食品檢驗(yàn)中多重PCR技術(shù)應(yīng)用

◎羅鵬程

（固原市市場(chǎng)監(jiān)管檢驗(yàn)檢測(cè)中心，寧夏 固原 756000）

食品檢驗(yàn)中多重PCR技術(shù)應(yīng)用

◎羅鵬程

（固原市市場(chǎng)監(jiān)管檢驗(yàn)檢測(cè)中心，寧夏 固原 756000）

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我國(guó)的食品安全問(wèn)題日益突出。食品安全是關(guān)乎國(guó)計(jì)民生的大事，影響著人們的日常生活和工作健康。近些年，各大媒體相繼報(bào)道了食物中毒的新聞事件，細(xì)菌污染是食物中毒最主要的原因。國(guó)內(nèi)制定了相關(guān)的食物病原菌的檢驗(yàn)方法，但這些檢驗(yàn)方法耗費(fèi)大量時(shí)間，且國(guó)內(nèi)試劑供應(yīng)存在不配套等問(wèn)題，使食物中毒病原菌的檢驗(yàn)方法不能滿足我國(guó)公共衛(wèi)生的需求。本文立足于PCR的概念，對(duì)在食品檢驗(yàn)中多重PCR技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)行科學(xué)有效的闡述，為我國(guó)的食品安全提供保障。

食品檢驗(yàn)；PCR技術(shù)；原理；應(yīng)用分析

1 PCR簡(jiǎn)介

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction， PCR）又被稱為無(wú)細(xì)胞克隆系統(tǒng)，是在20世紀(jì)80年代興起的一種分子生物學(xué)新技術(shù)。應(yīng)用PCR技術(shù)可以在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)讓微量的特定DNA片段迅速的擴(kuò)增到百萬(wàn)倍。該項(xiàng)技術(shù)具有高靈敏度、強(qiáng)特異性等特點(diǎn)，這些優(yōu)點(diǎn)使得PCR迅速發(fā)展，應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣［1］，在基因的克隆、醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)和食品科學(xué)等領(lǐng)域都有應(yīng)用。

2 食品檢驗(yàn)中多重PCR技術(shù)的應(yīng)用

2.1 在病原菌檢驗(yàn)測(cè)的應(yīng)用研究

造成食品污染的病原菌較多，主要有腸出血性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌和耐藥球菌等。在檢測(cè)這些微生物時(shí)，易受其他微生物的影響，因而在檢驗(yàn)的過(guò)程中準(zhǔn)確率不高。當(dāng)前的多項(xiàng)研究均是采用多重PCR技術(shù)對(duì)這些病原菌進(jìn)行檢測(cè)。

2.2 在食品非致病菌檢測(cè)中的應(yīng)用

密閉環(huán)境下主要的微生物是乳酸菌，針對(duì)真空食品包裝而言，其乳酸菌的含量普遍不高。但不排除在儲(chǔ)藏的過(guò)程中進(jìn)行繁殖的可能性，采用多重PCR技術(shù)對(duì)真空包裝中的微生物進(jìn)行檢測(cè)，可以檢驗(yàn)食品中是否會(huì)出現(xiàn)腐敗變質(zhì)［2］。

2.3 食品微生物檢測(cè)中應(yīng)用多重PCR技術(shù)存在的問(wèn)題

在食品微生物檢測(cè)中應(yīng)用多重PCR技術(shù)不可避免地會(huì)存在一些問(wèn)題，導(dǎo)致引物與非靶序列的結(jié)合產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。因而在應(yīng)用多重PCR技術(shù)時(shí)需要對(duì)引物進(jìn)行科學(xué)合理的設(shè)計(jì)，通過(guò)對(duì)多重PCR技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化分析可最大限度地減少非特異性擴(kuò)增，減少假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。

2.4 免疫PCR

免疫PCR是以DNA分子作為標(biāo)記物，在發(fā)生免疫反應(yīng)后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增和電泳分析。一般情況下，免疫PCR多采用生物素作為連接的分子。生物素都有兩個(gè)獨(dú)立的結(jié)合位點(diǎn)，其中一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與DNA分子進(jìn)行結(jié)合，另一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與抗原2抗體復(fù)合物上的親和素結(jié)合，實(shí)現(xiàn)DNA分子與抗原抗體復(fù)合物的有效連接，進(jìn)而形成一定的復(fù)合物［3］。

3 結(jié)語(yǔ)

隨著PCR技術(shù)的發(fā)展，其在食品檢驗(yàn)領(lǐng)域也獲得了普遍的應(yīng)用，不同于傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法，PCR具有高靈敏性、快速性以及操作便捷性等各種優(yōu)勢(shì)，雖然當(dāng)前的PCR技術(shù)還存在一定缺陷，但是相信在PCR技術(shù)不斷完善與發(fā)展的過(guò)程中，該技術(shù)必定能在食品檢驗(yàn)甚者更多的領(lǐng)域發(fā)揮積極的作用。

［1］栗建永，趙 琢，賈曉川，等.食源性致病菌檢測(cè)分析技術(shù)的研究進(jìn)展［J］. 食品研究與開發(fā)，2013（18）：110-115.

［2］周蓓莉，肖進(jìn)文，劉生峰，等.食品中3種致病菌多重PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用［J］.食品科技，2012（6）：312-315.

［3］周明東，張臣偉，張海濱，等.食源性致病菌快速檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2012（10）：169-176.

Application of Multi-PCR Technology in Food Inspection

Luo Pengcheng
（Guyuan Market Supervison and Inspection Center， Guyuan 756000， China）

With the development of social economy， food safety aroused people's concern gradually. Food safety problems affect people's daily life， work and health as well as related to national economy. In recent years， the media had reported that the food poisoning news events and bacterial contamination is the main reason. Our country made the inspection method of food poisoning pathogenic bacteria， but these test methods take a long time， the existence of problems make food poisoning pathogenic bacteria testing method can't adapt to the needs of the public health event emergency treatment better. In this paper， based on the concept and technical principle of PCR， introduce the application of multiple PCR technique in food inspection carries on the scientific and effective.

Food inspection； PCR； Principle； Application analysis

TS201

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.015