新型氯基消毒劑煙熏消毒的效果驗(yàn)證

薛寶君， 辛 良， 樊富慧，3， 張 飛， 陳 健， 范慶增，

溫會(huì)文1， 王文琮1， 陳 默1， 王宏鈞1， 常建宇1

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 北京海淀100193 ； 2.天津市中升挑戰(zhàn)生物科技有限公司 ，天津西青300380 ； 3.上?？党忌锟萍加邢薰?， 上海奉賢201411 ；4.天津市開發(fā)區(qū)宏景工貿(mào)有限公司 ， 天津塘沽300457)

新型氯基消毒劑煙熏消毒的效果驗(yàn)證

薛寶君1，2， 辛 良1， 樊富慧1，3， 張 飛4， 陳 健1， 范慶增1，2，

溫會(huì)文1， 王文琮1， 陳 默1， 王宏鈞1， 常建宇1

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 北京海淀100193 ； 2.天津市中升挑戰(zhàn)生物科技有限公司 ，天津西青300380 ； 3.上海康臣生物科技有限公司 ， 上海奉賢201411 ；4.天津市開發(fā)區(qū)宏景工貿(mào)有限公司 ， 天津塘沽300457)

為了驗(yàn)證以二氯異氰尿酸鈉為主要成分的粉狀消毒劑的殺菌效果。采用種蛋檢測(cè)方法進(jìn)行試驗(yàn)觀察。結(jié)果低濕度時(shí)，二氯異氰尿酸鈉按照0.4、0.6、0.8、1 g/m33 熏蒸消毒30、60、120 min，對(duì)種蛋表面細(xì)菌殺滅率為73.49、77.23、77.72、74.90、77.23、91.72、70.55、89.20、68.54%和84.36、80.12、89.16%。高濕度時(shí)，二氯異氰尿酸鈉按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30，60，120 min，對(duì)種蛋表面細(xì)菌殺滅率為81.33、91.25、84.65、84.74、91.15、69.53、91.25、93.87、78.48、91.27、94.17%和72.18%。表明濕度高對(duì)消毒劑殺菌效果有積極影響，該消毒劑殺菌效果好且使用方便。

二氯異氰尿酸鈉 ； 濕度 ； 福爾馬林 ； 消毒

種蛋入孵前的清潔消毒可以提高種蛋利用率，減少種蛋孵化過程中細(xì)菌感染。煙熏消毒是最為簡(jiǎn)潔、全面、徹底的消毒手段，目前以甲醛和高錳酸鉀為原料的煙熏消毒劑應(yīng)用最為廣泛，但綜合考慮其消毒的不利影響，成本壓力及可操作性，尤其是對(duì)操作人員的毒副作用等因素，人們迫切需要一種操作方便、無污染、無殘留、無毒副作用的新型煙熏消毒產(chǎn)品替代甲醛和高錳酸鉀對(duì)種蛋及室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行消毒，并達(dá)到日常安全生產(chǎn)的目的。以二氯異氰尿酸鈉為原料制成的煙熏消毒劑應(yīng)用較為廣泛，為評(píng)價(jià)該產(chǎn)品的在此方面的作用效果，本次試驗(yàn)效果驗(yàn)證旨在為用戶提供更為詳實(shí)的數(shù)據(jù)支持，以期為生產(chǎn)實(shí)踐提供更經(jīng)濟(jì)有效的參考。

