獸醫(yī)中藥的標準化之路

顧進華

(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 ， 北京海淀100081)

獸醫(yī)中藥的標準化之路

顧進華

(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 ， 北京海淀100081)

中藥理論獨特，作用機理難于用現(xiàn)代醫(yī)學理論闡明；中藥成分復雜、炮制規(guī)范不統(tǒng)一；處方種類繁多、制劑工藝多樣，導致中藥質(zhì)量難于量化控制。

中藥標準化是歷史命題，從最早的中藥標準《神農(nóng)本草經(jīng)》，最早的中藥材炮制標準《雷公炮制論》，到李時珍的《本草綱目》[1]，《元亨療馬集》，再到現(xiàn)代的《中國藥典》、《中國獸藥典》，為保證中藥的安全性和有效性做出了貢獻。中藥標準化是時代發(fā)展要求，《中醫(yī)藥創(chuàng)新發(fā)展規(guī)劃綱要(2006-2020)》把中藥技術(shù)標準研究作為優(yōu)先發(fā)展領(lǐng)域。

實現(xiàn)獸醫(yī)中藥研究開發(fā)、生產(chǎn)、銷售的標準化，是中藥產(chǎn)品安全有效、質(zhì)量可控的重要保證。標準化是獸藥評審中客觀評價、科學衡量一個新藥的重要依據(jù)，是關(guān)系到中藥生存的關(guān)鍵問題。標準化可以為中藥獲得知識產(chǎn)權(quán)保護提供良好的技術(shù)參照規(guī)范[2]，可有效增強我國中藥產(chǎn)業(yè)的國際競爭力。

1 藥材、飲片的標準化是獸醫(yī)中藥標準化的基礎(chǔ)

我國復雜的氣候和地理環(huán)境孕育了眾多療效獨特的道地藥材，從《神農(nóng)本草經(jīng)》到20世紀初，藥材的“道地”一直是行之有效的質(zhì)量控制思路和方法[3]。道地藥材理論是中藥材質(zhì)量控制的重要理論。中藥材的標準化應(yīng)該重視傳統(tǒng)方法，結(jié)合產(chǎn)地、加工、炮制，甚至適應(yīng)癥等進行綜合評價和質(zhì)量控制。目前，按照GAP要求種植藥材是保證藥材質(zhì)量的重要手段。在現(xiàn)有基本標準之上，研究制定優(yōu)質(zhì)標準，選用優(yōu)質(zhì)藥材。按照中藥道地藥材理論建立綜合質(zhì)量評價指標體系，嚴格遵守采收季節(jié)、采收加工要求，這已經(jīng)不是一般的質(zhì)量標準，而是優(yōu)質(zhì)標準。貨真而質(zhì)優(yōu)，是中藥材質(zhì)量控制的一項獨特而又值得肯定的標準。

飲片的標準化要通過炮制的規(guī)范化來實現(xiàn)。炮制是發(fā)揮中藥藥性的重要手段，在制劑中使用國家標準或地方標準藥材應(yīng)遵守有關(guān)炮制規(guī)范；研究新藥材，應(yīng)結(jié)合療效，加強炮制研究，嚴格規(guī)定藥材飲片的炮制工藝標準。

2 生產(chǎn)工藝與提取物的標準化是獸醫(yī)中藥標準化的關(guān)鍵

現(xiàn)代化大生產(chǎn)對獸醫(yī)中藥生產(chǎn)工藝的規(guī)?；?、標準化提出了迫切需求。從現(xiàn)代醫(yī)學來看，中藥具有多組分、多途徑、多靶點的特點，不僅是成分不清晰，甚至是主要作用也不明晰。對于成分復雜及藥理作用多樣的中藥及制劑，僅對單一或少數(shù)指標成分進行定性、定量分析，并不能控制質(zhì)量。

工藝及劑型研究過程中，應(yīng)該堅持以療效為導向，深入研究中藥化學成分的提取、分離和精制技術(shù)，絕不能以犧牲療效為代價來換取劑型的進步。對超微粉、透皮劑等新出現(xiàn)的劑型要盡早研究制定制劑通則，確立新標準。必須加強中藥質(zhì)量全程控制技術(shù)研究，嚴格按照GMP要求進行生產(chǎn)，從原材料、生產(chǎn)工藝和條件、半成品、包裝等全程標準化的角度來控制中藥質(zhì)量。

中藥提取物可以是制劑生產(chǎn)過程中的中間產(chǎn)品，也可以是獨立的成品或制劑，與炮制品一樣可以配伍入藥使用。提高中藥提取物標準化程度，是促進中藥制劑標準化的重要手段。經(jīng)過努力，2010年版《中國獸藥典》新增人參莖葉總皂苷、丹參酮提取物、茵陳提取物等植物油脂和提取物16個[4-5]，并首次將“植物油脂和提取物”單列，集中收載22個中藥提取物品種，中藥提取物的特殊性及其在制劑應(yīng)用中的重要地位凸顯。

獸藥研發(fā)已經(jīng)開始使用中藥提取物配伍制劑，如黃芪多糖粉、博落回散，以及由“黃芩提取物”、“黃藤素”兩種提取物配伍處方的新獸藥制劑“芩藤注射液”。

