高血糖對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纖維化形成的影響及機(jī)制探討

項 標(biāo) 杜衛(wèi)東 夏 超 陳士明

高血糖對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纖維化形成的影響及機(jī)制探討

項 標(biāo) 杜衛(wèi)東 夏 超 陳士明

目的探討高血糖對非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝纖維化形成的影響及機(jī)制。方法將60只SD大鼠隨機(jī)數(shù)字法分成正常對照組、高血糖模型組、高血糖伴NASH組、氨基胍組和虎杖組，分別檢測各組大鼠血糖值，病理學(xué)變化（HE染色），纖維化程度，肝組織基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）和晚期糖基化終產(chǎn)物（AGEs）含量的變化及各組大鼠α-平滑肌動蛋白（α-SMA）、結(jié)蛋白（desmin）的表達(dá)評分。結(jié)果（1）血糖：氨基胍組和虎杖組大鼠血糖[（14.20±11.74）/（5.25±0.92）mmol/L]低于高血糖組[（22.20±1.70）mmol/L]和NASH組[（22.21±5.49）mmol/L]（均P＜0.05）；（2）病理學(xué)改變：與正常對照組比較，高血糖組和NASH組肝組織出現(xiàn)細(xì)胞變性和纖維化改變。與NASH組比較，虎杖組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)形態(tài)較正常，只有較輕度水腫、脂肪變性等炎性改變，未見明顯纖維化；α-SMA[（4.92±1.69）分]、Desmin[（4.75±1.75）分]表達(dá)及TIMP-1[（3473.76±372.06）pg/mL]、TGF-β1[（125.26±28.60）ng/mL]、AGEs[（75.86±22.36）ng/mL]含量也顯著降低（均P＜0.01）。氨基胍組肝組織脂肪變性、水樣變性、纖維化程度有所減輕，α-SMA表達(dá)增高（9.00±2.04）分（P＜0.05），TIMP-1[（3543.67±377.05）pg/mL]、AGEs[（75.86±22.35）ng/mL]含量降低（P均＜0.01），同時TGF-β1表達(dá)減低[（145.31±43.14）ng/mL]，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論高血糖可促進(jìn)NASH大鼠肝纖維化形成，降低血糖和減少AGEs形成可減輕或抑制肝纖維化的發(fā)生；作用機(jī)制之一是激活肝星狀細(xì)胞。虎杖較氨基胍改善NASH大鼠肝纖維化的作用更明顯。

大鼠；高血糖；非酒精性脂肪性肝炎；肝纖維化；虎杖；氨基胍

肝纖維化是一組免疫介導(dǎo)的炎癥性疾病，是多種慢性肝病發(fā)展的終末階段，近年來脂肪肝導(dǎo)致的肝纖維化發(fā)病率明顯上升。不同于西方，在中國非酒精性脂肪肝發(fā)病率明顯高于酒精性脂肪肝[1]。糖尿病和非酒精性脂肪肝現(xiàn)已成為我國常見的慢性病之一。兩者在發(fā)病時多會出現(xiàn)胰島素抵抗（IR）和晚期糖基化終產(chǎn)物（AGEs）過度蓄積等現(xiàn)象，可能含有某些共同的發(fā)病基礎(chǔ)。糖尿病患者體內(nèi)AGEs過度累積，可在肝組織中引起氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)而損傷肝細(xì)胞[2]。當(dāng)前對降低血糖及AGEs形成能否減輕合并糖代謝異常的脂肪性肝炎肝纖維化受到了廣泛關(guān)注。有報道降低血糖以及抑制體內(nèi)胰島素抵抗，能夠抑制脂質(zhì)過氧化，減少氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而對脂肪性肝炎起到一定的保護(hù)[3]。中藥虎杖已證實(shí)為植物源性α-葡萄糖苷酶抑制劑[4]，可抑制或延緩肺纖維化[5]，并對ConA誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷有保護(hù)作用[6]，氨基胍可抑制AGEs。本實(shí)驗探討高血糖對高脂飲食所致大鼠肝纖維化影響及用降糖藥物處理后的效果及機(jī)制。

