辣椒葉醇提物的體外抗氧化活性

邱愛東，茍琳，肖紅梅，王娜

（1．成都學(xué)院（成都大學(xué)）生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院，四川成都 610106；2．四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，四川雅安 625014）

辣椒葉醇提物的體外抗氧化活性

邱愛東1，茍琳2，肖紅梅2，王娜2

（1．成都學(xué)院（成都大學(xué)）生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院，四川成都 610106；2．四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，四川雅安 625014）

摘 要：探討辣椒葉抗氧化作用，采用乙醇提取辣椒葉醇提物，測(cè)定其總黃酮含量，并考察該提取物體外總抗氧化活性以及清除超氧陰離子自由基、羥自由基和DPPH自由基的能力。結(jié)果表明辣椒葉總黃酮含量為4.2%，醇提取物具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性和清除自由基的活性。辣椒葉中含有黃酮以及抗氧化活性成分，具有明顯抗氧化作用。

關(guān)鍵詞：辣椒葉；乙醇提取物；抗氧化

辣椒為茄科辣椒屬植物，目前對(duì)辣椒的研究和利用主要集中在辣椒的果實(shí)，其果實(shí)富含VC、辣椒堿和辣椒素等生物活性成分，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與保健作用，常用作蔬菜和調(diào)味品，具有抗氧化[1-2]、抗菌[3]、助消化[4]、降壓[5]和降脂減肥等功能[6]。但利用辣椒果實(shí)的同時(shí)所產(chǎn)生的大量辣椒葉利用率卻非常低，僅少量用于食用和作為飼料，絕大多數(shù)的辣椒葉則被廢棄，未能充分利用，造成資源浪費(fèi)。為提高辣椒的綜合利用價(jià)值，我們以辣椒葉為試材，采用乙醇浸提得辣椒葉醇提取物，測(cè)定其總黃酮含量，進(jìn)而研究辣椒葉醇提物的抗氧化作用，以辣椒葉醇提物總抗氧化活性和清除超氧陰離子自由基、羥自由基、DPPH自由基的能力評(píng)價(jià)其抗氧化能力，關(guān)于此方面的研究較為少見。本文旨在為辣椒葉的綜合開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

辣椒葉采自四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)場(chǎng)，經(jīng)鑒定為Caps icum.annuumL.的葉。二苯代苦味?；杂苫―PPH·）、蘆?。╮utin）購(gòu)自Sigma公司。乙醇，硝酸鋁，亞硝酸鈉，氫氧化鈉和鄰苯三酚等試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

BS210S電子分析天平：Sartorins公司；UV1240型紫外可見分光光度計(jì)：Shimadzu公司；HH-S恒溫水浴鍋：江蘇國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠；RE2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海亞榮生化儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 辣椒葉乙醇提取液的制備

辣椒葉洗凈，吸水后60℃烘干，粉碎并過80目篩備用。取辣椒葉粉5.0 g，按1∶40料液比加入60%乙醇溶液，在 60℃下，浸提 1 h，8 000 r/min，離心 15 min，收集上清。再重復(fù)浸提一次，合并上清液減壓濃縮至一定體積，60%乙醇溶液定容至50 mL，得質(zhì)量濃度為0.1 g/mL辣椒葉乙醇提取液。

1.2.2 辣椒葉乙醇提取液總黃酮測(cè)定

采用硝酸鋁-亞硝酸鈉法[7]測(cè)定。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定A510值，吸光值A(chǔ)為橫坐標(biāo)，蘆丁濃度C（μg/mL）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程。

辣椒葉乙醇提取液稀釋到一定濃度，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定其吸光值A(chǔ)，由回歸方程計(jì)算出辣椒葉乙醇提取液總黃酮的含量以及辣椒葉總黃酮的含量。

1.2.3 辣椒葉乙醇提取液總抗氧化活性測(cè)定

方法[8]，測(cè)定不同濃度辣椒葉乙醇提取液總抗氧化活性，以A695的值表示抗氧化活性的強(qiáng)弱，A695的值越大，則抗氧化活性越強(qiáng)；反之則越弱。

1.2.4 辣椒葉乙醇提取液對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用

按文獻(xiàn)方法[9]，檢測(cè)不同濃度辣椒葉乙醇提取液對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力。

1.2.5 辣椒葉乙醇提取液對(duì)羥自由基的清除作用

采用Fenton法[7]，在檢測(cè)體系中加入不同濃度的辣椒葉乙醇提取液，測(cè)定A510的值，計(jì)算辣椒葉乙醇提取液對(duì)羥自由基的清除率。

1.2.6 辣椒葉乙醇提取液對(duì)DPPH自由基的清除作用

參照汪海波方法[10]，測(cè)定不同濃度辣椒葉乙醇提取液對(duì)DPPH自由基活性的影響，并計(jì)算其清除率。

2 結(jié)果與分析

2.1 辣椒葉乙醇提取液總黃酮含量

由蘆丁標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線得回歸方程：y=980.25x-3.854 9，R2=0.999 9，推算得知 0.1 g/mL（質(zhì)量濃度）辣椒葉乙醇提取液黃酮含量為4.2 mg/mL，而辣椒葉總黃酮含量為4.2%。

