慢性牙周炎患者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平差異

陳瑋粲，解 飛，張辰升，李 曄

（1.河北省保定市第一中心醫(yī)院，保定 071000；2.隆堯縣醫(yī)院，邢臺(tái) 055350）

慢性牙周炎患者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平差異

陳瑋粲1，解 飛2，張辰升2，李 曄1

（1.河北省保定市第一中心醫(yī)院，保定 071000；2.隆堯縣醫(yī)院，邢臺(tái) 055350）

目的：探討慢性牙周炎患者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平差異，為慢性牙周炎的臨床治療提供理論基礎(chǔ)。方法：選取本院2014年5月～2015年12月收治的慢性牙周炎患者36例進(jìn)行研究，同時(shí)選擇同期健康體檢者35例進(jìn)行對(duì)照，分別對(duì)受試者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)因子水平（Th-1、Th-2、Th-17和IL-17）的表達(dá)差異的濃度進(jìn)行分析，觀察比較各細(xì)胞因子其濃度水平的差異，其中牙周炎患者經(jīng)治療后，觀察其治療前后的水平，對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：在慢性牙周炎組血漿中Th1、Th17的濃度顯著高于牙周健康的對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而慢性牙周炎患者中Th2比例明顯下降，與正常牙周相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在齦溝液中IL-17濃度明顯升高，與健康牙周組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組治療后Th1、Th17的濃度顯著低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：慢性牙周炎患者血漿中Th1、Th17的濃度較健康者升高，且在齦溝液中IL-17濃度明顯升高，這提示IL-17可能是牙周炎發(fā)生重要的促炎癥細(xì)胞因子。

慢性牙周炎；Th亞群細(xì)胞；細(xì)胞因子；IL-17

牙周炎是目前口腔科較為常見的，具有破壞牙周組織的破常見疾病之一，臨床主要表現(xiàn)為牙齦出血和炎癥以及牙周袋的形成和牙槽骨的吸收及牙齒松動(dòng)等。研究發(fā)現(xiàn)，其是牙齒周圍的軟組織的炎性狀態(tài)及對(duì)斑菌的直接免疫反應(yīng)［1］。該病屬難治性疾患，也是導(dǎo)致成人牙齒缺失的主要原因，易發(fā)展為慢性，且久治不愈［2］。

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)［3］，牙周炎患者牙菌斑中的致病菌可激發(fā)宿主發(fā)生炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)，這不僅是造成和影響牙周破壞的重要原因，而且這些炎癥免疫反應(yīng)所釋放的炎癥細(xì)胞因子進(jìn)入宿主外周血中，從而對(duì)全身系統(tǒng)產(chǎn)生一定的影響，以致全身系統(tǒng)性疾病，如冠心病、糖尿病等的發(fā)生。本組研究就慢性牙周炎患者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的濃度水平進(jìn)行分析，并與健康受試者進(jìn)行對(duì)比，探討其發(fā)生的促炎癥細(xì)胞因子，取得了較好的效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取本院2014年5月～2015年12月收治的慢性牙周炎患者36例進(jìn)行研究，其中男21例，女15例，年齡27～56歲，平均年齡為（43.8±6.3）歲，病程0.7～10年不等，平均病程（4.7±1.6）年，所有患者均滿足慢性牙周炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且排除侵襲性牙周炎、有高血壓、糖尿病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、等全身系統(tǒng)性疾病者、孕婦和哺乳期患者、半年內(nèi)有牙周治療史或3個(gè)月之內(nèi)有服用抗生素、激素類藥物、吸煙者；同時(shí)選擇同期健康體檢者35例進(jìn)行對(duì)照，其中男20例，女15例，年齡26～55歲，平均年齡為（43.6±6.6）歲；兩組患者基本資料相似，P＞0.05，資料具有可比性。

1.2 方法治療方法：慢性牙周炎患者給予牙周基礎(chǔ)治療（口腔潔治，齦下刮治，口腔衛(wèi)生指導(dǎo)）后6周復(fù)查的數(shù)據(jù)。

