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    肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)滅活疫苗的實(shí)驗(yàn)研究及臨床使用效果研究*

    2016-02-08 06:23:52戴金寧李富金楊景晁戰(zhàn)汪濤
    家禽科學(xué) 2016年9期
    關(guān)鍵詞:二聯(lián)佐劑齊魯

    戴金寧,李富金,楊景晁,戰(zhàn)汪濤

    (1.山東省畜牧總站,山東 濟(jì)南 250022;2.齊魯動(dòng)物保健品有限公司,山東 濟(jì)南 250105)

    肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)滅活疫苗的實(shí)驗(yàn)研究及臨床使用效果研究*

    戴金寧1,李富金2,楊景晁1,戰(zhàn)汪濤1

    (1.山東省畜牧總站,山東 濟(jì)南 250022;2.齊魯動(dòng)物保健品有限公司,山東 濟(jì)南 250105)

    利用新型101佐劑制備肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)滅活疫苗,與進(jìn)口白油佐劑新流二聯(lián)滅活疫苗進(jìn)行SPF雞、AA肉雞免疫比較,結(jié)果表明:試驗(yàn)一,SPF雞10日齡免疫,免疫后7d,肉雞專(zhuān)用新流組H9、ND抗體水平明顯優(yōu)于對(duì)照組;試驗(yàn)二,AA肉雞7日齡免疫,肉雞專(zhuān)用新流組禽流感H9抗體水平明顯優(yōu)于對(duì)照組,新城疫抗體對(duì)比不明顯;試驗(yàn)三,AA肉雞不同公司不同免疫日齡(1日齡、7日齡免疫)對(duì)比試驗(yàn),23、30、37日齡檢測(cè)新城疫、禽流感H9抗體,齊魯肉雞專(zhuān)用新流禽組流感H9抗體產(chǎn)生速度比同類(lèi)產(chǎn)品及空白對(duì)照差異顯著,1日齡免疫效果對(duì)比更明顯;新城疫抗體對(duì)比差異不顯著;試驗(yàn)四,田間7日齡免疫對(duì)比試驗(yàn),26日齡抽檢各舍抗體,齊魯肉雞專(zhuān)用新流H9抗體明顯優(yōu)于該公司新流,新城疫對(duì)比不明顯。結(jié)果表明,齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)滅活疫苗更適合于商品肉雞免疫,1日齡免疫對(duì)比更明顯。

    肉雞;新流二聯(lián);臨床使用;研究

    新城疫、低致病性禽流感(H9)都是肉雞常見(jiàn)病毒性傳染病,也是肉雞養(yǎng)殖中危害最嚴(yán)重的疫病,藥物治療效果差,疫苗免疫預(yù)防發(fā)病是現(xiàn)在使用的有效方案。雞新城疫、禽流感(H9)二聯(lián)滅活疫苗是肉雞常用防控兩種疫病的疫苗,但是,肉雞生長(zhǎng)速度快,免疫系統(tǒng)不健全,傳統(tǒng)滅活苗效果在肉雞上應(yīng)用還有許多提高的方面。滅活疫苗臨床使用效果主要因素包括種毒毒株、佐劑、制苗工藝等。課題組人員優(yōu)選制苗毒株,免疫原性好,對(duì)目前國(guó)內(nèi)流行的新城疫、禽流感(H9)疾病有針對(duì)性的免疫效果;同時(shí),為進(jìn)一步提高疫苗的免疫效果,課題組人員歷經(jīng)多年研究,篩選出一個(gè)高效佐劑用于商品肉雞專(zhuān)用滅活疫苗生產(chǎn)。經(jīng)大量試驗(yàn)和臨床使用跟蹤表明:優(yōu)選佐劑能快速激活免疫細(xì)胞,顯著提高機(jī)體免疫機(jī)能,抗體產(chǎn)生快,大幅縮短免疫空白期,更適用于肉雞低日齡免疫。在此基礎(chǔ)上,精確控溫滅活、高倍濃縮、均質(zhì)乳化等一系列科學(xué)的生產(chǎn)工藝以及嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,保證了產(chǎn)品質(zhì)量的安全、高效。為商品肉雞養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)提供更有保障的高質(zhì)量的產(chǎn)品。

