液相色譜-原子熒光光譜法測(cè)定紫菜中無機(jī)砷的分析

◎李景陽

（滕州市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，山東 滕州 277500）

液相色譜-原子熒光光譜法測(cè)定紫菜中無機(jī)砷的分析

◎李景陽

（滕州市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，山東 滕州 277500）

本文針對(duì)紫菜中無機(jī)砷采用液相色譜-原子熒光光譜法測(cè)定方法的分析。紫菜中的砷主要以一甲基砷酸、二甲基砷酸及砷糖、甜菜堿、砷膽堿等多種形態(tài)存在，根據(jù)原先的分光光度法與原子熒光法無法得到準(zhǔn)確的無機(jī)砷數(shù)值，通過采用價(jià)態(tài)分析法才能得出較為準(zhǔn)確的結(jié)果。

紫菜；無機(jī)砷；方法

目前市場(chǎng)上售賣的紫菜分為非即食干紫菜和即食干紫菜，非即食干紫菜又分為非即食干壇紫菜和非即食干條斑紫菜，紫菜中含有豐富的人體所需的營(yíng)養(yǎng)成分和生理活性物質(zhì)，深受廣大消費(fèi)者喜愛。食品中的砷以不同的形式存在，包括無機(jī)砷和有機(jī)砷，其化學(xué)形態(tài)不同，毒性程度也不相同。紫菜中總砷含量很高，但主要以無毒的砷糖和少量低毒的二甲基砷的形態(tài)存在，而目前國(guó)際上均有無機(jī)砷的含量做評(píng)價(jià)，而測(cè)量方法選擇不當(dāng)就會(huì)引起砷含量超標(biāo)的現(xiàn)象。

干紫菜目前執(zhí)行的是《干紫菜》（GB/T 23597-2009）標(biāo)準(zhǔn)，無機(jī)砷的測(cè)定按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》（GB 5009.11-2014）執(zhí)行，該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定按《食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》（GB/T 5009.11-2003，于2016年3月21日作廢）中無機(jī)砷的測(cè)定中第二法（銀鹽法）測(cè)定無機(jī)砷，取消了食品中無機(jī)砷測(cè)定的原子熒光法和銀鹽法。目前食品中無機(jī)砷的檢驗(yàn)是按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》（GB 5009.11-2014）中的兩種測(cè)定方法，即液相色譜-原子熒光光譜法和液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜法。

1 方法

1.1 主要儀器與試劑

液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀；離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥8 000 r/min；玻璃儀器使用前均經(jīng)（1+4）硝酸浸泡24 h；電子天平：0.1 mg；恒溫干燥箱（50～300 ℃）；砷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，1 000 μg/mL；鹽酸溶液（1+1）：量取適量鹽酸（優(yōu)級(jí)純）加入等量超純水；硼氫化鉀、氫氧化鉀采用優(yōu)級(jí)純?cè)噭粚?shí)驗(yàn)所需試劑其他試劑為分析純，水為超純水。

1.2 分析方法

準(zhǔn)確稱取經(jīng)充分粉碎后的1.0 g樣品（精確到0.001 g），置于50 mL塑料離心管中。加入20 mL 0.15 mol/L HNO3溶液，放置過夜，于90 ℃恒溫箱中熱浸提2.5 h，每0.5 h振搖1 min，提取完畢，取出冷卻至室溫，以8 000 r/min離心15 min，取5 mL上清液置于離心管中，加入5 mL正己烷，振搖1 min后，8 000 r/min離心15 min，棄去上層正己烷。按此過程重復(fù)一次，吸取下層清液，經(jīng)0.45 μm有機(jī)濾膜及C18小柱凈化后進(jìn)樣，按同一操作方法作空白試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 舊標(biāo)準(zhǔn)中的銀鹽法

紫菜中無機(jī)砷的測(cè)定原先采用GB/T 5009.11-2003中的銀鹽法，銀鹽法測(cè)定無機(jī)砷過程繁瑣，前期需要配制很多溶液，制作乙酸鉛棉花，在配制銀鹽溶液時(shí)需要放置過夜，配制好后需放于冰箱內(nèi)冷藏保存。

銀鹽法測(cè)定紫菜中的無機(jī)砷，重復(fù)性不好，對(duì)于含量低測(cè)量準(zhǔn)確度差，結(jié)果誤差大。在對(duì)浸提液用脫脂棉進(jìn)行過濾時(shí)，如用純水沖洗不干凈，會(huì)導(dǎo)致結(jié)果偏低。在濾液合并后超過50 mL，反應(yīng)溶液被稀釋后，導(dǎo)致在規(guī)定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)，反應(yīng)沒有完成，測(cè)定結(jié)果偏低。