2.2 辣椒葉乙醇提取液總抗氧化活性

辣椒葉乙醇提取液總抗氧化活性，結(jié)果見圖1。

圖1 辣椒葉乙醇提取液總抗氧化活性Fig.1 Total antioxidant activities of ethanol extracts from chili pepper leaves

由圖1可見，在測(cè)定范圍內(nèi)，吸光度的變化隨提取液濃度的增加而逐漸增加，結(jié)果顯示辣椒葉總抗氧化活性隨提取液濃度的加大而增強(qiáng)，呈明顯的量效關(guān)系。

2.3 辣椒葉乙醇提取液清除超氧陰離子自由基

辣椒葉乙醇提取液清除超氧陰離子自由基，結(jié)果見圖2。

圖2 辣椒葉乙醇提取液對(duì)O2-·的清除Fig.2 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on O2-·

圖2顯示，在測(cè)定范圍內(nèi)，辣椒葉乙醇提取液對(duì)O2-·有一定程度的清除作用，隨辣椒葉乙醇提取液濃度增加清除率增加，當(dāng)提取液濃度為0.125 mg/mL～0.75 mg/mL時(shí)，清除率較弱；而當(dāng)濃度為0.75 mg/mL～1 mg/mL時(shí)，則有明顯的清除效果。

2.4 辣椒葉乙醇提取液清除羥自由基

辣椒葉乙醇提取液清除羥自由基，結(jié)果見圖3。

圖3 辣椒葉乙醇提取液對(duì)·OH的清除Fig.3 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on·OH

從圖3可見，辣椒葉乙醇提取液對(duì)·OH有較強(qiáng)的清除作用，隨著乙醇提取液濃度的增加，對(duì)·OH的清除能力也逐漸增強(qiáng)，并呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系，當(dāng)提取液濃度為12.5mg/L時(shí)，清除率可達(dá)99%，而IC50=4.30mg/mL。

2.5 辣椒葉乙醇提取液清除DPPH自由基

辣椒葉乙醇提取液清除DPPH自由基，結(jié)果見圖4。

圖4 辣椒葉乙醇提取液對(duì)DPPH·的清除Fig.4 Scavenging activities of ethanol extracts from chili pepper leaves on DPPH·

圖4顯示，辣椒葉乙醇提取液對(duì)DPPH自由基的清除作用，隨提取液濃度的增加，清除率明顯增加，當(dāng)提取液濃度為0.25 mg/L時(shí)，清除率可達(dá)75%，而IC50=0.21 mg/mL。

3 結(jié)論

本研究以辣椒葉為材料，經(jīng)乙醇提取得辣椒葉醇提物，測(cè)定該醇提物黃酮含量，并對(duì)其體外總抗氧化活性以及清除超氧陰離子自由基、羥基自由基和DPPH自由基的能力進(jìn)行了檢測(cè)，這是一種體外篩選抗氧化物質(zhì)的常用方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，辣椒葉中含有黃酮，其含量為4.2%，而且此醇提物經(jīng)總抗氧化活性測(cè)定顯示較強(qiáng)的抗氧化能力，總抗氧化活性隨醇提物濃度升高而增強(qiáng)，進(jìn)一步研究醇提物對(duì)超氧陰離子自由基、羥基自由基和DPPH自由基的清除能力，發(fā)現(xiàn)對(duì)以上3種自由基均有清除作用，但強(qiáng)弱不同，表現(xiàn)為清除DPPH自由基的能力強(qiáng)于羥基自由基和超氧陰離子自由。這些研究結(jié)果揭示了辣椒葉中黃酮的存在，同時(shí)也預(yù)示辣椒葉中含有抗氧化活性成分。因此，這項(xiàng)研究將為辣椒葉的開發(fā)和利用提供有利的參考。

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Antioxidant Activities of Ethanol Extracts from Chili Pepper Leaves（ In Vitro）

QIU Ai-dong1，GOU Lin2，XIAO Hong-mei2，WANG Na2
（1.School of Bio-industry，Chengdu college（Cheng Du University），Chengdu 610106，Sichuan，China；2.Sichuan Agriculture University，Ya'an 625014，Sichuan，China）

Abstract：Antioxidant effects were investigated from leaves of chili pepper.Ethanol extracts was extracted from leaves of chili pepper with ethanol in order to measure the content of total flavonoids and analyze the total antioxidant activity，superoxide anion，hydroxyl and DPPH free radical scavenging activity.It was found that total flavonoids was 4.2%in the leaves of chili pepper and ethanol extracts exhibited strong antioxidant activity power and scavenging effect against free radicals.Pepper leaves contain flavonoids，and antioxidant components，had antioxidant effects.

Key words：chili pepper leaves；ethanol extracts；antioxidant

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.13.002

成都學(xué)院（成都大學(xué)）?；?010XJ22

邱愛東（1969—），男（漢），高級(jí)工程師，博士，從事功能性食品，生物制藥。

2012-10-19