前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清白細胞介素-6、-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白及轉(zhuǎn)移灶中骨形成蛋白的表達變化及意義

郭津津　李英杰　辛璐璐

(滄州市中心醫(yī)院泌尿外一科,河北　滄州　061000)

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前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清白細胞介素-6、-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白及轉(zhuǎn)移灶中骨形成蛋白的表達變化及意義

郭津津李英杰辛璐璐

(滄州市中心醫(yī)院泌尿外一科,河北滄州061000)

摘要〔〕目的探討前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中白細胞介素(IL)-6、IL-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白(sTfR)、骨形成蛋白(BMP)等指標的表達變化及其臨床意義。方法選擇86例前列腺癌患者作為研究對象，其中發(fā)生前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的患者有36例(骨轉(zhuǎn)移組)、未發(fā)生轉(zhuǎn)移的50例(前列腺癌組)，選取前列腺良性增生患者50例(前列腺增生組)，比較三組患者血清中IL-6、IL-10、sTfR的水平差異，同時分析前列腺癌組織中、轉(zhuǎn)移病灶中BMP6、BMP4及BMP7的表達強度差異。結果骨轉(zhuǎn)移組患者的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平顯著高于前列腺癌組和前列腺增生組(P<0.05)；前列腺癌組患者的PSA水平顯著高于前列腺良性增生組(P<0.05)。前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清IL-6、IL-10、sTfr值與PSA水平具有顯著的相關性，相關系數(shù)分別為0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。免疫組化染色結果顯示：骨轉(zhuǎn)移組患者的BMP6、BMP4、BMP7評分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均顯著高于前列腺癌組〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。結論前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清IL-6、IL-10、PSA水平顯著增高，sTfR值顯著降低，并與PSA呈相關性；前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的轉(zhuǎn)移病灶組織中BMP6、BMP4及BMP7表達顯著高于前列腺癌組織中的表達。

關鍵詞〔〕前列腺癌骨轉(zhuǎn)移；白細胞介素-6；轉(zhuǎn)鐵蛋白；骨形成蛋白

第一作者：郭津津(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事泌尿系腫瘤的臨床治療研究。

骨轉(zhuǎn)移是影響前列腺癌患者病情進展以及生存率的重要因素，其體內(nèi)白細胞介素(IL)-6含量與前列腺腫瘤的發(fā)生關系密切，通過對腫瘤特異性抗原及腫瘤細胞的增殖水平進行干預，進而影響腫瘤的進展，且與遠處轉(zhuǎn)移及分期有關〔1〕。前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者體內(nèi)IL-10、轉(zhuǎn)鐵蛋白(sTfR)以及骨形成蛋白(BMP)等指標也有不同程度改變。本研究探討IL-6、IL-10、sTfR以及BMP6等指標在前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者中的表達變化及其臨床意義。

1材料與方法

1.1一般材料以本院泌尿外科收集的86例前列腺癌患者及50例前列腺良性增生患者作為研究對象，分為骨轉(zhuǎn)移組36例，年齡59～78〔平均(67.24±6.18)〕歲；前列腺癌組(未發(fā)生轉(zhuǎn)移)50例，年齡56～79〔平均(66.82±6.47)〕歲；前列腺增生組50例，年齡54～75〔平均(65.18±7.44)〕歲。三組患者的年齡構成無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，具有較好的均衡性。

納入標準：以前列腺穿刺活檢結果作為前列腺癌患者的診斷標準，以全身核素骨掃描檢查結果作為前列腺癌骨轉(zhuǎn)移診斷依據(jù)，以經(jīng)尿道前列腺切除術(TURP)術后病理結果作為前列腺良性增生的診斷依據(jù)。所有患者在標本采集前均未接受放療或化療治療。

排除標準：既往有泌尿系統(tǒng)腫瘤病史及手術史的患者；急性炎癥反應期的患者；肝功能異常的患者；具有心、肺、肝、腎功能疾病的患者。

1.2樣本采集患者入院后，取清晨空腹肘靜脈5 ml，注入到不抗凝試管凝固后，3 000 r/min離心15 min，提取血清放置-70℃保存待測。

1.3檢測方法血清IL-6、IL-10、sTfR含量的檢測采用ELISA法，按照ELISA試劑盒的操作說明對相應樣本進行檢測。

采用免疫組化EnVision法對前列腺癌組組織、轉(zhuǎn)移病灶標本中BMP6、BMP4及BMP7的表達強度進行檢測：樣本用10%甲醛進行固定，并用石蠟進行包埋后切片，平均片厚約2 μm，脫蠟后采用3%雙氧水室溫下孵育5～10 min，清除內(nèi)源性的過氧化氫酶活性。蒸餾水清洗3次后置入磷酸鹽緩沖液進行浸泡，5 min后置于95℃的環(huán)境下，15 min后降至室溫進行冷卻。將新配制的二氨基聯(lián)苯胺溶液滴于切片上，顯色3 min后置于顯微鏡下進行觀察，蒸餾水充分沖洗后使用蘇木紫進行再次染色，脫水后封片。