    1 材料與方法

    1.1 疫苗與血樣

    1.1.1 疫苗 肉雞采用新流二聯(lián) (齊魯動(dòng)物保健品公司有限公司生產(chǎn),肉雞佐劑);齊魯新流二聯(lián)(自制試驗(yàn)樣,進(jìn)口白油佐劑);國(guó)產(chǎn)Y公司制品(批號(hào):2014020);國(guó)產(chǎn) D公司制品 (批號(hào):2014013)(同類(lèi)制品均為山東市場(chǎng)集團(tuán)專(zhuān)供公司);田間試驗(yàn)肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)(批號(hào):150316-1);某公司新流二聯(lián)(批號(hào):2015023)。

    1.1.2 血樣 山東濰坊某養(yǎng)殖集團(tuán)對(duì)比試驗(yàn)各個(gè)雞舍26日齡肉雞血樣。

    1.2 抗原 ND和AI-H9血凝抑制抗原均由山東某大型養(yǎng)殖公司提供(哈獸研生產(chǎn))。

    1.3 試驗(yàn)雞

    1.3.1 10日齡SPF雞40只,購(gòu)自濟(jì)南斯帕法斯家禽有限公司。

    1.3.2 1日齡AA肉雞270只,購(gòu)自山東和康源集團(tuán)。

    1.4 1%雞紅細(xì)胞懸液制備 采集2~3只健康非免疫SPF公雞的血液,與等體積的阿氏液混合,用 pH7.2、0.01mol/L PBS液洗滌 3次,然后用pH7.2、0.01mol/LPBS配成 1%的紅細(xì)胞懸液,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.5 試驗(yàn)分組與免疫方法

    1.5.1 試驗(yàn)一 10日齡SPF雞40只,隨機(jī)分成2組,每組20只。10日齡頸部皮下分別免疫,齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)(自制試驗(yàn)樣,新型101佐劑);齊魯新流二聯(lián)(自制試驗(yàn)樣,進(jìn)口白油佐劑),免疫劑量均為0.2ml/羽。免疫后7、14、21d分別采血,分離血清,用血凝抑制(HI)試驗(yàn)方法測(cè)定ND和H9的HI抗體效價(jià),比較佐劑活性差異。

    1.5.2 試驗(yàn)二 AA肉雞,從雞群中挑選精神狀態(tài)良好、體況相近試驗(yàn)雞90只,隨機(jī)分成3組,每組30只。免疫程序:1日齡申貝點(diǎn)眼滴鼻,7日齡實(shí)驗(yàn)組免疫齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)(自制試驗(yàn)樣,新型101佐劑);對(duì)照組免疫齊魯新流二聯(lián)(自制試驗(yàn)樣,進(jìn)口白油佐劑),空白組不免疫,同時(shí)新支120點(diǎn)眼滴鼻。免疫后7、14、21d分別采血,分離血清,用血凝抑制(HI)試驗(yàn)方法測(cè)定ND和H9的HI抗體效價(jià),比較佐劑活性差異。

    1.5.3 試驗(yàn)三 AA肉雞,從雞群中挑選精神狀態(tài)良好、體況相近試驗(yàn)雞180只,隨機(jī)分成6組,每組30只。免疫程序:1~3組,1日齡申貝點(diǎn)眼滴鼻,同時(shí)分別頸部皮下注射三個(gè)廠家新流二聯(lián),0.15ml/只、7日齡新支120點(diǎn)眼滴鼻;4~6組,1日齡申貝點(diǎn)眼滴鼻,7日齡分別頸部皮下注射三個(gè)廠家新流二聯(lián)、新支120點(diǎn)眼滴鼻。免疫后23、30、37d分別采血,分離血清,用血凝抑制(HI)試驗(yàn)方法測(cè)定ND和H9的HI抗體效價(jià),對(duì)比不同疫苗產(chǎn)品的免疫效果。