1 實(shí)驗材料

1.1 動 物 8周齡SPF級雄性，SD大鼠60只，體質(zhì)量（200±20）g，上海斯萊克實(shí)驗動物有限公司提供，許可證號：SCXK（滬）2012-0002，飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗動物中心SPF環(huán)境。

1.2 主要材料 血糖試紙、血糖測試儀（強(qiáng)生（中國）醫(yī)療器械有限公司），檸檬酸三鈉、檸檬酸檸檬酸三鈉、檸檬酸（無錫市晶科化工有限公司，批號20110827）；鏈脲佐菌素（STZ）（Sigma-S0130）、鹽酸氨基胍（美國Sigma公司），兔抗大鼠α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）抗體（Proteintech，批號00015168）；兔抗大鼠結(jié)蛋白抗體（Santa，批號k0812）；羊抗兔SP免疫組化染色試劑盒、DAB顯色試劑盒、蘇木素染液（福州邁新生物技術(shù)有限公司）；TIMP1檢測試劑盒（abcam，批號GR127277-1）；TGF-β1測試盒（abcam，批號GR122868-1）；TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測試劑盒（南京凱基生物科技發(fā)展有限公司）；大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）測試盒（武漢Uscnk公司，批號L130521573）?；⒄冉啵ㄕ憬嗅t(yī)藥大學(xué)制劑中心，1g/mL）。

2 實(shí)驗方法

2.1 分 組 將60只SD大鼠隨機(jī)分成正常對照組（10只）、高血糖模型組（12只）、NASH組（14只）、氨基胍組（12只）和虎杖組（12只）五組。

2.2 造 模 （1）鏈脲佐菌素（STZ）配制：A液：取檸檬酸2.10g加入雙蒸水100mL；B液：檸檬酸鈉2.94g加入雙蒸水100mL；將A、B液1:1混合，調(diào)pH到4.2～4.5。使用時以檸檬酸緩沖液溶解STZ配制成濃度為1%的STZ溶液。（2）造模步驟:正常對照組喂以普通飼料，其余四組大鼠造模前1天禁食不禁水至少12h，一次性以65mg/kg進(jìn)行腹腔注射鏈脲佐菌素，建模完成3周內(nèi)每周測定血糖，以血糖值＞16.7mmol/L為造模成功[7]。并予以高脂飲食（膽固醇2%，膽酸鈉0.5%，丙硫氧嘧啶0.2%，蔗糖5%，豬油10%，基礎(chǔ)飼料82.3%）飼養(yǎng)9周。

2.3 給 藥 在喂養(yǎng)高脂飲食同時，氨基胍組予氨基胍（10mg/mL）1mL/100g灌胃；虎杖組予虎杖（1g生藥/mL）1mL/100g灌胃；高血糖組、正常對照組、NASH組予等量0.9%氯化鈉溶液灌胃。均為1天1次，共9周。

2.4 檢測指標(biāo)及方法

2.4.1 各組大鼠空腹血糖測定 采用血糖測試儀測定大鼠空腹血糖。前3周每周2次，高血糖模型建成后每周1次，共15次。

2.4.2 HE染色觀察大鼠肝臟組織的病理學(xué)改變?nèi)「谓M織：切片、烤片后二甲苯脫蠟；乙醇脫苯；染色：蘇木精液染色5～10min，沖洗，1%鹽酸乙醇分化，伊紅染色；脫水；透明。封片：中性樹膠封片后觀察，拍照。

2.4.3 MASSON染色觀察大鼠肝臟組織纖維化 切片、脫蠟。鐵蘇木素染色，流水沖洗，麗春紅酸性品紅液染5～10min，蒸餾水稍沖洗，1%磷鉬酸水溶液處理約5min，苯胺藍(lán)液復(fù)染；脫水、透明；封片：中性樹膠封片；觀察，拍照。

