苜草素對不同生長階段蛋雞免疫系統(tǒng)的增強(qiáng)作用

石瑜

（吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，吉林長春　130000）

苜草素對不同生長階段蛋雞免疫系統(tǒng)的增強(qiáng)作用

石瑜

（吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，吉林長春130000）

白細(xì)胞介素2(IL-2)，也叫做T細(xì)胞生長因子，在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用，可以促進(jìn)T細(xì)胞亞群發(fā)育，還能夠加快B細(xì)胞繁殖的速率，因此，它是調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的重要因子，它在淋巴細(xì)胞的生長和分化中起著重要的作用，如抗體應(yīng)答、造血和腫瘤監(jiān)測等。IL-2是所有細(xì)胞因子佐劑中研究得最深入最廣泛的細(xì)胞因子之一，能夠直接激活單核細(xì)胞，能夠加快T細(xì)胞分化過程以及繁殖過程，加快B細(xì)胞分化過程以及繁殖過程，促進(jìn)分泌抗體，激發(fā)LAK等細(xì)胞生長，并且形成強(qiáng)大的細(xì)胞溶解性。不管是細(xì)胞免疫或者是體液免疫，IL-2都有正向促進(jìn)作用，但對前者更有效用。

本研究以不同生長階段的蛋雞（育成期、產(chǎn)蛋期、產(chǎn)蛋后期）為試驗(yàn)對象，通過測定影響蛋雞抗病能力的相關(guān)免疫指標(biāo)，研究不同添加劑量對各個生長階段的蛋雞血清中IL-2變化的影響，進(jìn)而為蛋雞生產(chǎn)中苜草素的使用提供理論實(shí)踐依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料苜草素：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所飼料添加劑研究室為本次實(shí)驗(yàn)提供的苜草素，是從紫花苜蓿中通過現(xiàn)代提取工藝技術(shù)生產(chǎn)的純植物成分飼料添加劑，其主要有效成分為多糖18.63%，黃酮5.89%，皂苷5.68%。

1.2方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)：本研究包括3個試驗(yàn)階段：育成期、產(chǎn)蛋期、產(chǎn)蛋后期，每個階段選取288只試驗(yàn)雞，隨機(jī)分為4組，對照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組；這4組均設(shè)置了6個重復(fù)組，每個重復(fù)組有12只雞。4組雞都用基礎(chǔ)糧食喂養(yǎng)，同時(shí)給3個試驗(yàn)組飲水中添加苜草素500mg/L，1000 mg/L，1500mg/L；本次試驗(yàn)在天津某蛋雞養(yǎng)殖場進(jìn)行，其中預(yù)飼期為1周，正式試驗(yàn)期為10周。

1.2.2雞白細(xì)胞介素2ELISA檢測方法試劑盒檢測標(biāo)本內(nèi)IL-2的含量采用雙抗體夾心法。即采取純化IL-2抗體包被制造的固相抗體，向其微孔內(nèi)順序注入IL-2，并同HRP標(biāo)記的IL-2抗體聯(lián)系，最終產(chǎn)生抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的一類復(fù)合物，運(yùn)用相應(yīng)洗滌方法并注入底物TMB顯色。TMB可以在HRP酶環(huán)境下催化并且轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色，于酸相應(yīng)作用下轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。因此，最終顏色的區(qū)別同樣品內(nèi)IL-2呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系?？梢圆扇∶笜?biāo)儀設(shè)定450nm波長的環(huán)境下檢測吸光度的數(shù)值（即OD值），最后運(yùn)用得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線測定樣品內(nèi)所含有IL-2的濃度。

2　試驗(yàn)結(jié)果

育成期蛋雞對照組血清中IL-2的含量基本上沒有變化，各試驗(yàn)組雞血清中IL-2的含量隨著時(shí)間的增加有所增長，且添加劑量越多，增長效果越明顯。產(chǎn)蛋期蛋雞血清中IL-2的含量比育成期含量高，且各試驗(yàn)組雞血清中白細(xì)胞介素含量也隨著添加時(shí)間的變化越來越高。產(chǎn)蛋后期蛋雞血清中對照組IL-2的含量隨著時(shí)間的變化有所下降，但是添加苜草素的各對照組雖然也有所下降，但是下降速度比較緩慢。

由各組IL-2的含量變化結(jié)果可知，在蛋雞飲水中添加苜草素有提高IL-2的分泌作用，且試驗(yàn)Ⅲ組均略高于試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組，這說明飲水中添加苜草素的劑量與白細(xì)胞介素的含量呈正相關(guān)，但是是否添加劑量越高IL-2的分泌量越高有待進(jìn)一步研究。

3　討論

IL-2對蛋雞免疫系統(tǒng)的影響：IL-2也叫做T細(xì)胞生長因子，在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用，可以促進(jìn)T細(xì)胞亞群發(fā)育，還能夠加快B細(xì)胞繁殖的速率，因此，它是調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的重要因子，它在淋巴細(xì)胞的生長和分化中起著重要的作用，如抗體應(yīng)答、造血和腫瘤監(jiān)測等。在人醫(yī)上，IL-2作為一種免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用到臨床。IL-2是所有細(xì)胞因子佐劑中研究得最深入最廣泛的細(xì)胞因子之一，能夠直接激活單核細(xì)胞，能夠加快T細(xì)胞分化過程以及繁殖過程，加快B細(xì)胞分化過程以及繁殖過程，促進(jìn)分泌抗體，激發(fā)LAK等細(xì)胞生長，并且形成強(qiáng)大的細(xì)胞溶解性。不管是細(xì)胞免疫或者是體液免疫，IL-2都有正向促進(jìn)作用，但對前者更有效用。從檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)可發(fā)現(xiàn)，添加苜草素的各階段蛋雞血清中IL-2的含量均有不同程度的提高。

4　小結(jié)

與對照組相比，飲水中添加苜草素的試驗(yàn)組對顯著增高了三個生長階段蛋雞血清中IL-2的含量，且這三個試驗(yàn)組有一定的差異，添加苜草素的量越多的試驗(yàn)Ⅲ組，白細(xì)胞介素的分泌量也越高，但是是否添加苜草素的量越大，IL-2的分泌量越高，還有待進(jìn)一步的研究。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．11.014

石瑜（1981～），天津市人，獸醫(yī)師，在職研究生，主要從事動物疫病實(shí)驗(yàn)室診斷與檢測