結果判定標準：細胞質(zhì)或細胞核著色為棕黃色為陽性，按照著色強度進行分級，無色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分，褐色為3分；顯微鏡下著色陽性細胞計數(shù)：1%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；兩個得分項目相加為總分?？偡郑?3分為陰性，3分為弱陽性、4分為陽性，>5分為強陽性。

1.4統(tǒng)計學方法應用SPSS17.0軟件。計量資料比較采用單因素方差分析及SNK-q檢驗、t檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析法。

2結果

2.1三組患者血清IL-6、IL-10、sTfR、PAS水平比較三組的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平比較具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；骨轉(zhuǎn)移組的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平顯著高于前列腺癌組和前列腺增生組(P<0.05)；前列腺癌組患者的PSA水平顯著高于前列腺良性增生組(P<0.05)。見表1。

2.2骨轉(zhuǎn)移組患者的血清PSA水平與IL-6、IL-10、sTfR檢測值的相關性分析前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清IL-6、IL-10、sTfR值與PSA水平具有顯著的相關性，相關系數(shù)分別為0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。

2.3前列腺癌組癌組織中、骨轉(zhuǎn)移組患者轉(zhuǎn)移病灶的BMP6、BMP4、BMP7免疫組化染色結果免疫組化染色結果顯示：骨轉(zhuǎn)移組患者的BMP6、BMP4、BMP7評分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均顯著高于前列腺癌組〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。見圖1。

表1　三組患者IL-6、IL-10、sTfR、PSA檢測值比較

與前列腺增生組比較:1)P<0.05，與前列腺癌組比較:2)P<0.05

圖1　前列腺癌組、骨轉(zhuǎn)移組患者標本中BMP4、BMP6、BMP7免疫組化檢測結果

3討論

骨轉(zhuǎn)移是影響前列腺癌患者病情進展以及生存率的重要因素，其主要病理學特征為前列腺癌組織同時伴有骨母細胞的活躍增生以及大量溶骨性或混合性的新骨形成〔2〕。普通型前列腺癌在光鏡下表現(xiàn)為正常的大腺泡結構消失，變?yōu)閳A形或卵圓形的小腺體，增生的小腺體可呈瘤樣、乳頭狀的大腺泡結構。腺腔內(nèi)可見淀粉樣小體消失，基底層消失〔3〕。

機體內(nèi)IL-6含量與前列腺腫瘤的發(fā)生關系密切，通過對腫瘤特異性抗原及腫瘤細胞的增殖水平進行干預，進而影響腫瘤的進展，且與遠處轉(zhuǎn)移及分期有關，是一種在細胞生成、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤發(fā)生和炎癥反應中均起到重要作用的細胞因子，其受體異常表達還和多種自身免疫性疾病、多發(fā)性骨髓瘤及多種實體腫瘤密切相關〔4〕。腫瘤細胞分泌的IL-6通過兩種途徑對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展進行調(diào)節(jié)，一是通過自分泌途徑與自身靶細胞的IL-6受體(IL-6R)結合，進而產(chǎn)生作用；二是通過旁分泌途徑作用于其他細胞表面的IL-6R而發(fā)生生物學效應〔5〕。一旦IL-6 與IL-6R之間的相互協(xié)調(diào)作用異常，會導致內(nèi)環(huán)境紊亂，進而導致造血、免疫以及內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的紊亂，甚至誘發(fā)惡性腫瘤〔6〕。Kobayashi等〔7〕研究顯示，在前列腺癌的癌變過程中，IL-10水平和腫瘤分化程度與腫瘤淋巴結、局部與遠處轉(zhuǎn)移有關，認為這可能與IL-10通過抑制IL-12和γ-干擾素(IFN-γ)來抑制免疫反應，進而產(chǎn)生免疫抑制、促進腫瘤發(fā)生和進展，同時在放療中導致炎癥反應加劇。PSA是目前前列腺癌診斷的主要指標，其敏感度可達93.82%，但由于前列腺癌的早期臨床癥狀并不明顯，因此當檢測到PSA升高時，已經(jīng)預示著癌癥的發(fā)生〔8〕。BMP6作為BMPs家族中的成員，通過BMP6或SMAD途徑信號轉(zhuǎn)導并刺激鐵調(diào)素，進而調(diào)節(jié)機體內(nèi)鐵的平衡〔9〕。sTfR則可以對前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的貧血程度進行判斷。本研究結果顯示，對前列腺癌患者進行IL-6、IL-10、sTfR以及PSA檢測可以提高前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的早期檢出率，進而提高患者的治愈率以及生存率，提高患者的生存質(zhì)量〔10〕。BMP結合IL-6、IL-10、sTfR值與PSA水平對前列腺病變診斷及預測其發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的潛能比單個指標更有效。

參考文獻4

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9洪鐘亮,毛云鋒,徐倩.前列腺癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的研究概況〔J〕.中國臨床藥理學雜志,2014；30(1):58-60.

10鄭潤泉,欒兆輝,秦云龍,等.Wnt信號通路在前列腺癌中的研究進展〔J〕.中國老年學雜志,2012；32(16):3579-82.

〔2014-12-17修回〕

(編輯袁左鳴)

通訊作者：李英杰(1964-)，男，主任醫(yī)師，主要從事泌尿系腫瘤的臨床治療研究。

中圖分類號〔〕R739〔

文獻標識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2016)01-0109-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.049