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    INF-γ、ADA和ESAT-6在結(jié)核性腦膜炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值

    2016-02-29 03:14:16劉霞,覃玫,唐麗坤
    關(guān)鍵詞:結(jié)腦輕癥腦膜炎

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    INF-γ、ADA和ESAT-6在結(jié)核性腦膜炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值

    劉霞1,覃玫2,唐麗坤2

    (1.桂林市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科;2.神經(jīng)內(nèi)科,廣西 桂林541002)

    結(jié)核性腦膜炎(結(jié)腦)是由結(jié)核桿菌引起的腦膜非化膿性炎癥,其臨床癥狀不典型,但病情進(jìn)展迅速,死亡率高,及時(shí)診斷和治療是減輕后遺癥和降低死亡率的關(guān)鍵所在。INF-γ、ADA和ESAT-6在結(jié)腦患者腦脊液中的異常表達(dá)對(duì)其診斷有輔助診斷價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1資料與方法

    1.1研究對(duì)象所選研究對(duì)象均為桂林市人民醫(yī)院2010年1月-2013年12月間住院的患者,結(jié)腦組65例,男34例,女31例;年齡14-76歲,平均(36+18.5)歲,其診斷符合文獻(xiàn)[1]的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組30例為本院同期住院的患者,排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染和腫瘤,男16例,女14例,年齡14-70歲,平均(33.5+14.5)歲。

    1.2研究方法

    1.2.1標(biāo)本采集和處理患者于入院后24 h內(nèi)無菌條件下腰椎穿刺留取腦脊液2 ml,3 000 r/min離心10分鐘,取上清液貯存于-20℃冰箱保存,結(jié)腦組恢復(fù)期再次取樣備檢。

    1.2.2檢測(cè)方法INF-γ和ESAT-6檢測(cè)用ELISA方法,ADA檢測(cè)用酶動(dòng)力學(xué)終點(diǎn)法。

    2結(jié)果

    2.1結(jié)腦組急性期、恢復(fù)期和對(duì)照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測(cè)結(jié)果分析結(jié)腦組急性期INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平顯著高于其恢復(fù)期表達(dá)水平,也顯著高于對(duì)照組表達(dá)水平(P<0.05),見表1。

    表1 結(jié)腦組急性期、恢復(fù)期和對(duì)照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測(cè)結(jié)果

    注:結(jié)腦組急性期與恢復(fù)期和對(duì)照組比較,*P<0.05

    2.2結(jié)腦患者重癥組、輕癥組和對(duì)照組INF-γ、ADA和ESAT-6檢測(cè)結(jié)果分析結(jié)腦組中重癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平顯著高于輕癥組,輕癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05),見表2。

    表2 結(jié)腦組中輕癥組、重癥組與對(duì)照組INF-γ、ADA

    注:重癥組與輕癥組比較,*P<0.05;輕癥組與對(duì)照組比較,ΔP<0.05

    2.3INF-γ、ADA和ESAT-6三個(gè)指標(biāo)單個(gè)檢測(cè)、二聯(lián)檢測(cè)和三聯(lián)檢測(cè)的靈敏性分析單個(gè)指標(biāo)檢測(cè)靈敏性較低,二聯(lián)檢測(cè)和三聯(lián)檢測(cè)能提高其靈敏性,見表3。

    表3 三項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果

    3討論

    結(jié)腦的診斷主要依據(jù)典型的臨床表現(xiàn),腦脊液涂片找結(jié)核桿菌和結(jié)核菌培養(yǎng),頭顱CT輔助檢查等,但許多病例癥狀不典型,涂片找結(jié)核桿菌陽性率低,培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)導(dǎo)致漏診和誤診。近年來,免疫學(xué)的發(fā)展發(fā)現(xiàn)一些細(xì)胞因子和蛋白在結(jié)腦疾病發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

    干擾素-γ(INF-γ)是由T淋巴細(xì)胞和大顆粒淋巴細(xì)胞在結(jié)核抗原刺激后產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,是免疫調(diào)節(jié)蛋白,其參與機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌細(xì)胞免疫,活化巨噬細(xì)胞及其溶酶體活性,促進(jìn)結(jié)核桿菌抗原遞呈[2]。INF-γ的免疫功能具有雙重效應(yīng),高濃度的INF-γ加強(qiáng)免疫反應(yīng),導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷;另一方面,免疫效應(yīng)有利于機(jī)體對(duì)抗原的清除,起保護(hù)機(jī)體的作用[3]。趙日光等[4]研究表明,結(jié)腦組腦脊液中INF-γ濃度顯著高于病毒性腦膜炎組,敏感性為86.5%,特異性為94.2%。

