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    硬幣表面細(xì)菌知多少?

    2016-02-03 08:10:16鄭文楚
    生物進(jìn)化 2016年4期
    關(guān)鍵詞:培養(yǎng)皿花盆硬幣

    鄭文楚

    硬幣表面細(xì)菌知多少?

    鄭文楚

    大人們總是讓我們勤洗手,因?yàn)槲覀兊氖趾屯饨缃佑|最多最頻繁,尤其當(dāng)拿過錢幣以后,媽媽會催促我快去洗手。但是,明明我們拿的是亮晶晶的硬幣或者嶄新的紙幣,何況我們的手看上去也是干干凈凈的,為什么卻要說洗洗“小臟手”呢?原來錢幣流通廣,經(jīng)過許多人轉(zhuǎn)手,接觸多種環(huán)境,不可避免地就會沾染上各種細(xì)菌甚至病毒。這些細(xì)菌、病毒呀就會跟著我們的手到處旅游,稍不留神它們可能就會入侵我們的身體,威脅我們的健康。它們是我們?nèi)庋劭床坏降摹拔kU分子”,靜悄悄地潛伏在錢幣的表面??赡苣銜X得不一定有這么嚴(yán)重,那么我們簡單地設(shè)計(jì)了一個小實(shí)驗(yàn),準(zhǔn)備借助一些實(shí)驗(yàn)手段來檢測,就可以告訴你硬幣上到底有多少細(xì)菌。

    采樣地點(diǎn)

    我們來到南京市玄武區(qū)花園路的華潤蘇果超市,在收銀臺換了一角、五角和一元硬幣各三枚共九枚硬幣。

    實(shí)驗(yàn)材料

    我們都知道植物的生長離不開土壤、水和陽光,同樣,細(xì)菌的培養(yǎng)也需要養(yǎng)分和環(huán)境。盆栽植物都有花盆,細(xì)菌的生長也需要“花盆”,就是那些圓形的培養(yǎng)皿加培養(yǎng)基,而且不同的細(xì)菌喜歡“吃”的養(yǎng)料不同,所以有各種各樣不同配方的培養(yǎng)基。我們這次準(zhǔn)備的是牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基,它是一種應(yīng)用十分廣泛的天然培養(yǎng)基,很多細(xì)菌都喜歡“吃”。按照配方(牛肉膏5.0克;蛋白胨10.0克;氯化鈉5克;水1000毫升;瓊脂15-20克),用天平稱取各種試劑,加適量水將試劑溶解后用量筒量度到1000毫升,pH值調(diào)整到7.2-7.4,再經(jīng)過高壓濕熱滅菌就可以了 (滅菌條件:壓力為1. 05kg/cm2,溫度為121℃,滅菌時間:30分鐘)。實(shí)驗(yàn)過程中我們還需要去離子水(清洗硬幣表面用),培養(yǎng)皿,涂棒,50毫升離心管等,所有器具都要經(jīng)過高壓濕熱滅菌30分鐘以上并烘干。

    實(shí)驗(yàn)方法

    制作培養(yǎng)皿平板,準(zhǔn)備“細(xì)菌生長花盆”:在紫外滅菌的超凈工作臺內(nèi),將適量滅菌后的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 (瓊脂培養(yǎng)基加熱是液體狀的,低于40℃后成固體狀)加入到滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi),待其凝固后放入培養(yǎng)箱內(nèi)37℃過夜培養(yǎng),第二天觀察平板表面是否有細(xì)菌菌落。必須確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌污染才可以作為實(shí)驗(yàn)待用培養(yǎng)皿平板,否則不能證明培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌是我們加入的硬幣表面的 “細(xì)菌種子”。圖1展示培養(yǎng)基制作過程。這樣,為硬幣上的細(xì)菌準(zhǔn)備的潔凈“花盆”就大功告成了。

    圖1.制作培養(yǎng)皿平板,準(zhǔn)備“細(xì)菌生長花盆”

    圖2.超凈臺內(nèi)完成各項(xiàng)試驗(yàn)過程

    清洗硬幣,準(zhǔn)備硬幣表面的“細(xì)菌種子”:在事先編號的50毫升離心管內(nèi)加入10毫升無菌水,并將準(zhǔn)備好的九枚硬幣分別放入(這個工作要在超凈工作臺完成)。接下來就要充分清洗硬幣了,首先用超聲清洗儀清洗,再用低速離心機(jī)離心清洗,目的就是盡量把附著在硬幣上的細(xì)菌充分地洗到無菌水里;經(jīng)過兩步清洗的離心管再用震蕩器混合均勻,我們假定硬幣上的細(xì)菌都被充分洗在10毫升的水里而且盡量混合均勻了。這些離心管里的水溶液就是我們準(zhǔn)備種在“細(xì)菌生長花盆”里的“細(xì)菌種子”了。