1 材料與方法

1.1 主要材料和試劑 高錳酸鉀和福爾馬林常規(guī)劑量(14 g：28 mL/m3)；新型煙熏劑(主要成分：二氯異氰尿酸鈉)，由日本明治制藥株式會(huì)社提供，商品名：克蹄頓；燃燒伴侶克特，由日本明治制藥株式會(huì)社提供；種蛋來源：大發(fā)正大。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：將蛋白胨10 g、牛肉粉3 g、氯化鈉5 g、瓊脂15 g、蒸餾水1 000 mL，混合調(diào)pH 值7.2～7.4，加熱溶解，裝于錐型瓶滅菌備用；熏蒸空間：無菌超凈工作臺(tái)，體積為0.34 m3。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 二氯異氰尿酸鈉的熏蒸濕度設(shè)計(jì)為：28%～32%，65%～70%；時(shí)間設(shè)計(jì)為30、60、120 min 3 個(gè)梯度；劑量設(shè)計(jì)為0.4、0.6、0.8、1.0 g/m34 個(gè)梯度，完全交叉進(jìn)行，共計(jì)24 個(gè)試驗(yàn)組，每組種蛋10 枚。高錳酸鉀和福爾馬林的熏蒸濕度設(shè)計(jì)為28%～32%，65%～70%；熏蒸時(shí)間為30 min，劑量設(shè)計(jì)為常規(guī)劑量。熏蒸間的天花板用膠布密封，下端透氣間隙也用膠布密封。用配好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿放于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱監(jiān)測(cè)該培養(yǎng)箱的細(xì)菌數(shù)。

1.3 種蛋檢測(cè)方法(棉簽拭抹法) 將每組雞蛋(10個(gè))編號(hào)1-10號(hào)。尖端朝下放好，每個(gè)雞蛋用直徑為2.6 cm的圓圈在大頭端畫出左右對(duì)稱的兩個(gè)區(qū)域，熏前在每個(gè)雞蛋左側(cè)畫定區(qū)域棉簽醮生理鹽水涂抹，將棉簽折斷浸入500 μL 生理鹽水中，室溫放置30 min之后用旋轉(zhuǎn)搖蕩儀振蕩15 s，移液器吸取50 μL 于普通營養(yǎng)瓊脂平板上，涂布器涂布均勻，旋轉(zhuǎn)一段時(shí)間，待瓊脂將水分吸收后，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，取出計(jì)數(shù)。熏后在右側(cè)圓圈區(qū)域內(nèi)重復(fù)如前操作。每批檢測(cè)不同熏蒸位置的種蛋10枚，計(jì)算平均帶菌數(shù)。3 d后進(jìn)行下一批熏蒸消毒試驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 濕度為28%～32%時(shí)，新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉熏蒸的結(jié)果 從表1 可見，在濕度為28%～32%時(shí)，二氯異氰尿酸鈉按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30、60、120 min，對(duì)種蛋表面細(xì)菌殺滅率為73.49、77.23、77.72、74.90、77.23、91.72、70.55、89.20、68.54%和84.36、80.12、89.16%。

2.2 濕度為65%～70%，新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉熏蒸的結(jié)果 從表2 可見，在濕度為65%～70%時(shí)，二氯異氰尿酸鈉按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30、60、120 min，對(duì)種蛋表面細(xì)菌殺滅率為81.33、91.25、84.65、84.74、91.15、69.53，91.25、93.87、78.48%和91.27、94.17、72.18%。

表1 濕度為28%～32%，新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉不同濃度和不同時(shí)間的熏蒸效果

表2 濕度為65%～70%，新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉不同濃度和不同時(shí)間的熏蒸效果

2.3 濕度不同，新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉熏蒸結(jié)果的比對(duì) 從表3 可見，在相同熏蒸劑量和時(shí)間的情況下，濕度高對(duì)于提高殺菌率有積極的影響。

表3 新型氯基消毒劑二氯異氰尿酸鈉不同濕度熏蒸結(jié)果

2.4 高錳酸鉀和福爾馬林熏蒸的效果 從表4可見，常規(guī)劑量甲醛熏蒸效果和濕度有很大關(guān)系。濕度在65%～75%的殺菌效果明顯好于濕度32%的情況。兩次高濕度和一次低濕度的平均殺菌率為91.20%。