血漿的采集：所有受試者于清晨采集外周靜脈血2ml，采用肝素抗凝。且觀察組在治療前后均給予采血。

齦溝液采集［4］：所采取的齦溝液所在的牙齦均滿足無(wú)齲損及牙髓，無(wú)根尖周病變，無(wú)咬合創(chuàng)傷，用濾紙條法收集齦溝液。

采用Elisa法對(duì)血漿和齦溝液相關(guān)細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)。Elisa試劑盒購(gòu)買于BD公司，操作按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)觀察所有受試者血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)因子（Th-1、Th-2、Th-17和IL-17）水平的表達(dá)差異的濃度進(jìn)行分析，觀察組同時(shí)進(jìn)行治療前后的Th1、Th17的濃度對(duì)比，觀察比較各細(xì)胞因子其濃度水平的差異，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，所有數(shù)據(jù)均采用（s）表示，組間比較采用 t 檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以α=0.05 為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，設(shè)定P﹤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受試者血漿Th細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平比較在慢性牙周炎組血漿中Th1、Th17的濃度顯著高于牙周健康的對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05；而慢性牙周炎患者中Th2比例明顯下降，與正常牙周相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05；見表1。

表1 兩組受試者血漿Th細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平（pg/mL）比較

2.2 兩組受試者齦溝液中IL-17細(xì)胞因子濃度水平比較在齦溝液中IL-17濃度明顯升高，與健康牙周組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，見表2。

表2 兩組受試者齦溝液中IL-17細(xì)胞因子濃度水平比較（pg/mL）

2.3 牙周炎患者治療前后Th1、Th17的濃度的比較觀察組治療后血漿Th1、Th17的濃度顯著低于治療前，兩組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，見表3。

表3 牙周炎患者治療前后Th1、Th17的濃度的比較（pg/mL）

3 討論

牙周炎是常見的口腔疾病之一，其發(fā)病率高，是成人病理性缺、失牙的主要原因。且研究發(fā)現(xiàn)［5］，慢性牙周炎與急性心肌梗死和慢性冠心病、早產(chǎn)和低出生體重兒、糖尿病等密切相關(guān)，嚴(yán)重危害人類健康。牙周炎以牙銀炎癥和牙槽骨進(jìn)行性吸收為主要臨床表現(xiàn)，以往認(rèn)為牙菌斑生物膜是發(fā)病的始動(dòng)因素，隨著免疫學(xué)的發(fā)展，近年大量研究證實(shí)［6］牙周炎是由T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答為主的多種致炎因子共同參與的疾病。文獻(xiàn)報(bào)道，在牙周炎組織中發(fā)現(xiàn)由漿細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，這進(jìn)一步說(shuō)明獲得性免疫在牙周炎發(fā)病中的作用。

目前多項(xiàng)研究證實(shí)［7］，牙周炎和眾多致病菌的感染相關(guān)，發(fā)生牙周炎的致病菌在人體的聚集導(dǎo)致牙周微生態(tài)的失調(diào)、人體免疫力低下，從而引起牙周炎的發(fā)生。目前已有文獻(xiàn)對(duì)牙周炎患者的外周血Th細(xì)胞群進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)［8］，慢性牙周炎患者外周血中Th1和Th17的含量顯著高于健康受試者組，而Th2所占百分含量顯著低于健康組，這證實(shí)慢性牙周炎是由T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答為主的多種致炎因子共同參與的疾病。

免疫學(xué)研究發(fā)現(xiàn)［9］，初始的T細(xì)胞受到佐劑類型、抗原類型可識(shí)別微環(huán)境中的細(xì)胞因子，而輔助性T細(xì)胞在接受內(nèi)源或外源的抗原刺激后可向Thl和Th2細(xì)胞兩個(gè)方向分化。Thl細(xì)胞亞群標(biāo)志性細(xì)胞因子是IL-2、IL-12、IFN-Y、TNF-a促進(jìn)細(xì)胞免疫應(yīng)答。故本組研究在前期研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)血漿和齦溝液中Th亞群細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子濃度水平進(jìn)行分析，并與健康者進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在慢性牙周炎組血漿中Th1、Th17的濃度顯著高于牙周健康的對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而慢性牙周炎患者中Th2比例明顯下降，與正常牙周相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在齦溝液中IL-17濃度明顯升高，與健康牙周組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與目前的文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果相似。