2.4.4 免疫組化法檢測大鼠肝組織 α-SMA和Desmin的表達(dá) 制作切片石蠟切片經(jīng)脫蠟、脫水，3%H2O2處理后置0.01M的枸櫞酸緩沖液（pH6.0）中微波修復(fù)。羊血清工作液封閉后滴加依次滴加一抗和二抗。DAB反應(yīng)染色，蘇木素復(fù)染，干燥封片；觀察、拍照。每張免疫組化切片觀察3個不同的視野（× 400），統(tǒng)計陽性表達(dá)強(qiáng)度和陽性率。染色結(jié)果采用半定量分析方法：以染色強(qiáng)度結(jié)合陽性細(xì)胞數(shù)百分比進(jìn)行乘積。染色強(qiáng)度以多數(shù)細(xì)胞呈現(xiàn)的染色強(qiáng)度并減去背景著色計分：0分：無明顯著色；1分：淡黃色或輕微黃色；2分：深黃或棕黃色；3分棕褐色或黑褐色。陽性細(xì)胞百分比選擇觀察5個不同的視野（× 400），每個視野計數(shù)100個細(xì)胞中陽性細(xì)胞數(shù)，并統(tǒng)計平均數(shù)：0～5%為0分，6%～25%1分，26%～50%2分，51%～75%3分，＞75%則為4分。然后用每個視野染色強(qiáng)度計分與陽性細(xì)胞百分比的乘積作為評分：0分為陰性（-），弱陽性為1～6分，7～12則算強(qiáng)陽性。

2.4.5 TIMP1檢測 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔及空白孔。在標(biāo)準(zhǔn)孔中加入100μL梯度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔中加等量樣本；將100μL的標(biāo)記的檢測抗體加入各孔，洗滌，甩干；每孔再加入100μL的HRP-鏈霉親和素，加入TMB顯色液100μL及50μL終止液，即刻檢測在450nm波長下的OD值。

2.4.6 TGF-β1、AGE檢測 具體操作依據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行，方法同上。

2.4.7 TUENL檢測大鼠肝組織細(xì)胞凋亡率 制作切片石蠟切片脫蠟脫苯、漂洗后封閉；浸入1×PBS三次；滴加100μL Proteinase K工作液。制陽性片：滴加100μL DNaseⅠ反應(yīng)液，浸入1×PBS三次（注：樣本片和陰性片不加DNaseⅠ反應(yīng)液）；加50μL TdT酶，漂洗；標(biāo)記、顯色、復(fù)染后脫水；透明；封片；觀察、拍照。根據(jù)陽性細(xì)胞分布情況，各個組別每張切片400倍鏡下選擇3個陽性視野，計數(shù)200個細(xì)胞中陽性細(xì)胞數(shù)作為凋亡指數(shù)。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計軟件，計量資料以（±s） 表示，各組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。

3 實(shí)驗結(jié)果

實(shí)驗結(jié)束，正常對照組10只存活8只，高血糖組12只，存活8只，NASH組14只存活7只，氨基胍組12只存活8只，虎杖組12只存活8只。

3.1 五組大鼠空腹血糖比較 與正常對照組比較，高血糖組和NASH組大鼠血糖均顯著升高（P＜0.01），與NASH組比較，兩個用藥組大鼠血糖值（P＜0.05，P＜0.01）?；⒄冉M與正常對照組血糖比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 五組大鼠血糖比較（mmol/L±s）

表1 五組大鼠血糖比較（mmol/L±s）

注：與正常對照組比較，**P＜0.01；與NASH組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

3.2 五組大鼠血漿TIMP-1、TGF-β1、AGEs含量比較 與正常對照組比較，高血糖組和NASH組大鼠血漿AGEs含量、TGF-β1含量、TIMP1含量明顯升高（P＜0.05，P＜0.01）。虎杖浸膏組大鼠血漿TGF-β1含量較NASH組顯著降低（P＜0.01），各治療組大鼠血漿TIMP1、AGE含量比NASH組顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。而氨基胍組與NASH組比較，TGF-β1含量雖有減低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 五組大鼠血漿TIMP-1、TGF-β1、AGEs含量比較（±s）

