中藥肉桂的化學(xué)成分研究

楊秋霞 徐方方 吳云山 劉 博 果德安,,3

(1 廣東藥科大學(xué)，廣州，510006； 2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院/廣東省中醫(yī)科學(xué)院，廣州，510006；3 中國科學(xué)院上海藥物研究所，上海，201203)

中藥肉桂的化學(xué)成分研究

楊秋霞1徐方方2吳云山2劉 博2果德安1,2,3

(1 廣東藥科大學(xué)，廣州，510006； 2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院/廣東省中醫(yī)科學(xué)院，廣州，510006；3 中國科學(xué)院上海藥物研究所，上海，201203)

目的：對中藥肉桂(CinmamomumcassiaPresl)的化學(xué)成分進行研究。方法：采用正、反相硅膠柱色譜、凝膠柱色譜及半制備液相色譜等方法進行分離純化，利用波譜解析結(jié)合理化性質(zhì)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果：分別鑒定為1)：(-)開環(huán)異落葉松脂醇，2)：(-)異落葉松脂素，3)：Erythro-1-C-syringylglycerol，4)：2-甲基-3，5-羥基色酮，5)：浙貝素，6)：松柏醛，7)：肉桂酸。結(jié)論：其中1～3為首次從該植物中分離得到，化合物4～5為首次從該屬植物中分離得到。

肉桂；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

中藥肉桂為樟科(Lauraceae)樟屬(Cinnamomum)植物肉桂(CinnamomumcassiaPresl)的干燥樹皮[1]。具有溫中補腎、散寒止痛功能，可用于治療腰膝冷痛，虛寒胃痛，慢性消化不良，腹痛吐瀉，受寒經(jīng)閉[2]。其水提或醇提物具有多種活性[3-14]。

為深入研究肉桂中化學(xué)成分進行，闡明肉桂化學(xué)成分，為其深入開發(fā)利用奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。本實驗對肉桂化學(xué)成分進行了初步研究，從肉桂甲醇提取物的乙酸乙酯部位分離得到了7個化合物，分別鑒定為1)：(-)開環(huán)異落葉松脂醇，2)：(-)異落葉松脂素，3)：Erythro-1-C-syringylglycerol，4)：2-甲基-3，5-羥基色酮，5)：浙貝素，6)：松柏醛，7)：肉桂酸，其中1～3首次從該植物中分離得到，化合物4～5為首次從該屬植物中分離得到。

1 材料

1.1 儀器 Agilent1260分析型高效液相色譜儀(四元泵，在線脫氣，自動進樣，二極管陣列，可變波長紫外檢測器)；Agilent1200高效液相色譜儀(制備型，二極管陣列)；磁共振成像儀；高分辨質(zhì)譜聯(lián)用儀(LTQ Orbitrapxl，Thermo Fisher)；EYELA-RE-2000A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(東京理化EYELA公司)；Millipore超純水機；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI公司)；粉碎儀(RT-04,屹立工具有限公司)；電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；TLC薄層板在紫外燈254 nm或365 nm下觀察，通過10%乙醇-濃硫酸加熱顯色檢測。

1.2 材料 柱色譜硅膠(80～100目、100～200目、200～300目，青島海洋化工廠)、薄層硅膠GF254(青島海洋化工廠)；氘代試劑(CDCl3，CD3OD，DMSO-d6)(寧波旋光公司)；實驗中所用分析純試劑(天津市富宇試劑公司)，色譜級甲醇、乙腈(默克股份兩合公司)；實驗用制備柱為COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ色譜柱(20 cm×250 mm，5 μm)；SephadexTMLH-20(GE Healthcare Bio-sciences，Sweden)；MCI GEL(三菱化學(xué)株式會社)。

1.3 植物來源與鑒定 實驗用肉桂(廣東省康美藥業(yè)，批號：141211271，產(chǎn)地廣西)，于2015年2月購自廣東省中醫(yī)院，經(jīng)廣東省中醫(yī)院陳文良副主任藥師鑒定為樟科樟屬植物肉桂的干燥樹皮。

