文│劉曉晨(山東省安丘市景芝畜牧獸醫(yī)管理站)
一起禽腺病毒感染的診治
文│劉曉晨(山東省安丘市景芝畜牧獸醫(yī)管理站)
肉雞心包積液綜合征也叫安卡拉病,是禽腺病毒I群的病毒引起的以肝臟腫大、心包積液為特點的疾病。近年該病在國內(nèi)部分蛋雛雞、817肉雞、麻雞及三黃雞養(yǎng)殖密集區(qū)成流行態(tài)勢,該病發(fā)病突然,死亡率高,無有效藥物治療,給發(fā)病養(yǎng)殖場戶造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。筆者結(jié)合一線臨床經(jīng)歷,介紹一起典型病例的診治。
2015年9月初,山東省德州市一家817肉雞養(yǎng)殖戶老板來電,主訴其飼養(yǎng)的肉雞發(fā)生一種“怪病”,雞群毫無征兆地在21日齡突然發(fā)病,病雞無癥狀突然死亡,發(fā)病4天,4500多只雞死亡超過1200多只。雞群無呼吸道疾病,糞便也無異常,剖檢主要病變?yōu)楦文[大、心包積液,用什么藥都不管用,因害怕就淘汰了整個雞群。另一養(yǎng)殖戶養(yǎng)了6000多只雞,遇到同樣的情況,要求實驗室檢測查找病因。
養(yǎng)殖戶帶病死雞前來就診,主訴其飼養(yǎng)817肉雞多年,有一定養(yǎng)殖經(jīng)驗,此種情況還是第一次遇到。該批肉雞進(jìn)雛6000多只,7日齡進(jìn)行了精品新流二聯(lián)及新支H120免疫,12日齡雞痘刺種,未免疫其他疫苗。21日齡前雞群狀態(tài)良好,原本打算22日齡時飲水免疫新城疫活疫苗,但是上午發(fā)現(xiàn)有部分雞只精神不振,下午雞只死亡增多,26日齡時雞群突然死亡近300只,27日齡時死亡了近400只,發(fā)病后雞群飲水中投了氨芐青霉素、維生素C、電解速補(bǔ)等,就診時間是28日齡,死亡還在增加。雞群采食未見減少,飲水無異常,排便正常。雞群無咳嗽、氣喘、打噴嚏等呼吸道疾病的示癥癥狀。表面上看,雞群似乎正常,但是一旦發(fā)現(xiàn)有雞打蔫,半天至1天時間就會死亡。雞舍加熱是水暖式,加熱煤爐在舍外,糞便定期清理,并且通風(fēng)系統(tǒng)良好,可以排除煙煤或者氨氣中毒的可能。
觀察發(fā)病雞,發(fā)現(xiàn)發(fā)病雞羽毛松亂,精神不振,閉目瞌睡,很快蹲臥(圖1)。發(fā)病小公雞雞冠發(fā)蔫、顏色發(fā)黃。病雞糞便稀薄,淺黃綠色,且尿酸鹽增多(圖2)。
◎圖1 病雞羽毛松亂,精神不振
◎圖2 淺黃綠色稀便
主要病變在肝臟、心臟及腎臟??梢娦陌e液,心包囊中有淡黃色清亮液體,心肌緊縮(圖3);肝臟腫大變色,泛白,發(fā)黃,有出血點或小出血斑(圖4);腎腫大,淤血出血,部分有尿酸鹽沉積(圖5、6);部分有肺水腫出血;脾臟淤血(圖7);胸腺出血(圖8);氣管、胃、腸道病變不明顯。
◎圖3 心包積液
◎圖4 肝腫大發(fā)黃有出血點(斑)
◎圖5 腎腫出血
◎圖6 腎腫尿酸鹽沉積
◎圖7 脾臟淤血
◎圖8 胸腺出血
1.細(xì)菌分離。對多只病死雞的心血、肝組織進(jìn)行細(xì)菌分離,極個別可分離到少量雜菌。
2.病毒分離。
(1)無菌取病死雞的肝臟、腎臟、肺臟等病料按1∶5加生理鹽水研磨,反復(fù)凍融3次,3000轉(zhuǎn)/分鐘高速離心,取上清液,接種10日齡SPF雞胚,37℃培養(yǎng),每天照蛋觀察至96小時,雞胚死亡(有的毒株不致死雞胚),收取尿囊液進(jìn)行HA檢測,無血凝性。
(2)病料上清液及雞胚尿囊液PCR檢測禽流感(H5)、新城疫、傳染性支氣管炎(腎型),全部為陰性。
(3)從處理樣品中,采用試劑盒提取RNA,設(shè)計I亞群腺病毒引物,利用一步法進(jìn)行PCR檢測,1%瓊脂糖凝膠電泳,成像系統(tǒng)顯示檢測樣品中含有I亞群腺病毒目的性基因片段(圖9)。初步診斷為I亞群腺病毒感染引起的。
◎圖9 PCR電泳圖M:Marker DL2000;1:陰性對照;2:樣品;3:陽性對照
3.回歸實驗。病料上清液加雙抗接種1日齡SPF雞,接種后48小時內(nèi)發(fā)病,很快死亡,出現(xiàn)典型的皮下出血、心包積液、肝腫大、肺出血、腎出血等病變(圖10)。
4.結(jié)論。
(1)雞群發(fā)病不是細(xì)菌感染引起的,個別雞有繼發(fā)感染現(xiàn)象。
(2)雞群發(fā)病可以排除新城疫、禽流感及傳染性支氣管炎等病毒性病因。
(3)病料回歸SPF雞可引起發(fā)病,說明病料中有病原存在。
(4)PCR檢測病料上清液及雞胚尿囊液,顯示腺病毒I群陽性,說明該病由禽腺病毒引起。
目前該病無有效藥物治療。
1.電話回訪該老板,雞群28日齡死亡700多只,養(yǎng)殖戶不敢繼續(xù)養(yǎng)殖,雞群提前淘汰。
2.由于雞傳染性法氏囊病病毒和雞傳染性貧血的貧血因子可能增強(qiáng)腺病毒的致病性,首先應(yīng)控制或清除這兩種病毒。
3.腺病毒的抵抗力較強(qiáng),從環(huán)境中清除腺病毒比較難,此種病毒極易經(jīng)雞胚傳至另一雞群。因此,預(yù)防該病必須從原種禽場做起,建議從腺病毒檢測陰性的種雞場引進(jìn)雛雞。據(jù)了解,4家養(yǎng)殖戶同期從同一個孵化場進(jìn)雛共3萬只,其他3戶的2.4萬多只雞暫未發(fā)病,可能該病與早期感染關(guān)系不大。
◎圖10 回歸實驗病死雞剖檢病變圖
4.該病只能提前預(yù)防,可適當(dāng)增加營養(yǎng)以增強(qiáng)雞群體質(zhì),選用無霉變的飼料原料配制全價日糧;平時加強(qiáng)雞場的消毒及生物安全措施,防止疫病傳入。低日齡雞群發(fā)病后期,可適當(dāng)添加強(qiáng)力霉素、環(huán)丙沙星等不傷腎的抗生素,以防繼發(fā)感染;飲水中添加復(fù)方丹參沖劑及巰甲丙脯酸,對癥治療,有一定效果。