表2 五組大鼠血漿TIMP-1、TGF-β1、AGEs含量比較（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與NASH組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；TIMP1：基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子；TGF-β1:轉(zhuǎn)化生長因子-β1；AGEs：糖基化終產(chǎn)物

3.3 肝細(xì)胞形態(tài) 顯微鏡下觀察，正常對照組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)完整，肝小葉結(jié)構(gòu)正常；NASH組大鼠肝細(xì)胞排列紊亂，肝組織結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞內(nèi)庫普弗細(xì)胞增多，匯管區(qū)及細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)可見纖維組織增生，肝小葉周邊和匯管區(qū)肝細(xì)胞可見明顯的細(xì)胞壞死、水樣變性、脂肪變性及炎細(xì)胞浸潤；高血糖組大鼠部分肝細(xì)胞排列紊亂，無脂肪病變，局部可見較明顯的細(xì)胞水樣變性及炎細(xì)胞浸潤，血管壁周圍纖維組織增生較NASH組少；氨基胍組大鼠較NASH組肝組織形態(tài)未有明顯改善，可見明顯肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤，但細(xì)胞變性和纖維化程度有所減輕；虎杖組大鼠肝細(xì)胞形態(tài)較NASH組正常，只有輕度水腫、脂肪變性及炎細(xì)胞浸潤，無明顯細(xì)胞壞死，纖維化程度明顯降低。見圖1（封四）。

3.4 MASSON染色結(jié)果 顯微鏡下觀察，膠原纖維呈藍(lán)色，正常組肝臟纖維組織較少，主要分布在血管壁；高血糖組和NASH組纖維化嚴(yán)重（后者纖維化程度更重），血管壁周圍和細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)均可見纖維化，各給藥組纖維化程度較高血糖組和NASH組明顯減輕。見圖2（封四）。

3.5 TUENL檢測大鼠肝組織細(xì)胞凋亡率 見表3、圖3（封四）。

表3 五組大鼠肝細(xì)胞凋亡指數(shù)比較（±s）

表3 五組大鼠肝細(xì)胞凋亡指數(shù)比較（±s）

注：與正常對照組比較，**P＜0.001；與NASH組比較，△△P＜0.01

只數(shù)組別正常對照組高血糖組NASH組氨基胍組虎杖組8 8 7 8 8凋亡率（%）25.90±7.12 50.63±15.18** 53.85±15.76** 51.44±15.37 35.42±7.02△△

3.6 六組大鼠肝組織α-SMA和Desmin表達(dá)比較陽性表達(dá)呈棕黃色或棕褐色，α-SMA主要表達(dá)于門靜脈、匯管區(qū)血管壁、肝小葉中央靜脈的平滑肌細(xì)胞及纖維間隔；Desmin主要表達(dá)于肝動脈、門脈周圍及中央靜脈邊緣區(qū)的平滑肌細(xì)胞。NASH組α-SMA和Desmin表達(dá)顯強(qiáng)陽性，氨基胍組α-SMA表達(dá)有所增高，但虎杖組α-SMA和Desmin表達(dá)有明顯下降，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表4，圖4～5（封四）。

表4 五組大鼠肝組織α-SMA和Desmin陽性表達(dá)比較（分，±s）

表4 五組大鼠肝組織α-SMA和Desmin陽性表達(dá)比較（分，±s）

注：與正常對照組比較，**P＜0.01；與NASH組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。α-SMA：α-平滑肌動蛋白；Desmin：結(jié)蛋白

組別正常對照組高血糖組NASH組氨基胍組虎杖組例數(shù)8 8 7 8 8 α-SMA 3.17±0.82 6.33±1.83** 7.92±1.10** 9.00±2.04△4.92±1.69△△Desmin 3.50±1.56 7.67±2.10** 8.04±2.49** 8.08±1.82 4.75±1.75△△