圖1 肉桂(Cinnamomum cassia)中分離得到的7個化合物

2 提取與分離

將肉桂藥材(10 kg)粉碎至粗粉，用8倍量95%甲醇冷浸4次，每次7 d；濃縮合并每次的浸提液，濃縮至稠膏狀。將濃縮液加入適量水分散，分別用乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，收集萃取液，減壓回收萃取溶劑，最終得乙酸乙酯萃取物(256 g)。將乙酸乙酯部位樣品拌樣后，經(jīng)硅膠柱色譜(100～200目)進行分離，二氯甲烷-甲醇(1∶0，50∶1→0∶1)梯度洗脫，經(jīng)TLC檢視，合并相同洗脫餾分，得6個部分Fr1～6，其中Fr.3、Fr.4經(jīng)高效液相檢識所含有成分較多，因此重點對Fr.3和Fr.4進行分離。

Fr.3(56.3 g)經(jīng)反相MCI柱色譜(甲醇-水，20∶80→80∶20)進行分離后，得到8個組分Fr.3.1-Fr.3.8。Fr.3.1經(jīng)制備液相HPLC(甲醇-水，10∶90)分離，進一步純化后得到化合物3(6 mg)。Fr.3.4(7.7 g)經(jīng)過硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，8∶1→0∶1)梯度洗脫，Sephadex LH-20凝膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脫，再經(jīng)半制備液相純化(甲醇∶水-65∶35)得到化合物5(7 mg)，化合物2(30 mg)。Fr.3.5經(jīng)過硅膠柱色譜(200～300目)進行分離，石油醚∶丙酮(8∶1→0∶1)梯度洗脫，得到Fr.3.5.1-Fr.3.5.8，F(xiàn)r.3.5.1經(jīng)SephadexLH-20(二氯甲烷-甲醇，1∶1)，硅膠柱色譜(石油醚-二氯甲烷-丙酮)梯度洗脫，再經(jīng)半制備液相得到化合物4(11 mg)。Fr.3.5.2經(jīng)過Sephadex LH-20凝膠柱色譜(二氯甲烷-甲醇，1∶1)洗脫，經(jīng)制備液相得到化合物6(33 mg)。Fr.3.5.6經(jīng)過Sephadex LH-20凝膠柱色譜(二氯甲烷-甲醇，1∶1)洗脫，析出大量結(jié)晶，經(jīng)過濾結(jié)晶，重結(jié)晶后過濾得到化合物7(170 mg)。

Fr.4(35.8 g)經(jīng)反相MCI柱色譜(甲醇-水，20%→80%)梯度洗脫，得到Fr.4.1-Fr.4.8，F(xiàn)r.4.6經(jīng)過Sephadex LH-20凝膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脫，得到Fr.4.6.1-Fr.4.6.7。Fr.4.6.6經(jīng)過半制備液相(甲醇∶水-40∶60)純化后得到化合物1(8 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色油狀物，能溶于甲醇，ESI-MS m/z為361[M-H]-，提示該化合物的分子量為362。分子式為C20H26O6。1HNMR(400 MHz,MeOD)δ:6.66(2H,d,J=7.9 Hz,H-5,H-5′)，6.59(2H,s,H-2,H-2′)，6.55(2H,dd,J=8.0,1.8 Hz,H-6,H-6′)，3.74(6H,s,-CH3O-3,-CH3O-3′),3.64-3.54(m,4H,9-H,H-9′)，2.67(2H,dd,J=13.7,6.9 Hz,Hβ-7,Hβ-7′)，2.56(2H,dd,J=13.7,7.7 Hz,H-7,H-7′)，1.95-1.87(2H,m,H-8,H-8′)。13C NMR(100 MHz，MeOD)δ:148.81(2C,C-3,C-3′)，145.47(2C,C-4,C-4′)，133.89(2C,C-1,C-1′)，122.72(2C,C-6,C-6′)，115.78(2C,C-5,C-5′)，113.40(2C,C-2,C-2′)，62.13(2C,C-9,C-9′)，56.20(3-CH3O,3′-OCH3′)，44.13(2C,C-8,C-8′)，36.06(2C,C-7,C-7′)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[15]，故鑒定化合物1為(-)-開環(huán)異落葉松脂醇[(-)-secoisolariciresinol]。

