酶抑制法檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析

趙陽(yáng)

（開原市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，遼寧 開原 112300）

酶抑制法檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析

趙陽(yáng)

（開原市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，遼寧 開原 112300）

目前對(duì)于蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)的研究有很多，傳統(tǒng)的氣相色譜分析和液相色譜分析技術(shù)由于設(shè)備和操作方法的限制，不能大規(guī)模推廣。酶抑制法具有檢測(cè)快速、設(shè)備簡(jiǎn)單、精度較高等優(yōu)勢(shì)，近年來(lái)發(fā)展很快。

酶抑制法；有機(jī)磷農(nóng)藥；檢測(cè)技術(shù)；植物酯酶

有機(jī)磷農(nóng)藥最早在20世紀(jì)30年代開始研制使用，1944年世界范圍內(nèi)就出現(xiàn)了100多種有機(jī)磷殺蟲劑。目前，有機(jī)磷農(nóng)藥在我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用較廣，過(guò)量使用及清潔不完全造成的農(nóng)藥殘留嚴(yán)重威脅著人們的身體健康。酶抑制法是一種簡(jiǎn)便、靈敏、經(jīng)濟(jì)的快速檢測(cè)方法，其是基于有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)酶活性的抑制作用。用酶抑制法測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥的毒性最為直接、最為專一，且方法靈敏，對(duì)前處理步驟要求低，在較短的時(shí)間就能得到檢測(cè)結(jié)果。

1 酶抑制法檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

1.1 樣品前處理技術(shù)

檢測(cè)樣品的前處理過(guò)程包含提取過(guò)程和凈化過(guò)程。提取是指將蔬菜中的農(nóng)藥溶解分離出來(lái)的操作步驟，現(xiàn)階段使用效果較好的提取劑有乙酸、甲醇、乙醇等，而采用輔助設(shè)備能有效提高提取效率。凈化指的是取出樣品中無(wú)關(guān)成分干擾的過(guò)程，對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品來(lái)說(shuō)，有機(jī)分子的成分復(fù)雜，特別是大分子的蛋白質(zhì)和氨基酸嚴(yán)重影響提取結(jié)果，對(duì)于目標(biāo)農(nóng)藥的檢測(cè)會(huì)造成較大的影響。SPE萃取技術(shù)是現(xiàn)階段應(yīng)用較廣的有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)前處理技術(shù)，先進(jìn)的SPE萃取技術(shù)是一種結(jié)合了液固萃取和色譜技術(shù)的新型有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)萃取技術(shù)。萃取柱是一種以氧化鋁、硅膠等具有較強(qiáng)吸附能力的物質(zhì)為主的離子交換柱，該項(xiàng)技術(shù)具有溶劑使用量小、重復(fù)性高、環(huán)境友好等諸多優(yōu)點(diǎn)，在實(shí)際應(yīng)用中與高壓液相色譜技術(shù)相結(jié)合，能有效檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。

1.2 乙酰膽堿酯酶檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

乙酰膽堿酯酶檢測(cè)技術(shù)所依據(jù)的昆蟲毒理學(xué)原理是：有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)于昆蟲中樞神經(jīng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)有一定影響，主要體現(xiàn)在乙酰膽堿酯酶的活性方面，導(dǎo)致乙酰膽堿的傳輸障礙并積累，昆蟲中毒致死。含有有機(jī)磷農(nóng)藥的樣品在前處理工藝的處理之后，加入到酶和底物的混合液中，反應(yīng)之后加入顯色劑，然后測(cè)定樣品的吸光度，就能夠計(jì)算出膽堿酯酶的抑制程度，通過(guò)抑制率與農(nóng)藥殘留濃度的相關(guān)關(guān)系方程式，就能夠完成對(duì)于蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)。該方法主要用到分光光度計(jì)。

根據(jù)酶促反應(yīng)的反映動(dòng)力學(xué)原理，當(dāng)蔬菜中不存在有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，則底物會(huì)在酶的作用下分解，反應(yīng)速率可以通過(guò)吸光值隨時(shí)間的變化速率求出。當(dāng)反應(yīng)混合物中存在有機(jī)磷農(nóng)藥，則會(huì)在一定程度上抑制酶的活性，從而對(duì)顯色體系的反應(yīng)速率造成一定影響，此時(shí)求得吸光度隨時(shí)間的變化速率，有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留濃度可以通過(guò)兩者的數(shù)量關(guān)系求得［1］。

1.3 植物酯酶抑制方法

乙酰膽堿酯酶方法的主要缺點(diǎn)在于使用成本較高，在此背景下，部分學(xué)者研究了植物酯酶抑制方法。植物酶具有來(lái)源豐富、制取方便等優(yōu)勢(shì)。使用植物酯酶抑制方法，逐漸建立起相應(yīng)的薄層-植物酯酶抑制技術(shù)。與乙酰膽堿酯酶一樣，該技術(shù)也是應(yīng)用了有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)于植物酯酶的抑制作用，當(dāng)蔬菜中殘留了有機(jī)磷農(nóng)藥，則反應(yīng)就會(huì)受到抑制，反應(yīng)產(chǎn)物相對(duì)減少，顯色劑顯示出的顏色變化就能夠?qū)r(nóng)藥殘留量進(jìn)行判斷［2］。

2 結(jié)語(yǔ)

有機(jī)磷農(nóng)藥在我國(guó)蔬菜殺蟲中應(yīng)用非常廣泛，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥并非一種安全農(nóng)藥，蔬菜中殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)食用者身體健康影響較大。本文分析了現(xiàn)階段應(yīng)用較為成熟的乙酰膽堿酯酶檢測(cè)技術(shù)和植物酯酶檢測(cè)技術(shù)，該項(xiàng)技術(shù)的推廣能夠在一定程度上推進(jìn)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步。

［1］邱朝坤，劉曉宇，任紅敏，等.酶抑制法檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.食品與機(jī)械，2010（2）：40-42，71.

［2］王小紅.酶抑制法檢測(cè)蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法研究［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

S481.8

A

1674-7909（2016）30-93-1

趙陽(yáng)（1979-），男，大專，助理農(nóng)藝師，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)。