血清抗微生物抗體檢測(cè)診斷炎癥性腸病的意義探究

李 璇，潘 芳，劉 楊

血清抗微生物抗體檢測(cè)診斷炎癥性腸病的意義探究

李 璇，潘 芳，劉 楊

血清；微生物；抗體；炎癥性腸病

炎癥性腸病（inflammatory bowel disease，IBD）是各種腸道炎疾病的泛稱，一般是累及回腸、直腸／結(jié)腸的病癥都可稱為炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和克羅恩病（Crohn＇S disease，CD）兩種亞型。IBD屬于病因尚未明確的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，具有病程長(zhǎng)、易反復(fù)的特點(diǎn)，若長(zhǎng)期患病會(huì)對(duì)患者的生理、心理和生活能力等方面產(chǎn)生重大影響。目前的研究表明，腸道黏膜免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng)在IBD的發(fā)病中起重要作用，一些患者的免疫性抗體的作用逐漸被發(fā)現(xiàn)。比如核周型抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體（perinuclear anti－neutrophil cytoplasmic antibody，pANCA）和血清抗釀酒酵母抗體 （anti－saccharomyces cerevisiae antibody，ASCA）在IBD與非IBD、UC與CD的鑒別中有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值，而對(duì)其他一些微生物血清抗體的研究也逐漸增多［1，2］。因此，筆者通過(guò)測(cè)定ASCA、anti－Omp C、anti－I2和anti－CBirl在血清中的表達(dá)水平，從而探究血清抗微生物抗體在IBD診斷與鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1．1 一般資料選擇2012年8月—2014年8月入住筆者所在醫(yī)院的炎癥性腸病患者80例，其中CD患者61例 ［男47例，女14例，平均年齡 （36．1± 15．2）歲，以活動(dòng)期患者居多］，UC患者19例［男13例，女6例，平均年齡（46．1±14．3）歲，以中度患者居多］；根據(jù)IBD組患者的性別與年齡比，從健康體檢者內(nèi)收集沒(méi)有遺傳性家族病史、無(wú)自身免疫病與腹瀉者共57例為健康對(duì)照組，男44例，女13例，平均年齡（41．4±13．4）歲。所有患者全部接受病理組織學(xué)與結(jié)腸鏡檢測(cè)（健康對(duì)照組除外），且標(biāo)本的采集全部經(jīng)過(guò)受試者同意。

1．2 檢測(cè)方法每位受檢者均在早晨空腹采集2 ml靜脈血，經(jīng)離心后收集血清，在－20℃的環(huán)境下保存?zhèn)溆?。采用免疫熒光法?duì)4種抗體進(jìn)行檢測(cè)，所用試劑均由德國(guó)歐蒙公司提供（EURO MMUN），具體操作方法如下。生物薄片中的基質(zhì)主要為釀酒用酵母菌與由乙醇所固定的中性粒細(xì)胞。在反應(yīng)平板上滴加稀釋后的血清，后將生物薄片覆于其上，于室溫下靜置30 min，取出后用PBS進(jìn)行沖洗，然后再用PBS浸泡5 min，搖勻，熒光標(biāo)記的抗體點(diǎn)陣于另一反應(yīng)平板上，按照上述方法進(jìn)行處理，最后在顯微鏡下觀察。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析選擇SPSS18．0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0．05時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

不同分組中各血清抗體陽(yáng)性率的比較：ASCA在炎癥性腸病組和克羅恩病組的陽(yáng)性率明顯比健康對(duì)照組高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0．05），anti－OmpC、anti－I2在炎癥性腸病組的陽(yáng)性率低于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），對(duì)于其他對(duì)比組間的血清抗體陽(yáng)性率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0．05），見(jiàn)表1。