化合物2：白色無定型粉末(甲醇、氯仿)，ESI-MS m/z為359[M-H]-，提示該化合物的分子量為360，分子式為C20H24O6。1HNMR(400 MHz,MeOD)δ：6.73(1H,d,J=8.0 Hz,H-5)，6.66(1H,d,J=1.8 Hz,H-2)，6.64(1H,s,H-5′)，6.60(1H,dd,J=8.0,1.9 Hz,H-6)，6.17(1H,s,H-2′)，3.79(3H,s,3-OCH3)，3.76(3H,s,3′-OCH3)，3.70-3.66(2H,m,H-9′)，3.66-3.61(1H,m,Hα-9)，3.39(1H,dd,J=11.2,4.0 Hz,Hβ-9)，2.76(2H,d,J=7.7 Hz,H-7′)，2.05-1.93(1H,m,H-8′)，1.81-1.69(1H,m,H-8);13C NMR(126 MHz,MeOD)δ：149.03(C-3′)，147.21(C-3)，145.95(C-4′)，145.29(C-4)，138.63(C-6′)，134.18(C-1)，129.02(C-1′)，123.21(C-6)，117.36(C-5′)，115.99(C-5)，113.82(C-2)，112.40(C-2′)，65.97(C-9′)，62.26(C-9)，56.38(3′-OCH3)，48.04(C-7，C-8)，40.02(C-8′)，33.58(C-7′)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[16]，故鑒定化合物2為(-)異落葉松脂素[(-)-isolariciresinol]。

化合物3：白色無定型粉末(甲醇、氯仿)，易溶于甲醇，ESI-MS m/z為267[M+Na]+，提示該化合物的分子量為244。分子式為C11H16O6。1HNMR(400 MHz,MeOD)δ：6.69(2H,s,H-2,H-6)，4.53(1H,d,J=6.1 Hz,H-7)，3.85(6H,s，3-OCH3,5-OCH3)，3.67(1H,td,J=6.2,4.0 Hz,H-8)，3.50(1H,dd,J=11.3,4.0 Hz,Hα-9)，3.37(1H,dd,J=11.3,6.3 Hz,Hβ-9)；13C NMR(101 MHz,MeOD)δ：149.10(C-3,C-5)，135.99(C-4)，134.05(C-1)，105.19(C-2,C-6)，77.54(C-8)，75.60(C-7)，64.24(C-9)，56.74(3-OCH3,5-OCH3)。以上信息與文獻[17]報道的數(shù)據(jù)一致，故鑒定化合物3為Erythro-1-C-syringylglycerol。

化合物4：無色油狀液體(甲醇)，ESI-MS m/z為195[M+H]+，提示該化合物的分子量為194，分子式為C10H10O4。1HNMR(400 MHz,MeOD)δ：7.60-7.53(1H,m,H-7)，7.08(1H,d,J=7.5 Hz,H-8)，6.93(1H,d,J=8.4 Hz,H-6)，4.55(2H,d,J=4.5 Hz,H-2,H-3)，1.47(3H,dd,J=4.5,1.7 Hz,CH3-2)；13C NMR(126 MHz，MeOD)δ：170.18(C-4)，162.88(C-5)，144.12(Ca-8)，137.79(C-7)，117.75(C-6,C-8)，108.01(Cα-4)，81.61(C-2)，69.52(C-3)，18.16(Cα-2)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[18]，故鑒定化合物4為2-甲基-3，5-羥基色酮[(-)-gynuraone]。

化合物5：白色結(jié)晶(甲醇、氯仿)，ESI-MS m/z為192[M-H]-，提示該化合物的分子量為193,分子式為C14H16O6。1HNMR(400 MHz,DMSO)δ：8.35(1H,s,H-4′)，6.63(2H,s,H-2′,H-6′)，4.63(1H,d,J=6.4 Hz,H-2)，4.48(1H,dd,J=9.4,6.9 Hz,Hβ-8)，4.35(1H,d,J=9.5 Hz,Hα-8)，4.21(1H,t,J=8.6 Hz,Hβ-4)，3.93(1H,s,Hα-4)，3.75(6H,s,3′-OCH3,5′-OCH3)，3.62-3.55(1H,m,H-5)，3.12(1H,dd,J=14.0,6.9 Hz,H-1)；13C NMR(101 MHz,DMSO)δ：178.79(C-6)，147.97(C-3′,C-5′)，135.14(C-4′)，130.00(C-1′)，103.66(C-2′,C-6′)，85.71(C-2)，70.23(C-8)，69.47(C-4)，56.03(3′-OCH3,5′-OCH3)，47.66(C-5)，45.84(C-1)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[19]，故鑒定化合物5為浙貝素(zhebeiresinol)。