4 討論

肝臟是人體最容易發(fā)生纖維化病變的器官。肝纖維化的本質(zhì)是肝組織ECM的沉積過多或降解減少的結(jié)果。ECM主要由肝星狀細(xì)胞（HSC）合成，它的活化和增殖是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。當(dāng)肝臟受到炎癥等損傷時，HSC可由靜止?fàn)顟B(tài)激活并分泌大量的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1），并分化為具有分泌性作用的“肌成纖維細(xì)胞”（MFC）[8]，該細(xì)胞可以表達(dá)α-平滑肌動蛋白（α-SMA）、波形蛋白（vimentin）及結(jié)蛋白（desmin）。其中Desmin，α-SMA的含量是肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和門脈區(qū)域HSC活化和門脈纖維母細(xì)胞活化的重要標(biāo)志[9-10]。同時TIMP1合成及分泌使細(xì)胞外基質(zhì)成分降解功能下降，加速肝纖維化。

實(shí)驗結(jié)果顯示，NASH組病理檢測肝纖維化改變、細(xì)胞凋亡嚴(yán)重，提示過度的高脂飲食促進(jìn)肝纖維化。高血糖模型組部分肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列紊亂，雖無脂肪變性，局部可見較明顯的炎性反應(yīng)及纖維組織增生、細(xì)胞凋亡率升高，但較NASH組少，可見在高血糖環(huán)境下大鼠肝臟組織已部分變性并出現(xiàn)纖維化，ECM表達(dá)及TIMP-1、α-SMA、TGF-β1、AGEs等相關(guān)細(xì)胞因子含量等均較正常對照組有升高。結(jié)果可能與蛋白質(zhì)非酶糖化形成AGEs有關(guān)，AGEs與細(xì)胞膜表面受體RAGE發(fā)生交聯(lián)，激活TGF-β1、IL-6等細(xì)胞因子，促使肝組織發(fā)生纖維化有關(guān)，同時時血糖增高時導(dǎo)致機(jī)體代謝功能障礙，活性氧物質(zhì)（ROS）增加以及抗氧化機(jī)制受損，發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，也可加重肝組織的損傷[11]，導(dǎo)致肝臟纖維化的發(fā)生。

本研究采用的兩種藥物均有明顯降低血糖的作用。虎杖可顯著改善肝細(xì)胞脂肪變和纖維化程度，抑制肝細(xì)胞凋亡。在其干預(yù)后，α-SMA及Desmin表達(dá)下降。TGF-β1是肝纖維化過程中關(guān)鍵的細(xì)胞因子，在ECM堆積和肝纖維化的形成中起著關(guān)鍵作用，且其升高程度與肝纖維化呈正相關(guān)[12]。有報道[13]指出，肝星狀細(xì)胞在受到刺激時合成的TGF-β1從基因水平可調(diào)控結(jié)締組織生長因子（CTGF）誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞激活、增殖與細(xì)胞外基質(zhì)合成與沉積，還能抑制膠原降解。因此肝臟TGF-β1可反應(yīng)HSC活化及肝纖維化的程度，降低血糖水平可能與此相關(guān)。本研究顯示，虎杖組TGF-β1及TIMP-1表達(dá)較NASH組下降明顯，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。已有研究顯示，激活過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR-γ）配體-格列酮類增敏劑在降低血糖及減少AGEs時可以抑制HSC活化及預(yù)防實(shí)驗性肝硬化，其機(jī)制與降低血糖水平減少AGEs產(chǎn)生有關(guān)[14]，虎杖的相關(guān)作用可能也與此類似?；⒄冗€可減少TIMP-1的產(chǎn)生，改善ECM代謝平衡而抑制肝硬化。但是否有其他途徑減輕肝纖維化的發(fā)生尚待進(jìn)一步研究。

