患者80例為觀察組，均經(jīng)病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診。其中男48例，女32例，年齡60~78〔平均(67.7±4.6)〕歲。另選我院門診健康體檢者80例為對(duì)照組，均無免疫系統(tǒng)疾病或使用過免疫抑制劑。其中男47例，女33例，年齡60~79〔平均(68.5±5.4)〕歲。兩組受檢者性別、年齡無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法清晨采集所有體檢者空腹靜脈血2~3 ml，以乙二胺四乙酸三鉀(EDTA-K3)抗凝的新鮮血備用，本實(shí)驗(yàn)采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法(S-P法)。將標(biāo)本與試劑搖勻，所有TruCOUNT絕對(duì)計(jì)數(shù)管中準(zhǔn)確加入20 μl MultiTEST四色試劑盒50 μl全血，充分混勻，15 min后加入450 μl流式細(xì)胞(FACS)溶血液，充分混勻。陰暗處再15 min后，向另3個(gè)TruCOUNT絕對(duì)計(jì)數(shù)管中分別加入50 μl TruCOUNT Control Beads作為絕對(duì)技術(shù)質(zhì)控，運(yùn)行MultiTEST程序上機(jī)監(jiān)測相關(guān)指標(biāo)〔3〕。觀察組患者于術(shù)后20 d抽取用肝素抗凝的外周血，復(fù)查T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1兩組T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞檢測結(jié)果比較觀察組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值與NK較對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，CD8+表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1　兩組T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞檢測結(jié)果對(duì)比±s,n=80)

與觀察組比較:1)P<0.05

1武警白城市支隊(duì)衛(wèi)生隊(duì)

第一作者：姚斕(1982-)，女，碩士，講師，主要從事生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。

2.2化療前后的肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞變化觀察組患者于術(shù)后20 d抽取用肝素抗凝的外周血，復(fù)查T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞。根據(jù)結(jié)果分為兩組進(jìn)行分析，如表2所示，緩解組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表達(dá)均較化療前明顯上升，CD8+表達(dá)顯著降低(P<0.05)。而未緩解組各項(xiàng)指標(biāo)化療前后無明顯變化(P>0.05)。

表2　化療前后的肺癌患者T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞變化±s)

與化療前比較：1)P<0.05

3討論

肺癌也稱支氣管肺癌，大多起源于支氣管黏膜上皮。據(jù)世界衛(wèi)生組織資料報(bào)告，1996年肺癌病例數(shù)約有130萬。在中國，城市肺癌死亡率達(dá)118.08%〔4〕。城市的工業(yè)化污染、廢氣排放及吸煙等不良的生活習(xí)慣是使肺癌發(fā)病率急劇上升的重要原因，也正因?yàn)樵摬〉陌l(fā)病人群趨于年輕化，而幾乎所有國家中男性肺癌發(fā)病率和死亡率均高于女性。癌腫的致病機(jī)制主要為腫瘤產(chǎn)生或分泌大量免疫抑制因子(TDSF)，導(dǎo)致NK細(xì)胞活性降低及T細(xì)胞亞群異常和比例失調(diào)〔5〕。

在細(xì)胞免疫中T淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分，各T淋巴細(xì)胞亞群在正常機(jī)體血液中，通過相互作用和協(xié)調(diào)，來維持機(jī)體的正常免疫功能。對(duì)T亞群進(jìn)行檢測是臨床上觀察機(jī)體細(xì)胞免疫的重要方法之一〔6〕，T細(xì)胞及亞群在正常情況下處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，免疫功能穩(wěn)定有賴于輔助性T細(xì)胞(Th)與抑制性T細(xì)胞比值的協(xié)調(diào)〔7〕。CD4 主要表達(dá)于Th細(xì)胞，是Th細(xì)胞受體(TCR)識(shí)別抗原的共受體，與主要組織相容復(fù)合體(MHC)Ⅱ類分子的非多肽區(qū)結(jié)合，參與辨識(shí)腫瘤細(xì)胞分泌的可溶性抗原，參與細(xì)胞毒T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞的激活，殺傷腫瘤細(xì)胞。CD8+T細(xì)胞通過表面的MHCⅠ分子與CD4等其他免疫細(xì)胞的MHCⅡ分子結(jié)合，從而識(shí)別其他免疫細(xì)胞表面結(jié)合的抗原物質(zhì)。細(xì)胞正常情況下CD4+/CD8+比值>1.4，若CD4+/CD8+比值或T細(xì)胞總數(shù)發(fā)生變化時(shí)，反映機(jī)體免疫功能低下，即可引起免疫調(diào)節(jié)紊亂，易發(fā)生腫瘤或自身免疫疾病〔8〕。

NK細(xì)胞來源于骨髓的大顆粒細(xì)胞，是T細(xì)胞的調(diào)節(jié)細(xì)胞，有自發(fā)溶解腫瘤細(xì)胞的能力，在機(jī)體中對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高度細(xì)胞毒性作用的淋巴炎細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞維持和調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫中有作用，在體內(nèi)相對(duì)較少〔9〕。

本研究說明肺癌患者免疫功能受到不同程度的抑制，降低了清除腫瘤細(xì)胞的能力，無法有效抑制腫瘤持續(xù)生長〔10〕。由于NK細(xì)胞對(duì)腫瘤有直接殺傷作用，檢測結(jié)果減少表明肺癌患者免疫功能降低、紊亂及處于免疫抑制狀態(tài)。本研究提示，若化療有效，則能在一定程度上改善患者免疫功能，降低腫瘤的負(fù)荷〔11〕。

綜上所述，外周血中T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞活性的檢測可幫助監(jiān)測免疫功能，為肺癌的診斷和療效判斷等提供參考依據(jù)，對(duì)估計(jì)預(yù)后有重要意義。

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10鄒靜，劉斌，陳雪華，等.肺癌患者外周血 T 淋巴細(xì)胞亞群變化特點(diǎn)及臨床意義〔J〕.中國免疫學(xué)雜志，2010；26(11)：1016-20.

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〔2015-10-25修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

通訊作者：張偉(1980-)，男，主治醫(yī)師，主要從事全科醫(yī)學(xué)臨床工作。

基金項(xiàng)目：吉林省教育科學(xué)“十二五”規(guī)劃課題(No.GH150639)

〔中圖分類號(hào)〕R734

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)04-0860-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.04.042