化合物6：C10H10O3，黃色固體(甲醇、氯仿)，易溶于甲醇，ESI-MS m/z為177[M-H]-，提示該化合物的分子量為178。分子式為C10H10O3。1HNMR(400 MHz,CDCl3)δ：9.64(1H,d,J=7.8 Hz,H-9)，7.40(1H,d,J=15.8 Hz,H-7)，7.12(dd,J=8.2,1.9 Hz,H-6)，7.06(1H,d,J=1.8 Hz,H-2)，6.96(1H,d,J=8.2 Hz,H-5)，6.59(1H,dd,J=15.8,7.8 Hz,H-7)，6.11(1H,H-8)，3.94(3H,s,3-OCH3)；13C NMR(126 MHz,CDCl3)δ：193.77(C-9)，153.25(C-8)，149.10(C-4)，147.11(C-3)，126.78(C-1)，126.54(C-7)，124.19(C-6)，115.08(C-5)，109.63(C-2)，56.14(3-CH3O)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[20]，故鑒定化合物2為松柏醛(coniferyl aldehyde)。

化合物7:白色針晶(氯仿)，ESI-MS m/z為147[M-H]-，提示該化合物的分子量為148。1HNMR(400 MHz,MeOD)δ：7.67(1H,d,J=16.0 Hz,Hβ-7)，7.62-7.55(2H,m,H-2,H-6)，7.43-7.37(3H,m,H-3,H-4,H-5)，6.48(1H,d,J=16.0 Hz,Hα-8)；13C NMR(126 MHz,MeOD)δ：170.31(C-9)，146.31(1-C)，135.84(C-4)，131.38(C-7)，129.99(C-3,C-5)，129.16(C-2,C-6)，119.35(C-8)。以上信息與文獻報道的數(shù)據(jù)一致[21]，故鑒定化合物7為肉桂酸(cinnamic acid)。

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(2016-07-15收稿 責(zé)任編輯：張文婷)

Chemical Constituents in Cassia Bark

Yang Qiuxia1, Xu Fangfang2, Wu Yunshan2, Liu Bo2, Guo Dean1,2,3

(1GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou, 510006; 2The2ndAffiliatedHospitalofGuangzhouUniversityofChineseMedicine,GuangdongProvincialHospitalofTCM,Guangzhou, 510006; 3ShanghaiInstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofSciences,Shanghai, 201203)

Objective:To study the chemical constituents in Cassia Bark. Methods:Silica gel, ODS, Sephadex LH-20 column chromatography and semi-preparative HPLC were used to isolate and purify the compounds of Cassia Bark. The structures of the compounds were identified on the basis of their physicochemical properties, spectroscopic data, and with the literature. Results:Seven compounds were isolated from the Cassia Bark including (-)-secoisolariciresinol (1), (-)-isolariciresinol (2), Erythro-1-C-syringylglycerol (3), (-)-gynuraone (4), zhebeiresinol (5), coniferyl aldehyde (6), cinnamic acid (7). Conclusion:Compounds 1～3 were isolated from Cassia Bark for the first time. Compounds 4～5 were obtained from this genus plants for the first time.

Cassia Bark; Chemical constituents; Structure elucidation

國家自然科學(xué)基金青年基金項目(編號：81202398)；廣東省科技計劃項目(編號：2013B010102006；2014A020221035；2015A020211025)；廣東省中醫(yī)院中醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)研究專項項目(編號：YN2014ZHR209；YN2015MS03)；國家中醫(yī)藥管理局臨床基地科研專項項目(編號：JDZX2015207)

楊秋霞(1991.10—)，女，碩士，研究方向：中藥標準化與質(zhì)量控制，E-mail:yqxvivid@163.com

劉博(1979.06—)，男，博士，研究員，博士研究生導(dǎo)師，研究方向：中藥活性物質(zhì)化學(xué)研究與結(jié)構(gòu)修飾,E-mail:doctliu@263.net，doctliu@gzucm.edu.cn;果德安(1962.04—)，男，博士，教授，博士研究生導(dǎo)師，中藥標準化技術(shù)國家工程實驗室主任，研究方向：中藥標準化與質(zhì)量控制，E-mail：daguo@simm.ac.cn

R284.2

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.12.068