    1.5.4 試驗(yàn)四 山東濰坊某集團(tuán)公司田間免疫對(duì)比試驗(yàn),共10棟雞舍,兩個(gè)公司新流二聯(lián)各免疫5棟,免疫程序?yàn)椋?日齡威立克1倍量,傳支1倍量,7日齡某公司新流二聯(lián)0.35ml/只或齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)0.3ml/只;新支二聯(lián)1.2倍點(diǎn)眼滴鼻,21日齡1、3、4、5舍新城疫2倍量。免疫后26d采血,分離血清,用血凝抑制(HI)試驗(yàn)方法測(cè)定ND和H9的HI抗體效價(jià),檢查不同公司疫苗產(chǎn)品的免疫效果。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 試驗(yàn)一 結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 SPF雞免疫試驗(yàn)組(肉雞專(zhuān)用新流)與對(duì)照組(精品新流)免疫對(duì)比結(jié)果

    結(jié)果顯示:疫苗中禽流感H9、新城疫效價(jià)相同,采用新型佐劑的肉雞專(zhuān)用新流比進(jìn)口白油佐劑的精品新流抗體產(chǎn)生快,免疫后7d,試驗(yàn)組禽流感HI抗體值達(dá)3.4,新城疫抗體達(dá)1.2,而對(duì)照組抗體滴度均小于1;免疫后14d,試驗(yàn)組H9-HI及ND-HI抗體比對(duì)照組高1個(gè)滴度;免疫后21d,兩組抗體水平差異不顯著,通過(guò)比較可以看出,試驗(yàn)組抗體產(chǎn)生速度明顯優(yōu)于對(duì)照組。

    2.2 試驗(yàn)二 結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 AA肉雞免疫試驗(yàn)組(肉雞專(zhuān)用新流)與對(duì)照組(精品新流)免疫對(duì)比結(jié)果

    結(jié)果顯示:免疫后14d,空白對(duì)照組雞禽流感H9母源抗體均值下降為2.3log2,試驗(yàn)組禽流感H9抗體均值為 3.8log2,對(duì)照組為 3.0log2;免疫后21d,母源抗體均值下降為2.0log2;對(duì)照組為2.6 log2,試驗(yàn)組則高達(dá)4.6log2,免疫后28d,母源抗體持續(xù)下降到1.1log2,試驗(yàn)組均值比對(duì)照組高2個(gè)滴度,達(dá)5.1log2;免疫后14d、21d及28d,ND抗體母源抗體均值從1.4log2下降到0.8log2,免疫疫苗組抗體持續(xù)升高,但試驗(yàn)組比對(duì)照組差異不明顯,僅高0.5個(gè)滴度左右。通過(guò)比較可以看出,采用新型佐劑的肉雞專(zhuān)用新流的試驗(yàn)組比使用進(jìn)口白油佐劑的精品新流的對(duì)照組禽流感H9抗體產(chǎn)生快,抗體水平差異顯著;而新城疫抗體產(chǎn)生速度各日齡段對(duì)比不明顯。

