李 璇,潘 芳,劉 楊
血清抗微生物抗體檢測診斷炎癥性腸病的意義探究
李 璇,潘 芳,劉 楊
血清;微生物;抗體;炎癥性腸病
炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease,IBD)是各種腸道炎疾病的泛稱,一般是累及回腸、直腸/結(jié)腸的病癥都可稱為炎癥性腸病,主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)和克羅恩?。–rohn'S disease,CD)兩種亞型。IBD屬于病因尚未明確的慢性非特異性腸道炎癥性疾病,具有病程長、易反復(fù)的特點(diǎn),若長期患病會(huì)對(duì)患者的生理、心理和生活能力等方面產(chǎn)生重大影響。目前的研究表明,腸道黏膜免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng)在IBD的發(fā)病中起重要作用,一些患者的免疫性抗體的作用逐漸被發(fā)現(xiàn)。比如核周型抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA)和血清抗釀酒酵母抗體 (anti-saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA)在IBD與非IBD、UC與CD的鑒別中有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值,而對(duì)其他一些微生物血清抗體的研究也逐漸增多[1,2]。因此,筆者通過測定ASCA、anti-Omp C、anti-I2和anti-CBirl在血清中的表達(dá)水平,從而探究血清抗微生物抗體在IBD診斷與鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。
1.1 一般資料選擇2012年8月—2014年8月入住筆者所在醫(yī)院的炎癥性腸病患者80例,其中CD患者61例 [男47例,女14例,平均年齡 (36.1± 15.2)歲,以活動(dòng)期患者居多],UC患者19例[男13例,女6例,平均年齡(46.1±14.3)歲,以中度患者居多];根據(jù)IBD組患者的性別與年齡比,從健康體檢者內(nèi)收集沒有遺傳性家族病史、無自身免疫病與腹瀉者共57例為健康對(duì)照組,男44例,女13例,平均年齡(41.4±13.4)歲。所有患者全部接受病理組織學(xué)與結(jié)腸鏡檢測(健康對(duì)照組除外),且標(biāo)本的采集全部經(jīng)過受試者同意。
1.2 檢測方法每位受檢者均在早晨空腹采集2 ml靜脈血,經(jīng)離心后收集血清,在-20℃的環(huán)境下保存?zhèn)溆谩2捎妹庖邿晒夥▽?duì)4種抗體進(jìn)行檢測,所用試劑均由德國歐蒙公司提供(EURO MMUN),具體操作方法如下。生物薄片中的基質(zhì)主要為釀酒用酵母菌與由乙醇所固定的中性粒細(xì)胞。在反應(yīng)平板上滴加稀釋后的血清,后將生物薄片覆于其上,于室溫下靜置30 min,取出后用PBS進(jìn)行沖洗,然后再用PBS浸泡5 min,搖勻,熒光標(biāo)記的抗體點(diǎn)陣于另一反應(yīng)平板上,按照上述方法進(jìn)行處理,最后在顯微鏡下觀察。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析選擇SPSS18.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn),當(dāng)P<0.05時(shí),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
不同分組中各血清抗體陽性率的比較:ASCA在炎癥性腸病組和克羅恩病組的陽性率明顯比健康對(duì)照組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05),anti-OmpC、anti-I2在炎癥性腸病組的陽性率低于健康對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),對(duì)于其他對(duì)比組間的血清抗體陽性率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05),見表1。
表1 不同分組中各血清抗體陽性率的比較
潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病都屬于炎癥性腸病,能夠正確地診斷IBD的發(fā)病原因是根治這種疾病的基礎(chǔ)。由于IBD的病因尚不明確,沒有直接的技術(shù)手段或特征檢測來具體診斷。目前,針對(duì)IBD的臨床診斷依據(jù)主要為臨床表現(xiàn)、藥理學(xué)、放射學(xué)、內(nèi)鏡和實(shí)驗(yàn)室檢查等方面,在排除其他原因引起腸道炎癥的基礎(chǔ)上得出的。大概有10%左右的UC和CD患者不能相互鑒別,只能作為不確定性結(jié)腸性(In determinate colitis,IC)[3]。不過,隨著IBD免疫學(xué)機(jī)制的研究取得較多成果,血清學(xué)標(biāo)志物在鑒別方面起到了一定價(jià)值,特別是一些與之相關(guān)的免疫特異性抗體慢慢被發(fā)現(xiàn),為展開非創(chuàng)傷性診斷和鑒別診斷提供了新的途徑和方法。特別是近年來,炎癥性腸病患者血清個(gè)微生物抗體的檢測已經(jīng)開始應(yīng)用于臨床,比如抗釀酒酵母抗體(ASCA)、大腸埃希菌外膜孔道蛋白C抗體(anti-Omp C)、熒光假單胞菌相關(guān)序列I2抗體(anti-I2)、細(xì)菌鞭毛蛋白抗體(anti-CBirl),但是相關(guān)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析的報(bào)道很少[4]。
許多研究學(xué)者認(rèn)為,IBD的發(fā)病多半有一些微生物起作用,其中腸道對(duì)正常菌群的異常免疫應(yīng)答和腸道共生菌的失調(diào)都可能使患者發(fā)病。上述的抗體在血清學(xué)反應(yīng)中產(chǎn)生,表明自身腸道菌群抗原的免疫反應(yīng)可能促使了IBD的發(fā)病。當(dāng)前,ASCA和pANCA被認(rèn)為是診斷UC和CD的最佳血清抗體,研究成果已納入2010年世界胃腸病學(xué)實(shí)踐指南。然而,在國內(nèi)的研究中,兩抗體的聯(lián)合應(yīng)用在國人的IBD鑒別診斷中沒有實(shí)際效果[5]。在CD的患者的血清中能夠發(fā)現(xiàn) anti-OmpC、anti-I2和 anti-CBirl,具有較高的特異度,然而由于敏感度較低,不利于在臨床中實(shí)際應(yīng)用。以上抗體的產(chǎn)生還可能與疾病的程度、并發(fā)癥的情況、治療手段等有關(guān),所以這些抗體在國人的應(yīng)用效果和臨床意義仍然要進(jìn)一步研究。
根據(jù)在IBD患者血清抗微生物抗體中的結(jié)果分析,ASCA陽性對(duì)于國人的IBD的鑒別診斷具有一定的實(shí)際意義。另外,還可以通過anti-I2的診斷結(jié)果應(yīng)用于ASCA陰性CD的患者的輔助診斷。而另外兩種血清抗微生物抗體anti-OmpC和anti-CBirl在國人的IBD診斷及鑒別UC和CD方面的意義不大,主要因?yàn)槠涿舾卸群完栃月时容^低,檢測效果較差。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能與所采取的樣本數(shù)目產(chǎn)生偏差,該研究中UC的個(gè)體數(shù)目較少,此類抗體與IBD的基因型和發(fā)病程度、發(fā)病時(shí)長等因素的相關(guān)性還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。不過,ASCA陽性對(duì)于國人的IBD的鑒別診斷有很大的研究意義。
[1]張 婷,陳 燁,王中秋,等.炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標(biāo)的關(guān)系[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,(10):1474-1477,1498.
[2]謝 睿,李全朋.炎癥性腸病免疫發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2013,26(2):206-210.
[3]邢亞威,劉春玉,張?jiān)禄?,等.炎癥性腸病患者髓系細(xì)胞表達(dá)觸發(fā)受體-1與COX-2的表達(dá)及其意義[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2014,41(14):2598-2600.
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[5]徒文靜,徐桂華.自我管理理論在炎癥性腸病患者中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中華護(hù)理雜志,2014,49(2):220-225.
[2015-10-15收稿,2015-11-13修回] [本文編輯:吳 蓉]
R446.5
B
10.14172/j.issn1671-4008.2016.04.012
450000河南鄭州,解放軍153醫(yī)院(李璇,潘芳);276003山東臨沂,臨沂市人民醫(yī)院(劉楊)