表4 高錳酸鉀和福爾馬林不同濕度消毒后的細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果

2.5 對(duì)種蛋的影響 根據(jù)上述殺菌試驗(yàn)的效果，分別選取二氯異氰尿酸鈉4個(gè)濃度梯度抑菌效果接近或超過40%甲醛的最短時(shí)間為種蛋孵化前熏蒸，即0.4 g/m3，0.6 g/m3高濕度熏蒸60 min 和0.8 g/m3，1.0 g/m3高濕度熏蒸30 min。甲醛和高錳酸鉀常規(guī)劑量熏蒸(14 g：28 mL/m3，30 min)一組，空白對(duì)照一組。每組熏蒸種蛋100 枚進(jìn)行孵化，記錄出殼率，健雛率和7 日齡以內(nèi)存活率(表6)和健康狀況。

從表5 中可見，新型氯煙熏劑和甲醛熏蒸后孵化，孵化率相近，但略低于空白對(duì)照組。且用兩種消毒劑熏蒸后，健雛率也較為接近，但都低于空白對(duì)照組。可見熏蒸消毒后對(duì)健雛率影響更大。只有0.8 g/m3組和空白對(duì)照組相近，比其他組較高，但不排除偶然因素。從表6 中可見，7 日齡以內(nèi)，新型氯煙熏劑和甲醛組存活率相差不大，但是都低于空白對(duì)照組。只有0.8 g/m3組和空白對(duì)照組相近，但不排除偶然因素。

表5 新型氯煙熏劑和甲醛熏蒸后的孵化率與健雛率

表6 新型氯煙熏劑和甲醛熏蒸后7日齡以內(nèi)存活率/ %

3 討論與分析

二氯異氰尿酸鈉在高溫下，產(chǎn)生二氧化氯和新生態(tài)氧，利用二氧化氯的強(qiáng)氧化能力，將菌體蛋白質(zhì)氧化，從而達(dá)到殺死細(xì)菌、病毒、芽孢等病原微生物的作用[1]。新型氯基消毒劑克蹄頓煙熏的試驗(yàn)結(jié)果表明，消毒時(shí)間、消毒濃度和濕度明顯影響消毒效果，在相同熏蒸劑量和時(shí)間的情況下，濕度高對(duì)于提高殺菌率有積極的影響，但是熏蒸120 min 時(shí)濕度低殺菌效果更好，具體原因還有待于進(jìn)一步的探討和分析。在相同熏蒸劑量和濕度的情況下，滅菌效果與熏蒸時(shí)間有正相關(guān)性；在相同時(shí)間和高濕度的情況下，滅菌效果與熏蒸濃度有正相關(guān)，在低濕度沒有顯示這一性質(zhì)，這可能與細(xì)菌種類及種蛋的帶菌數(shù)量有關(guān)，從試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，很顯然，種蛋帶菌并不均勻，可能是種蛋表面不干凈，導(dǎo)致粘附在蛋殼上的糞內(nèi)的病菌不能殺滅，故而出現(xiàn)上述情況[2]。

從熏蒸后種蛋表面細(xì)菌數(shù)來看，福爾馬林熏蒸消毒效果非常明顯，但由于甲醛具有較大的刺激性，福爾馬林熏蒸消毒種蛋時(shí)時(shí)間不宜過長，否則福爾馬林蒸汽分子將能透過蛋殼和殼膜，對(duì)胚胎造成不同程度的毒害[3]，時(shí)間越長，胚胎死亡越多，影響越大，造成頭照時(shí)呈現(xiàn)出大量無精蛋和死精蛋及后期胚蛋，從而降低入孵蛋的孵化率，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[4]。

新型氯煙熏劑和甲醛熏蒸后孵化，孵化率相近，但略低于空白對(duì)照組。且用兩種消毒劑熏蒸后，健雛率也較為接近，但都低于空白對(duì)照組。可見熏蒸消毒后對(duì)健雛率影響更大。只有0.8 g/m3組和空白對(duì)照組相近，比其他組較高，但不排除偶然因素。相比之下，新型氯煙熏劑穿透能力不如福爾馬林，所以對(duì)種蛋的影響不大。

通過各組試驗(yàn)結(jié)果的分析比較，在其他條件因素基本相同的情況下，利用福爾馬林熏蒸較新型氯煙熏劑消毒效果好，但0.8 g/m3和1 g/m3高濕度熏蒸60 min 的殺菌效果比甲醛組略好，為試驗(yàn)數(shù)據(jù)最優(yōu)組。

[1] 高迎春.二氯異氰尿酸鈉在養(yǎng)殖業(yè)中的開發(fā)應(yīng)用[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998，2：49.