    2.3 試驗(yàn)三 結(jié)果見(jiàn)表3。

    表3 齊魯肉雞專(zhuān)用新流與其它公司新流疫苗免疫AA肉雞的對(duì)比結(jié)果

    結(jié)果顯示:隨著日齡增長(zhǎng),空白對(duì)照組雞禽流感H9、新城疫母源抗體持續(xù)下降,30日齡左右降到1.0log2左右。不同公司新流二聯(lián)免疫AA肉雞后新城疫、禽流感H9的HI抗體比空白對(duì)照都有顯著提高,齊魯肉雞專(zhuān)用新流禽流感H9-HI抗體產(chǎn)生速度比同類(lèi)產(chǎn)品及空白對(duì)照高1~3個(gè)滴度,差異顯著,1日齡免疫比7日齡免疫效果對(duì)比更明顯;其中1日齡免疫,23日齡、30日齡、37日齡分別檢測(cè)抗體,Y公司、D公司疫苗抗體上升趨勢(shì)不明顯,而齊魯肉雞專(zhuān)用新流可以明顯檢測(cè)到抗體上升,37日齡齊魯肉雞專(zhuān)用新流抗體達(dá)4.2log2,比對(duì)Y、D公司高3個(gè)多滴度,差異顯著;7日齡免疫效果對(duì)比雖然沒(méi)有1日齡免疫對(duì)比這么顯著,37日齡,也有2個(gè)多滴度差異。新城疫HI抗體三個(gè)公司,7日齡免疫抗體走勢(shì)相同,對(duì)比差異不顯著 (新城疫有活疫苗免疫因素存在),1日齡免疫,齊魯肉雞專(zhuān)用新流抗體逐日上升趨勢(shì)明顯,其他2個(gè)公司抗體走勢(shì)與空白對(duì)照趨同。

    2.4 試驗(yàn)四 結(jié)果見(jiàn)表4。

    表4 山東濰坊某集團(tuán)公司田間免疫對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果

    結(jié)果顯示:7日齡免疫新流,26日齡抽檢各舍抗體,5個(gè)雞舍齊魯新流H9抗體平均值為 5.0 log2,5個(gè)雞舍某公司新流 H9抗體平均值為 3.8 log2,齊魯肉雞新流H9抗體明顯優(yōu)于該公司新流;5個(gè)雞舍齊魯新流ND抗體平均值為5.5log2,5個(gè)雞舍某公司新流ND抗體平均值為5.8log2,無(wú)明顯差異。

    3 小結(jié)與討論

    3.1 新型佐劑新流二聯(lián)在SPF雞、商品AA肉雞上免疫,免疫效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)進(jìn)口白油佐劑疫苗。

    3.2 齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)(新型佐劑苗)抗體產(chǎn)生快,日齡越小,對(duì)比結(jié)果越明顯。

    3.3 田間試驗(yàn)對(duì)比結(jié)果顯示,齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)禽流感免疫效果優(yōu)于Y公司及D公司,新城疫防疫效果差異不大。

    3.4 肉雞生長(zhǎng)快,免疫系統(tǒng)不健全,傳統(tǒng)滅活疫苗抗體產(chǎn)生慢,一般免疫后21~28d才能出現(xiàn)高峰,肉雞發(fā)病早,疫苗抗體產(chǎn)生不足,不能完全滿(mǎn)足客戶(hù)疫病防控需求,齊魯肉雞專(zhuān)用新流二聯(lián)篩選的佐劑能快速激活免疫細(xì)胞,顯著提高機(jī)體免疫機(jī)能,抗體產(chǎn)生快,大幅縮短免疫空白期,更適用于肉雞低日齡免疫。

    3.5 為了提高養(yǎng)殖效率,很多地方更換為籠養(yǎng)肉雞,養(yǎng)殖場(chǎng)希望雛雞上籠前就完成新流二聯(lián)免疫,傳統(tǒng)進(jìn)口白油佐劑7日齡免疫尚可,1日齡免疫檢測(cè)不到疫苗效果,不適用于1日齡商品肉雞。

    S858.312.5

    B

    1673-1085(2016)09-0010-04

    2016-08-20

    山東省財(cái)政支持農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣項(xiàng)目“肉雞標(biāo)準(zhǔn)化健康養(yǎng)殖技術(shù)推廣”;山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目“山東省肉雞業(yè)公共衛(wèi)生模式建立與示范”。

    戴金寧(1969-),男,助理畜牧師,大專(zhuān),主要從事畜牧科技推廣工作,154741270@qq.com。

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