IL-17由Th17細(xì)胞產(chǎn)生，具有高度的致炎作用，研究發(fā)現(xiàn)［9］，其在自身疫應(yīng)答對(duì)抗微生物感染引起的細(xì)胞媒介組織破壞的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用，同時(shí)其同時(shí)參與和其他細(xì)胞亞群的相互作用，調(diào)控機(jī)體對(duì)感染的應(yīng)答。而在牙周炎中Th細(xì)胞存在于牙周病的組織破壞階段，主要通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞釋放前炎癥因子，及動(dòng)員中性粒細(xì)胞的細(xì)胞因子而發(fā)揮作用。

已有文獻(xiàn)報(bào)道［10］，IL-17 作為一種強(qiáng)大的促炎因子參與了牙周組織的炎癥反應(yīng)，并隨著炎癥程度的加重，IL-17 作用增強(qiáng)，這與細(xì)胞因子間相互協(xié)調(diào)作用從而促進(jìn)炎癥反應(yīng)有關(guān)。此外，牙周炎患者外周血表達(dá)和分泌IL-17 水平明顯升高，其水平的高低可反映疾病的活動(dòng)程度，這對(duì)臨床制定治療慢性牙周炎的臨床方案，以及判斷治療后的療效有著一定的指導(dǎo)意義。

為觀察Th亞群細(xì)胞濃度水平與牙周炎的相關(guān)性，本組研究對(duì)牙周炎組患者治療后Th1和Th17水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組治療后血漿Th1、Th17的濃度顯著低于治療前，兩組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這說(shuō)明Th亞群細(xì)胞濃度水平與牙周炎具有較大的相關(guān)性。

綜上所述，慢性牙周炎患者血漿中細(xì)胞因子IL-17較健康者升高，這提示IL-17可能是牙周炎發(fā)生重要的促炎癥細(xì)胞因子，為臨床上的治療提供理論依據(jù)。

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Level of Th subsets in plasma and gingival fluid in patients with chronic periodontitis

Chen Wei-can1, Xie Fei2, Zhang Chen-sheng2, Li Ye1

(1.Baoding First Central Hospital of Hebei Province, Baoding 071000, China; 2.Longyao County Hospital, Xingtai 055350, China)

ObjectiveTo investigate the difference of Th subsets in plasma and gingival sulcus fluid in patients with chronic periodontitis, and to provide theoretical basis for clinical treatment of chronic periodontitis.MethodsSelect the hospital 2014 may 2015 December of chronic periodontitis patients with 36 cases were investigated. Meanwhile, the selection of healthy in the same period were 35 cases were compared to differences in the expression of plasma and gingival crevicular fluid Th cell subsets associated factor (Th-1 and Th-2, Th17 and IL-17) concentrations were analyzed and compared the cytokine concentration differences were observed, which periodontitis patients after treatment observed before and after the treatment, the level and the relevant data were statistically analyzed.ResultsIn the chronic periodontitis group, the plasma concentrations of Th1 and Th17 was significantly higher than that of periodontal healthy control group, the difference is statistically significant, and patients with chronic periodontitis of Th2 cell ratio decreased significantly, compared with the normal periodontal ligament, the difference is statistically significant. The concentration of IL-17 in gingival crevicular fluid was significantly higher, compared with the periodontal health group, the difference is statistically significant . After treatment, the concentration of Th17 and Th1 in the observation group was significantly lower than that before treatment, the difference was statistically significant.ConclusionPlasma levels of Th1 and Th17 in patients with chronic periodontitis were higher than those in healthy subjects, and the concentration of IL-17 was significantly increased in the gingival sulcus fluid, which suggested that IL-17 might be an important pro-inflammatory cytokine in periodontitis.

chronic periodontitis； Th subgroup cell； cytokine； IL-17

R781.4；R541.4

A

1673-016X（2016）06-0134-03

2016-09-12

陳瑋粲，E-mail：1834181709@qq.com