    腺苷脫氨酶(ADA)是人體嘌呤類核苷代謝中的重要酶,可催化腺苷產(chǎn)生不可逆的脫氨基反應(yīng),其功能與淋巴細(xì)胞的激活和分化有關(guān)。Chotmongkol[5]通過研究177例患者腦脊液中ADA的活性,認(rèn)為CSF中ADA水平是早期診斷結(jié)腦的重要指標(biāo)。朱敏等[6]研究表明,結(jié)腦組腦脊液中ADA的活性明顯高于對(duì)照組,同時(shí)應(yīng)用ROC曲線對(duì)ADA在診斷結(jié)腦時(shí)的臨床準(zhǔn)確性進(jìn)行了評(píng)價(jià),當(dāng)取COV 7.75U/L,其診斷的敏感性為87%,特異性為94.1%。

    早期分泌性靶抗原-6(ESAT-6)是結(jié)核桿菌早期分泌性低分子蛋白,主要存在于致病性結(jié)核桿菌,而不存在于牛型分枝桿菌及大部分環(huán)境中的分枝桿菌中。Murakami S等[7]認(rèn)為ESAT-6可以作為非結(jié)核病流行區(qū)結(jié)核桿菌感染的標(biāo)志。何俊瑛等[8]用免疫組化法對(duì)結(jié)腦患者進(jìn)行了腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)ESAT-6檢測(cè),發(fā)現(xiàn)其靈敏度為70%,特異度達(dá)到95%。楊笑等[9]研究42例結(jié)腦患者38例腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)ESAT-6檢測(cè)呈陽性反應(yīng),陽性率為90.5%。張昆南等[10]采用腦脊液抗原負(fù)壓濃縮技術(shù)檢測(cè)ESAT-6,敏感性為91.4%,特異性為94.3%。

    本研究中結(jié)腦患者急性期INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平明顯升高,顯著高于其恢復(fù)期表達(dá)水平,也顯著高于對(duì)照組表達(dá)水平(P<0.05),恢復(fù)期與對(duì)照組間表達(dá)無明顯區(qū)別(P>0.05)。重癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平顯著高于輕癥組,輕癥組INF-γ、ADA和ESAT-6表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。單獨(dú)檢測(cè)其中一項(xiàng),敏感性、特異性和準(zhǔn)確性最高為81.54%、90.00%和84.21%;二項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè),敏感性、特異性和準(zhǔn)確性最高為87.69%、86.67%和85.26%;三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè),敏感性、特異性和準(zhǔn)確性高達(dá)92.31%、80.00%和88.42%。

    總之,INF-γ、ADA和ESAT-6在結(jié)腦患者腦脊液中表達(dá)水平顯著升高,其表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化對(duì)疾病的診斷和病情的評(píng)估具有重要的臨床意義,聯(lián)合檢測(cè)能提高陽性檢出率。

    參考文獻(xiàn):

    [1]中華醫(yī)學(xué)會(huì).臨床診療指南(結(jié)核病分冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社.2005:1-55.

    [2]朱飛,張家堂,邢小微,等.IL-8、MMP-9、INF-γ的檢測(cè)對(duì)結(jié)核性腦膜炎及病毒性腦膜炎發(fā)病的意義[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2012,11(8):838.

    [3]李志惠,崔丹,趙杰,等.結(jié)核性胸膜炎胸液結(jié)核分枝桿菌特異性INF-γ與ADA的關(guān)系[J].河北醫(yī)藥,2013,35(21):3232.

    [4]趙日光,姜彬.結(jié)核性腦膜炎腦脊液γ-干擾素檢測(cè)的臨床價(jià)值[J].華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2011,13(5):604.

    [5]Chotmongkol V,Y Teerajetgul,C Yadwut,et al.Cerebrospinal fluid adenosine deaminase activity for the diagnosis of tuberculoua meningitis in adults[J].Southeast Asian J Trop Med Public Health,2006,37(4):948.

    [6]朱敏,范玉美,陳園園.6種標(biāo)記物診斷結(jié)核性腦膜炎的臨床價(jià)值[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2009,19(1):18.

    [7]Murakami S,Takeno M,0ka H,et al.Diagnosis of tuberculous meniningitis due to detection of ESAT-6 specific gamma interfero production in cerebrospinal fluid enzyme-linked immunospot assay[J].Clin Vaccine Immunol,2008,15(5):897.

    [8]何俊瑛,劉士甫,朱艷霞,等.腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)ESAT-6檢測(cè)對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷意義[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2010,18(3):209.

    [9]楊笑,郭旻,謝鵬.腦脊液?jiǎn)魏思?xì)胞內(nèi)ESAT-6對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷價(jià)值[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志,2012,38(6):330.

    [10]張昆南,許自強(qiáng),吳曉牧,等.腦脊液中檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌特異性抗原對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷意義[J].中華神經(jīng)科雜志,2011,44(2):86.

    文章編號(hào):1007-4287(2016)01-0047-04

    (收稿日期:2014-08-20)

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