Tsport在肺結(jié)核及肺外結(jié)核診斷中的價值

李卓

【摘要】 目的 探討肺結(jié)核及肺外結(jié)核診斷中采用結(jié)核感染T細(xì)胞（Tsport）檢測的臨床意義。方法 200例疑似結(jié)核患者， 分別采用結(jié)核菌試驗法（TST法）與結(jié)核感染T細(xì)胞（Tsport）檢測法進(jìn)行檢測， 對比兩種檢測方法對結(jié)核診斷的特異性、靈敏性、假陰性率以及假陽性率。結(jié)果 200例患者共有62例確診， 包括53例肺結(jié)核患者和9例肺外結(jié)核患者；采用兩種檢測方法后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 Tsport檢測是較靈敏和特異的快速檢測結(jié)核分枝桿茵感染的方法， 可用于結(jié)核病的快速診斷， 對控制活動性結(jié)核的發(fā)生與再發(fā)生、潛伏性結(jié)核感染的預(yù)防、肺外結(jié)核的輔助診斷等具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)核??；結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗法；結(jié)核菌試驗法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.05.045

據(jù)我國流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示， 因結(jié)核病而死亡的人數(shù)年均高達(dá)13萬余人， 主要源于人體感染結(jié)核病菌后， 其會對機(jī)體內(nèi)的多器官組織造成較大傷害， 且臨床癥狀較為復(fù)雜， 尤其當(dāng)肺外結(jié)核所導(dǎo)致的臨床癥狀不典型或病情呈隱匿性變化時， 臨床漏、誤診率極高， 故而有必要加大結(jié)核病陽性檢出率。本院在結(jié)核病診斷中， 采用了Tsport法， 其特異性與靈敏性較高， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年10月～2013年10月接收的疑似結(jié)核病患者200例， 其中男152例， 女48例， 年齡7～85歲， 平均年齡（48.5±10.4）歲。表現(xiàn)為不明原因發(fā)熱， 但臨床癥狀不明顯， 影像學(xué)檢查顯示正常。其診斷參照患者的臨床表現(xiàn)、病原學(xué)檢查、影像學(xué)檢查、組織病理學(xué)檢查結(jié)果以及抗癆治療反應(yīng)等。

1. 2 方法 患者分別行TST法與Tsport法進(jìn)行檢測， 具體方法如下。①TST法：選取0.1 ml的PPD（內(nèi)含5 U結(jié)核菌素）行前臂尺側(cè)皮內(nèi)試驗， 2～3 d后觀察結(jié)果， 硬結(jié)直徑≥10 mm則視為陽性。②Tsport法：結(jié)核感染T細(xì)胞檢測試劑盒由上海復(fù)興長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供。采集量如下：>10歲， 8 ml靜脈血；2～9歲兒童， 4 ml靜脈血；<2歲兒童， 2 ml靜脈血。分離出外周血單個核細(xì)胞（PBMC）， 將陽性對照物、陰性培養(yǎng)液、B抗原濾液培養(yǎng)蛋白10以及A抗原早期分泌性靶抗原6分別加入已包被抗IFN-r抗體微量板的4個孔中；將濃度為2×105的PBMC加入4個孔中， 于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)放置20 h （37℃環(huán)境下）；PBS溶液經(jīng)處理后將抗r干擾素（堿性磷酸酶標(biāo)記）， 孵育2 h （室溫下）， PBS溶液洗脫處理后顯色， 并以PBS溶液終止反應(yīng)， 而后計算點數(shù)， 當(dāng)測量孔點數(shù)比陰性對照組多出5個或是陰性對照組的2倍及以上時則視為陽性。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察并對比兩種檢測方法對結(jié)核診斷的特異性、靈敏性、假陰性率以及假陽性率。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 臨床診斷結(jié)果 本組200例患者共有62例患者確診。包括53例肺結(jié)核患者和9例肺外結(jié)核患者。

2. 2 兩種檢測方法與最終診斷結(jié)果比較 采用兩種檢測方法后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