[2] 梁棋，辜新貴.新型氯煙熏劑與福爾馬林對(duì)種蛋的消毒效果比對(duì)試驗(yàn)[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技，2011，36(1)：35-38.

[3] 徐秉波，孟憲武，桑蓮花，等.福爾馬林兩次熏蒸消毒種蛋對(duì)出雛率影響的報(bào)告[J].畜牧生產(chǎn)，2007(1)：7.

[4] 金光明，項(xiàng)文藝，章天霞.甲醛熏蒸消毒時(shí)間對(duì)種蛋孵化率的影響[J].安徽技術(shù)師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，16(3)：45-46.

Verification of fumigated effect of The new chlorine-based disinfectants

XUE Bao-jun1，2， XIN Liang1， FAN Fu-hui1，3， ZHANG Fei4， CHEN Jian1，F(xiàn)AN Qing-zeng1，2， WEN Hui-wen1， WANG Wen-cong1， CHEN Mo1， WANG Hong-jun1， CHANG Jian-yu1

(1.Colloge of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 2.Tianjin Zhongsheng Challenge Biotechnology Co., Ltd., Tianjin 300380, China; 3.Shanghai Kangchen Biotechnology Co., Ltd., Shanghai 201411, China; 4.Tianjin Development Zone Hongjing Industrial and Trade Co., Ltd., Tianjin 300457, China.)

To verify the bactericidal effects of a powdered disinfectant with the main ngredient of uric acid sodium dichloroisocyanurate. Detect its bactericidal effects on eggs. At low humidity sodium dichloroisocyanurate at the concentration of 0.4 g/m3, 0.6 g/m3, 0.8 g/m3, or 1 g/m3was used to fumigate the eggs for fumigation for 30 min, 60 min, or 120 min, and the killing bacteria on the surface of eggs was 73.49%, 77.23%, and 77.72%, 74.90%, 77.23%, and 91.72%, 70.55%, 89.20%, and 68.54%, and 84.36%, 80.12%, and 89.16%, respectively. At high humidity, sodium dichloroisocyanurate at the concentration of 0.4 g/m3, 0.6 g/m3, 0.8 g/m3, and 1 g/m3, was used to fumigate 30 min, 60 min, and 120 min. The killing bacteria on the surface of eggs was 81.33%, 91.25%, and 84.65%,84.74%, 91.15%, and 69.53%, 91.25%, 93.87%, and 78.48%, and 91.27%, 94.17%, and 72.18%, respectively. High humidity has a positive impact on the bactericidal effect of disinfectants, and this disinfectant has a good effect on bactericidal.

Sodium dichloroisocyanurate; humidity; Formalin; disinfection

s:CHANG Jian-yu ; WANG Hong-jun

2014-09-01

貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目[黔科合NV字(2012)3028號(hào)]

薛寶君(1975-)，男，碩士，從事禽病診療及獸藥研發(fā)工作，E-mail：1005098643@qq.com

辛良(1990-)，男，碩士生，主要從事中獸醫(yī)及獸醫(yī)外科學(xué)的研究，E-mail：parleyxin@163.com

注：辛良與薛寶君對(duì)本文具有同等貢獻(xiàn)

常建宇，E-mail：changjianyu@cau.edu.cn；王宏鈞，E-mail：31674077@qq.com

R187

A

0529-6005(2016)12-0000-00