目前生產(chǎn)實踐中，提取物種類繁多，應(yīng)該綜合考慮各類提取物的定位，盡量統(tǒng)一標準。2015年版《中國藥典》正文收載中藥提取物47種，一些制劑后附專用提取物質(zhì)量標準，大多有明確的制劑指向，有較完整的質(zhì)量控制標準，可以大量借鑒并移植為獸藥。

3 中藥質(zhì)量評價及其檢測方法標準研究

中藥的質(zhì)量集中體現(xiàn)在療效，控制質(zhì)量是為了確保療效，質(zhì)量標準的建立是中藥標準化的核心問題。

獸醫(yī)中藥國家標準主要采用“基源”、“處方”、“性狀”、“鑒別”、“檢查”、“特征(指紋)圖譜”、“含量測定”等對中藥質(zhì)量進行控制。

“獸藥規(guī)范”1978年版開始采用顯微鑒別、薄層層析法；《中國獸藥典》1990年版開始采用薄層色譜(TLC)鑒別，用分光光度法做含量測定；2000年版收載對照藥材的TLC鑒別，用TLC和高效液相色譜法(HPLC)做含量測定；2005版大幅度增加TLC鑒別方法；2010年版大幅度增加TLC、HPLC方法，增加了特征(指紋)圖譜的測定；2015年版進一步完善了顯微鑒別，增加了質(zhì)譜法、二氧化硫殘留量測定法。

獸醫(yī)中藥標準中的控制方法除化學定量、儀器分析方法之外，廣泛應(yīng)用顯微、薄層等定性方法，以及生物學方法。概括起來，可以分為“性狀評價”、“化學評價”、“生物評價”幾個大類。

3.1 性狀評價

3.1.1 外觀性狀不可或缺 規(guī)定和評價藥品的外觀、氣、味、一般穩(wěn)定性、溶解度以及物理常數(shù)等。包括藥材的經(jīng)驗鑒別。

3.1.2 顯微性狀鑒別簡便可行 利用顯微鏡觀察藥材(飲片)切片、粉末、解離組織或表面制片的組織構(gòu)造、細胞形狀、內(nèi)含物的特征，以及顯微化學反應(yīng)，用以鑒別藥材、制劑的真?zhèn)闻c純度的顯微鑒別技術(shù)。

顯微鑒別有著快速、簡便、準確的特點。不少中成藥所具有的顯微綜合特征專屬性強，不易發(fā)生混淆。應(yīng)用顯微鑒別技術(shù)，既可檢測出中成藥所列出的組分，還能夠通過指標性鑒別特征檢測出處方中某些未列出的組分，用于處方外非法添加物的檢測。隨著顯微鑒定與顯微化學、高性能顯微鏡與數(shù)碼技術(shù)的結(jié)合應(yīng)用，顯微鑒別技術(shù)還會得到更廣泛的應(yīng)用。

3.2 理化評價 中藥的鑒別，除依據(jù)藥材來源，以及利用經(jīng)驗鑒別法、顯微鑒別法外，大量采用理化方法、色譜法、特征(指紋)圖譜等方法以及某些理化常數(shù)的測定，來判斷藥材、植物油脂和提取物、制劑的真?zhèn)巍?/p>

3.2.1 薄層色譜應(yīng)用廣泛 薄層色譜為目前中藥制劑質(zhì)量控制采用最多也是非常有效的定性檢測方法。一般中藥制劑中2/3以上的藥材都可以借鑒單個藥材薄層特點建立薄層鑒別方法，新藥開發(fā)中應(yīng)廣泛開展試驗，驗證或探索薄層展開系統(tǒng)條件。確實分離度不好或薄層陰性干擾太大的，應(yīng)在申報資料中說明不作為鑒別內(nèi)容的理由。

3.2.2 指紋圖譜/特征圖譜主要運用于提取物 中藥指紋圖譜/特征圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。目前主要應(yīng)用于中藥提取物，三七總皂苷、丹參總酚酸提取物、丹參酮提取物的指紋圖譜；人參莖葉總皂苷、連翹提取物、茵陳提取物的特征圖譜。

3.2.3 含量測定存在一定的局限性 采用化學、儀器測定的方法測定獸醫(yī)中藥有效成分或指標成分的含量，是獸醫(yī)中藥質(zhì)量控制的重要手段。在新藥研究過程中要確定部分含量指標，通過測定原料和最終產(chǎn)品的含量，計算目標成分的轉(zhuǎn)移率，以考察工藝的合理性。面對成分復雜的獸醫(yī)中藥，對單一甚或多個指標成分進行含量測定，都存在一定的局限性。采用簡單含量標準難以適應(yīng)多治療目的質(zhì)量評價要求，中藥質(zhì)量控制模式不應(yīng)拘泥于單一的“找成分，測含量”的化學評價模式[7]。