中國是結(jié)核菌感染高負(fù)擔(dān)國家， 患者人數(shù)居全球第二位。結(jié)核病是一種慢性傳染性疾病， 病原體具有持久性。具體表現(xiàn)為“五多”， 即感染人數(shù)多、患病人數(shù)多、潛伏感染人數(shù)多、新發(fā)患者多、死亡人數(shù)多。其傳染性、潛伏性、難清除性、再活動性、致病復(fù)雜性等防治難點使結(jié)核病防治成為首要任務(wù)。新發(fā)結(jié)核病例來自潛伏性結(jié)核感染人群， 潛伏性結(jié)核感染人群數(shù)量巨大。新增活動性結(jié)核患者每年約145萬人。控制活動性結(jié)核患者必須通過鑒別“高危人群”“預(yù)防性治療”， “免疫接種”來控制潛伏性結(jié)核感染。傳統(tǒng)的診斷結(jié)核病的方法有很多不足， 臨床實驗室最常用的檢測手段就是痰標(biāo)本涂片的抗酸染色、BD-960結(jié)核菌的快速培養(yǎng)及傳統(tǒng)L-J羅氏培養(yǎng)（羅培）、結(jié)核抗體檢測等。痰涂片陽性檢出率低， 結(jié)核抗體檢測特異性低， 敏感度差， BD-960結(jié)核菌的快速培養(yǎng)與傳統(tǒng)培養(yǎng)方法比較雖然縮短了檢測時間， 但其陽性檢出率受標(biāo)本采集等眾多因素影響仍然不高。應(yīng)用結(jié)核感染T細(xì)胞檢測技術(shù)， 可提高結(jié)核分枝桿菌的陽性率， 24 h報告檢測結(jié)果， 為臨床疾病的準(zhǔn)確快速的診斷提供理論依據(jù)。Tsport試驗對結(jié)核病的早期、快速、準(zhǔn)確診斷明顯優(yōu)于TST， 是特異性和靈敏度高的結(jié)核分枝桿菌輔助診斷試驗。其檢測樣本靈活， 創(chuàng)傷性小， 可對外周血、胸水、腹水、腦脊液、心包積液等標(biāo)本進(jìn)行結(jié)核感染T檢測?？筛鶕?jù)樣本類型， 進(jìn)一步結(jié)合影像學(xué)檢查可對肺外結(jié)核進(jìn)行診斷或者是輔助診斷。對于臨床癥狀不明顯和影像學(xué)檢查顯示正常者， 可通過結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對潛伏性結(jié)核分枝桿菌感染者進(jìn)行預(yù)防性治療或觀察。對兒童結(jié)核病進(jìn)行輔助診斷， 克服了兒童干咳、無痰（用其他方法幾乎無法檢測）的弊端等對臨床上痊愈的活動性結(jié)核病， 應(yīng)用Tsport技術(shù)控制其發(fā)生與再發(fā)生。本研究結(jié)果顯示， 患者行TST法與Tsport法進(jìn)行檢測后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， Tsport檢測是較靈敏和特異的快速檢測結(jié)核分枝桿茵感染的方法， 可用于結(jié)核病的快速診斷。對控制活動性結(jié)核的發(fā)生與再發(fā)生、潛伏性結(jié)核感染的預(yù)防、肺外結(jié)核的輔助診斷等具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 肖倩， 黃旭峰. T-spot.TB試驗快速檢測結(jié)核桿菌感染的臨床應(yīng)用研究.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)， 2009， 27（3）：272-274.

[2] 白旭華， 霍萬學(xué).結(jié)核桿菌感染T細(xì)胞介導(dǎo)免疫應(yīng)答研究的新進(jìn)展.微生物學(xué)雜志， 2012， 32（1）：75-79.

[3] 榮蘭香， 馬淑紅， 艾清， 等. T-spot.TB試驗與PPD試驗對結(jié)核病患者診斷價值相關(guān)性比較.中國實驗診斷學(xué)， 2013， 17（8）： 1475-1476.

[4] 孟小蓉， 包勇.結(jié)核感染T細(xì)胞檢測在結(jié)核病合并終末期腎病透析患者中的早期診斷價值.中華肺部疾病雜志（電子版）， 2013， 10（3）：129-130.

[收稿日期：2015-10-14]