2.2 液相色譜-原子熒光光譜法

液相部分流動(dòng)相采用梯度洗脫（兩個(gè)流動(dòng)相交替洗脫）海藻等植物體內(nèi)，砷糖占絕大多數(shù)，而無機(jī)砷的形態(tài)含量極低，一般不超過總砷含量的1%。紫菜的砷形態(tài)測(cè)定譜圖出峰順序是：砷糖、二甲基砷、五價(jià)砷；砷標(biāo)準(zhǔn)溶液形態(tài)測(cè)定譜圖出峰順序是：三甲砷、一甲基砷、二甲基砷、五價(jià)砷。樣品中總無機(jī)砷含量等于三價(jià)砷含量與五價(jià)砷含量之和。本方法檢出限：稱樣量1 g，定容20 mL，方法檢出限：稻米0.02 mg/kg，水產(chǎn)動(dòng)物0.03 mg/kg，嬰幼兒輔助食品樣品0.02 mg/kg。

3 討論

紫菜是人們生活中必不可少的食品，含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其無機(jī)砷含量超標(biāo)，會(huì)帶來很大的恐慌。但是經(jīng)過各級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)和價(jià)態(tài)分析研究，紫菜中的無機(jī)砷含量很低，不會(huì)對(duì)身體造成傷害，之前出現(xiàn)紫菜中無機(jī)砷含量超標(biāo)帶來的恐慌，是由于處理方法不當(dāng)和紫菜含有砷的形態(tài)不同。砷在自然界中以亞砷酸鹽、砷酸鹽、單甲基砷酸、二甲基砷酸、砷甜菜堿、砷膽堿、三甲基氧化砷、四甲基砷、二甲基乙基砷、二甲基乙酰砷、砷糖A、B、C、D等多種形態(tài)存在［4］。

目前紫菜中無機(jī)砷檢測(cè)按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》（GB 5009.11-2014）中的液相色譜-原子熒光光譜法和液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜法。這兩種方法實(shí)用、可靠。原先銀鹽法處理過程中不注重細(xì)節(jié)就會(huì)導(dǎo)致結(jié)果偏低，檢驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性較差，且這種方法不適合大批量檢測(cè)，效率比較低?，F(xiàn)在第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)一般都配備液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀，應(yīng)用原子熒光形態(tài)分析（LC-AFS）（液相與原子熒光聯(lián)用）方法作為檢測(cè)方法的首個(gè)國(guó)家級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。在新標(biāo)準(zhǔn)未頒布時(shí)，很多專業(yè)人士為探討紫菜等藻類中無機(jī)砷的真實(shí)含量，采用高效液相色譜原子熒光光度法聯(lián)用技術(shù)（LC-AFS）對(duì)紫菜中的無機(jī)砷含量及其砷的形態(tài)進(jìn)行分析研究，得出了初步的研究結(jié)果［3］。還有學(xué)者根據(jù)氫化物原子熒光法存在的前處理問題采用超聲波提取原子熒光光度法測(cè)定紫菜中的無機(jī)砷含量。關(guān)于紫菜中無機(jī)砷的測(cè)定，采用液相色譜-原子熒光光譜法，為得到更準(zhǔn)確、可靠結(jié)果，要不斷分析研究，注重前處理過程中的細(xì)節(jié)，得出準(zhǔn)確可靠的分析結(jié)果。

［1］中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì). GB 5009.11-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷和無機(jī)砷的測(cè)定［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2014.

［2］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GB 19643-2005/XG1-2007《藻類制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)第1號(hào)修改單［S］. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007.

［3］吳成業(yè)，錢卓真，吳抒懷，等.紫菜中無機(jī)砷含量的分析研究［J］.福建水產(chǎn)，2010（1）：29-32.

［4］李海敏，張 勇.砷的形態(tài)分析方法研究進(jìn)展［J］.理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊(cè)），2006，42（4）：315-320.

Analysis the Inorganic Arsenic in Seaweed by LC- AFS

Li Jingyang
（Tengzhou Supervison Testing Institute of Product Quality， Tengzhou 277500， China）

This paper analysis the inorganic arsenic in seaweed by liquid chromatographyatom fluorescence spectrometry. Arsenic in seaweed exists mainly in the form of a variety of methyl arsenate， dimethyl arsenate and arsenic sugar， betaine， arsenic choline， according to the original points spectrophotometric method and atomic fluorescence method is unable to obtain the accurate arsenic numerical， through the use of valence state analysis method in order to obtain more accurate results.

Seaweed； Inorganic arsenic； Method

O657

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.042