表1 不同分組中各血清抗體陽(yáng)性率的比較

3 討論

潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病都屬于炎癥性腸病，能夠正確地診斷IBD的發(fā)病原因是根治這種疾病的基礎(chǔ)。由于IBD的病因尚不明確，沒(méi)有直接的技術(shù)手段或特征檢測(cè)來(lái)具體診斷。目前，針對(duì)IBD的臨床診斷依據(jù)主要為臨床表現(xiàn)、藥理學(xué)、放射學(xué)、內(nèi)鏡和實(shí)驗(yàn)室檢查等方面，在排除其他原因引起腸道炎癥的基礎(chǔ)上得出的。大概有10%左右的UC和CD患者不能相互鑒別，只能作為不確定性結(jié)腸性（In determinate colitis，IC）［3］。不過(guò)，隨著IBD免疫學(xué)機(jī)制的研究取得較多成果，血清學(xué)標(biāo)志物在鑒別方面起到了一定價(jià)值，特別是一些與之相關(guān)的免疫特異性抗體慢慢被發(fā)現(xiàn)，為展開(kāi)非創(chuàng)傷性診斷和鑒別診斷提供了新的途徑和方法。特別是近年來(lái)，炎癥性腸病患者血清個(gè)微生物抗體的檢測(cè)已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用于臨床，比如抗釀酒酵母抗體（ASCA）、大腸埃希菌外膜孔道蛋白C抗體（anti－Omp C）、熒光假單胞菌相關(guān)序列I2抗體（anti－I2）、細(xì)菌鞭毛蛋白抗體（anti－CBirl），但是相關(guān)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析的報(bào)道很少［4］。

許多研究學(xué)者認(rèn)為，IBD的發(fā)病多半有一些微生物起作用，其中腸道對(duì)正常菌群的異常免疫應(yīng)答和腸道共生菌的失調(diào)都可能使患者發(fā)病。上述的抗體在血清學(xué)反應(yīng)中產(chǎn)生，表明自身腸道菌群抗原的免疫反應(yīng)可能促使了IBD的發(fā)病。當(dāng)前，ASCA和pANCA被認(rèn)為是診斷UC和CD的最佳血清抗體，研究成果已納入2010年世界胃腸病學(xué)實(shí)踐指南。然而，在國(guó)內(nèi)的研究中，兩抗體的聯(lián)合應(yīng)用在國(guó)人的IBD鑒別診斷中沒(méi)有實(shí)際效果［5］。在CD的患者的血清中能夠發(fā)現(xiàn) anti－OmpC、anti－I2和 anti－CBirl，具有較高的特異度，然而由于敏感度較低，不利于在臨床中實(shí)際應(yīng)用。以上抗體的產(chǎn)生還可能與疾病的程度、并發(fā)癥的情況、治療手段等有關(guān)，所以這些抗體在國(guó)人的應(yīng)用效果和臨床意義仍然要進(jìn)一步研究。

根據(jù)在IBD患者血清抗微生物抗體中的結(jié)果分析，ASCA陽(yáng)性對(duì)于國(guó)人的IBD的鑒別診斷具有一定的實(shí)際意義。另外，還可以通過(guò)anti－I2的診斷結(jié)果應(yīng)用于ASCA陰性CD的患者的輔助診斷。而另外兩種血清抗微生物抗體anti－OmpC和anti－CBirl在國(guó)人的IBD診斷及鑒別UC和CD方面的意義不大，主要因?yàn)槠涿舾卸群完?yáng)性率比較低，檢測(cè)效果較差。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能與所采取的樣本數(shù)目產(chǎn)生偏差，該研究中UC的個(gè)體數(shù)目較少，此類抗體與IBD的基因型和發(fā)病程度、發(fā)病時(shí)長(zhǎng)等因素的相關(guān)性還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。不過(guò)，ASCA陽(yáng)性對(duì)于國(guó)人的IBD的鑒別診斷有很大的研究意義。

［1］張 婷，陳 燁，王中秋，等．炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標(biāo)的關(guān)系［J］．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，（10）：1474－1477，1498．

［2］謝 睿，李全朋．炎癥性腸病免疫發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展［J］．醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2013，26（2）：206－210．

［3］邢亞威，劉春玉，張?jiān)禄ǎ龋装Y性腸病患者髓系細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體－1與COX－2的表達(dá)及其意義［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41（14）：2598－2600．

［4］周云仙，陳 焰．炎癥性腸病患者飲食調(diào)查與分析［J］．中華護(hù)理雜志，2013，48（10）：914－916．

［5］徒文靜，徐桂華．自我管理理論在炎癥性腸病患者中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］．中華護(hù)理雜志，2014，49（2）：220－225．

［2015-10-15收稿，2015-11-13修回］ ［本文編輯：吳 蓉］

R446.5

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10.14172/j.issn1671-4008.2016.04.012

450000河南鄭州，解放軍153醫(yī)院（李璇，潘芳）；276003山東臨沂，臨沂市人民醫(yī)院（劉楊）