3.2.4 質(zhì)量標準的精準與模糊控制 目前，對單一或少數(shù)指標成分進行定性、定量分析是獸醫(yī)中藥質(zhì)量分析常用方法。對于成分復雜及藥理作用多樣的中藥及制劑，單一或少數(shù)指標成分的定性、定量分析，并不能控制質(zhì)量，不能全面反映其臨床功效；制定一個或多個量化指標也無法準確指導臨床應(yīng)用。中藥成分復雜，各味藥甚至一味藥的不同成分之間都可能有相互的配伍效應(yīng)，既要重視定性定量指標，又要注重與藥理臨床結(jié)合的綜合評價指標[8]。

對于藥材而言，所含成分95%以上是不清楚的，規(guī)定有效成分或指標成分的含量，在絕大多數(shù)情況下，缺少可行性。由于生物多樣性影響，不少藥材所測含量變化幅度極大。黃連中的小檗堿、山茱萸中的熊果酸、牡丹皮中的丹皮酚等，由于產(chǎn)地、氣候、土壤等原因經(jīng)常達不到國家標準，即所謂“不合格的真品藥材”[3]。美國第24版藥典對番瀉葉、番瀉葉浸膏和番瀉葉糖漿均未要求測定番瀉苷含量，對番瀉葉藥材質(zhì)量控制著重在形態(tài)特征、非藥用部位灰分等指標上。

如何根據(jù)獸醫(yī)中藥標準化特色要求，運用非線性科學、模糊數(shù)學、灰色系統(tǒng)理論等，實現(xiàn)獸醫(yī)中藥質(zhì)量的精確而又模糊的整體控制是今后研究的重要命題。

3.3 生物評價 生物評價具有藥效相關(guān)、整體可控等優(yōu)勢，符合中醫(yī)藥特點的質(zhì)量標準控制模式及方法，是中藥質(zhì)量標準化的重要發(fā)展方向[9]。

中藥質(zhì)量生物評價可分為兩大類：一是基于遺傳信息的中藥基源DNA分子鑒定，如RAPD、DNA條形碼等，主要用于中藥基源鑒定；二是基于生物效應(yīng)的中藥生物效價或活性檢測，主要用于中藥質(zhì)量的優(yōu)劣評價。

2005年版藥典中水蛭的含量測定，國家藥品標準中的消栓腸溶膠囊的效價測定，均為借鑒生物制品中酶效價測定方法。早在20世紀90年代，農(nóng)業(yè)部批準的新藥黃芪多糖注射液就開始采用小鼠脾增重方法測定生物活性。中國藥典已經(jīng)對清熱解毒類、活血化瘀類中藥制定了一些生物評價標準，以及動物藥如蘄蛇的模板DNA提取、PCR反應(yīng)等等，都可以借鑒使用。對于另外的中醫(yī)藥的基礎(chǔ)理論，如寒熱溫涼，中醫(yī)證的辨證論治，現(xiàn)在沒有確切的現(xiàn)代概念的認識，但其本質(zhì)也是一種生物體的過程和反應(yīng)，隨著現(xiàn)代科學的發(fā)展，如基因組學、蛋白組學、混沌醫(yī)學等的發(fā)展，也許可以將中藥的藥性、功能與主治等關(guān)聯(lián)起來，出現(xiàn)新的、具有變革性的生物檢定方法。

我們要深入研究，在加強現(xiàn)代檢測手段應(yīng)用的同時，重視傳統(tǒng)技術(shù)手段；在采用物理、化學評價技術(shù)的同時，大力發(fā)展生物評價技術(shù)。在傳統(tǒng)理論和技術(shù)手段基礎(chǔ)上，綜合運用現(xiàn)代物理、化學、生物學技術(shù)手段，創(chuàng)新理論與方法，完全可以按照中醫(yī)藥基本理論，建立符合中藥特點的科學、合理的質(zhì)量標準評價體系，趟出一條中藥研究、生產(chǎn)與質(zhì)量控制的標準化新路。

[1] 王茂，沈紹武，常凱，等.我國中藥標準化現(xiàn)狀及發(fā)展對策研究[J].醫(yī)學信息學雜志，2013，34(3)：52-54.

[2] 史怡然，王一濤，卞鷹，等. 中藥現(xiàn)代化的兩大基石-中藥標準化和中藥知識產(chǎn)權(quán)保護[J]. 中國藥業(yè).2005，14(4)：2-3.

[3] 胡世林.道地藥材與中藥標準化[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2005，1(1)：39-42.

[4] 丁安偉.中藥現(xiàn)代化發(fā)展歷程的回顧與思考[J].江蘇中醫(yī)藥,2004，25(10)：1-4.

[5] 中華人民共和國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典2010年版[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011.

[6] 顧進華，段文龍，胡元亮，《中華人民共和國獸藥典》(2010年版)二部解讀[J].中國獸藥雜志，2011，45(9)：4-9.

[7] 肖小河，王伽伯，代春美，等.面向臨床的中藥標準化研究 [J]. 世界科學技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2010，12(4)：617-621.

[8] 華鷹.中藥標準化與中藥專利保護[J].科技管理研究,2007(4)：220-222.

[9] 肖小河，王伽伯，鄔丹.生物評價在中藥質(zhì)量標準化中的研究與應(yīng)用[J].世界科學技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2014，16(3)：514-518.

2016-06-08