    涂布培養(yǎng)皿平板,開始“種細(xì)菌種子”:在超凈工作臺中,分別取混合均勻的各硬幣清洗液0.1毫升,拿出準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板,用滅菌的玻璃涂棒把0.1毫升“細(xì)菌種子”均勻涂布在平板上,每個硬幣清洗液涂布三個平板,方便記錄時取平均值。這一步操作起來比我們種植盆栽植物要麻煩一些,定量取硬幣的清洗液是為了方便計(jì)數(shù),另外用玻璃涂棒反復(fù)涂布也是為了讓“細(xì)菌種子”們能均勻地生長在培養(yǎng)基上。圖2顯示試驗(yàn)過程。

    細(xì)菌培養(yǎng)需要合適的環(huán)境溫度:將涂布好的所有培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱內(nèi)37℃培養(yǎng)至少18小時。一般細(xì)菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時即可生長。

    計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì),觀察硬幣上的細(xì)菌的生長情況:對培養(yǎng)皿內(nèi)菌落計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì),通過統(tǒng)計(jì)0.1毫升硬幣清洗液里細(xì)菌的菌落個數(shù),推算出10毫升硬幣清洗液中的細(xì)菌菌落總數(shù),從而可以估算出每個硬幣上的細(xì)菌菌落數(shù)量。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

    經(jīng)過一系列的實(shí)驗(yàn)過程,18小時后,培養(yǎng)箱內(nèi)的“細(xì)菌花盆”里都長出了形態(tài)不同、數(shù)量不同的細(xì)菌菌落,符合我們的預(yù)期。不過可能由于稀釋度過低,五角硬幣有兩個都沒有長出細(xì)菌,另外,我們觀察和記錄了硬幣表面細(xì)菌菌落的生長情況。

    1.觀察培養(yǎng)皿里細(xì)菌生長情況。圖3和圖4展示細(xì)菌菌落照片。

    圖3.一元硬幣②培養(yǎng)基上大量細(xì)菌菌落生長情況

    圖4.牛肉膏蛋白胨瓊脂平板上細(xì)菌菌落形態(tài)不同

    表1.統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿上細(xì)菌菌落并估算硬幣表面細(xì)菌菌落個數(shù)

    2.利用電子掃描顯微鏡直接觀察硬幣表面微生物形態(tài)特征,如圖5所示。

    3.統(tǒng)計(jì)每個硬幣0.1毫升清洗液在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)皿上長出的細(xì)菌菌落數(shù),記錄時取三個培養(yǎng)皿菌落總數(shù)的平均值,并估算硬幣表面細(xì)菌情況,結(jié)果在表1中給出。

    通過實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)除了用無菌棉簽直接涂抹硬幣的方法,用清洗硬幣的方式來檢測硬幣表面細(xì)菌菌落個數(shù)的方法也是可行的,另外,我們選取硬幣的時候特意找的是眼睛看上去潔凈程度不同的硬幣,通過實(shí)驗(yàn)證明,看上去臟的硬幣并不一定上面的細(xì)菌就很多,因?yàn)橛矌疟砻嫔系奈蹪n可能只是灰塵污垢。所以即使錢幣看上去干干凈凈的,也并不代表上面的細(xì)菌或者病毒的數(shù)量少,因?yàn)樗鼈兊膫€體很小,是我們?nèi)庋塾^察不到的。

    圖5.電子掃描顯微鏡直接觀察一元硬幣表面細(xì)菌形態(tài)特征

    我們可以觀察到在“細(xì)菌花盆”了生長的細(xì)菌的菌落大小不同、顏色也不盡相同,有乳白色的,有發(fā)淡黃色的,也有帶有嫩粉色的,從菌落的形態(tài)看,大小不均一,有光滑型的,表面光滑濕潤有光澤;有粗糙型的,菌落扁平干澀,邊緣不整齊;還有黏液型的,但是以光滑型居多。另外掃描電鏡圖片也顯現(xiàn)出不同形態(tài)的細(xì)菌,從圖中可以看出硬幣表面至少有三種以上的細(xì)菌。至于具體是哪幾種細(xì)菌還需要通過一系列細(xì)菌的分類和鑒定實(shí)驗(yàn)才能最終確定。

    通過做實(shí)驗(yàn),我們了解到硬幣表面細(xì)菌真不少,也深刻認(rèn)識到養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣的重要性。而且這樣看來,勤洗手的確能有效地幫助我們減少病從口入的機(jī)會,人們常說的 “愛干凈,勤洗手,病菌走”最好牢記在心中,落實(shí)在行動。

    (作者為北京東路小學(xué)學(xué)生,指導(dǎo)老師王馨)

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