氨基胍組血糖降低的同時，雖然肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤、脂肪變性、水樣變性和纖維化程度有所減輕，但組織在病理學(xué)結(jié)構(gòu)上無明顯改善。與NASH組相比，氨基胍可以明顯降低血漿中AGEs的含量，但TGF-β1、及對細(xì)胞凋亡的抑制無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。這與過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR-γ）增敏劑可早期抑制HSC活化，但纖維化發(fā)生后伴隨著活化HSC的PPAR-γ表達(dá)能力下降，這類藥物抗纖維化作用逐漸減少的報告結(jié)果一致[15]。體外研究證實(shí)糖基化修飾的牛血清白蛋白（AGE-BSA）含量增加，可促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP1）表達(dá)的上調(diào)，從而下調(diào)TIMP-1表達(dá)[16]。本實(shí)驗也證實(shí)氨基胍干預(yù)后，TIMP-1含量減少，與報道相符，可見氨基胍還可通過增強(qiáng)對膠原的降解能力，達(dá)到抗肝纖維化的目的。

綜上所述，高血糖在大鼠肝纖維化發(fā)生、發(fā)展過程中起到一定的促進(jìn)作用，經(jīng)過降糖藥物干預(yù)，實(shí)驗大鼠血糖下降，AGEs形成減少，可改善肝纖維化程度。其中虎杖的作用比氨基胍更強(qiáng)，對高血糖合并NASH的治療作用更為顯著。

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（收稿：2015-10-26 修回：2015-12-12）

Effects of Hyperglycemia on the Hepatic Fibrogenesis in Non-Alcoholic Steatohepatitis Rats

XIANG Biao,DU Weidong,XIA Chao,CHEN Shiming.Department of Hepatobilliary Surgery,Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou(310006),China

ObjectiveTo investigate the effects of hyperglycemia on hepatic fibrogenesis in nonalcoholic steatohepatitis（NASH）mice and theunderlying mechanism.MethodsSixty SD rats were randomly divided into normal control group（n=10）,hyperglycemia group（n=12）,NASH group（n=14）,aminoguanidine group（n=12）and giant knotweed group（n=12）.Rats were induced by streptozotocin（STZ）to establish copied hyperglycemiamodel,then were treated with the corresponding drugs for glucose-loweringintervention.Rats were sacrificed to observe the degree of hepatic steatosis,inflammation,necrosis and fibrosis of liver tissue with HE staining.The expression of α-SMA and desmin in liver tissues was determined by immunohistochemistry,The fibrosis-relevant factorslike tissue inhibitor of metalloproteinase-1（TIMP-1）,transform growth factor β1（TGF-β1）,advanced glycation end products （AGEs）were assayed.ResultsThe blood glucose in aminoguanidine and giant knotweed groups（14.20±11.74/ 5.25±0.92,mmol/L）was lower than that in hyperglycemia group（22.20±1.70mmol/L）and NASH group（22.21± 5.49mmol/L）（all P＜0.05）.Lives tissue from hyperglycemia group and NASH group showed cell degeneration and fibrogenesis,while the hepatic tissue in giant knotweed groupdisplayed a normal form,mild edema and fatty degeneration and inflammatory cell infiltration and markedly alleviatedhepatic fibrosis,and reduced α-SMA（4.92±1.69）, desmin（4.75±1.75）,TIMP-1（3473.76±372.06pg/mL）,TGF-β1（125.26±28.60ng/mL）,and AGEs（75.86±22.36pg/mL）（all P＜0.01）.The pathology of hepatic tissue in aminoguanidine group was not improved significantly,but the fatty degeneration,hydropic degeneration,and hepatic fibrosis were slightly alleviated,and TIMP-1（3543.67±377.05pg/ mL）and AGEs（75.86±22.35pg/mL）declined in content（P＜0.01）,α-SMA（9.00±2.04）increased（P＜0.05）,and TGF-β1（145.3±43.14ng/mL）reduced without statistical difference（P＞0.05）.ConclusionHigh blood sugar can promote the activation of hepatic stellate cells of nonalcoholic fatty liver disease and thereby accelerate liver-fibrogenesis in rats.To lower glucose and reduce AGEs may alleviate or inhibit the development of fibrogenesis.Giant knotweed has better effect on alleviation of hepatic fibrosis.

Rats;Hyperglycemia;Nonalcoholic steatohepatitis;Liver fibrosis;Giant knotweed;Aminoguanidine

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浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝膽外科（杭州 310006）

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