頭花蓼提取物不同給藥方式治療炎癥大鼠的效果

曹 芳 段 萍 王洪平 張友波

(黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州 都勻 558000)

頭花蓼提取物不同給藥方式治療炎癥大鼠的效果

曹 芳 段 萍1王洪平2張友波2

(黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州 都勻 558000)

目的 探討灌胃給藥及靜脈注射頭花蓼提取物治療炎癥大鼠的效果。方法 將180只SD雄性大鼠隨機(jī)分為灌胃給藥及靜脈注射組，各90只，兩組再各分為模型組、布洛芬組及頭花蓼提取物組3個(gè)亞組，各30只。模型組灌胃或靜脈注射5%吐溫-80溶液，布洛芬組灌胃或靜脈注射布洛芬配制液7.5 mg/kg，頭花蓼提取物組灌胃或靜脈注射頭花蓼提取物10 mg/kg，連續(xù)給藥7 d后，分別采用冰醋酸、二甲苯和醋酸制備炎癥模型，觀察不同組大鼠炎癥抑制效果。結(jié)果 不同的給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組大鼠的扭體次數(shù)、耳廓腫脹度和腹腔毛細(xì)管通透性均明顯低于模型組(P<0.05)；與灌胃給藥相比，靜脈注射布洛芬組大鼠上述各指標(biāo)無顯著變化(P>0.05)，而頭花蓼提取物組則顯著降低，且低于布洛芬組(P<0.05)。結(jié)論 頭花蓼提取物具有顯著的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，靜脈注射方式效果更顯著。

頭花蓼提取物；炎癥

頭花蓼(Polygonum,capitatatum)為蓼科屬多年生草本植物，中藥傳統(tǒng)理論認(rèn)為，它具有清熱解毒、活血止痛、利尿等功效，現(xiàn)代藥理活性研究發(fā)現(xiàn)，它具有抗菌、抗感染、抗氧化等多種活性〔1〕，主要作用成分包括揮發(fā)油、酚酸類、黃酮類、有機(jī)酸、酯、醛、醇類及其他類化合物〔2〕，主要用于泌尿系統(tǒng)感染的治療。研究顯示頭花蓼中成藥與抗生素聯(lián)合治療尿路感染的總有效率達(dá)93.3%〔3,4〕。此外，頭花蓼提取物中的黃酮類化合物還具有抗感染功能〔5,6〕，但目前關(guān)于其最佳給藥方式仍然存在巨大分歧。本實(shí)驗(yàn)擬觀察頭花蓼提取物的抗感染、鎮(zhèn)痛效果。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 普通級健康SD雄性大鼠180只，體重300～400 g，平均體重(350.26±5.31)g，購自蘭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，動物許可證號：SCXK(甘)2009-0004，在室溫21℃～ 23℃、濕度40%～60%、自然光照條件下飼養(yǎng)，自由攝食飲水。

1.2 藥品與儀器 頭花蓼藥材粉末購自貴州施秉；冰醋酸、二甲苯(分析純)、醋酸(分析純)、三氟乙酸均購自生工生物工程股份有限公司；布洛芬購自上海永葉生物科技有限公司；伊文思藍(lán)購自大連美侖生物技術(shù)有限公司；打孔器(直徑8 mm)購自北京普凱瑞生物科技有限公司；電子天平(AG135型)購自上海鼎國生物技術(shù)有限公司；紫外可見分光光度計(jì)購自北京百泰克生物技術(shù)有限公司。

1.3 頭花蓼提取 取頭花蓼藥材粉末25.56 g過60目篩，70%乙醇浸泡15 h，索氏提取器中回流提取1.5 h，重復(fù)3次，冷卻室溫，減壓抽濾，最后將過濾液濃縮，得乙醇提取物1.45 g。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組 大鼠禁食15 h后隨機(jī)分為灌胃給藥及靜脈注射組，各90只，兩組再分為3個(gè)亞組，分別為模型組、布洛芬組及頭花蓼提取物組，各30只。模型組灌胃或靜脈注射5%吐溫-80溶液，布洛芬組給予布洛芬配制液(100 mg布洛芬片+100 ml 5%羧甲基纖維素鈉)灌胃或靜脈注射7.5 mg/kg，頭花蓼提取物組灌胃或靜脈注射頭花蓼提取物10 mg/kg，各組給藥均為1次/d，連續(xù)給藥7 d。給藥后將3亞組分成①～③號實(shí)驗(yàn)組待用，每組10只大鼠。

1.5 冰醋酸致大鼠疼痛實(shí)驗(yàn) 末次給藥30 min后，向①號實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射1%冰醋酸溶液0.2 ml致痛，給藥劑量為0.1 ml/10 g。致痛后15 min觀察大鼠扭體反應(yīng)，即大鼠腹部內(nèi)凹、后肢與軀干伸張，同時(shí)臀部高起，記錄扭體次數(shù)。

1.6 二甲苯致大鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn) 末次給藥1 h后，分別在②號實(shí)驗(yàn)組大鼠左耳前后兩面均勻涂抹二甲苯0.1 ml，右耳不涂，4 h后將大鼠脫頸處死，剪下雙耳，用打孔器分別在兩耳的同一部位打下圓耳片，稱重，以大鼠左右耳片質(zhì)量差表示腫脹度。

1.7 醋酸致大鼠毛細(xì)管通透性增高實(shí)驗(yàn) 末次給藥后1 h，分別向③號實(shí)驗(yàn)組大鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水0.1 ml/g，隨即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/10 g，20 min后將大鼠脫臼處死，剪開腹腔皮膚，用2 ml生理鹽水洗滌腹腔3次，吸取腹腔洗液，3 000 r/min離心15 min，取上清液用分光光度計(jì)在620 nm處比色，測定光密度值(OD值)。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS10.0軟件，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)、單因素方差分析、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 不同給藥方式對冰醋酸致痛大鼠的作用 不同的給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組的扭體次數(shù)均明顯少于模型組〔灌胃給藥：(47.52±6.86)次；靜脈注射(47.37±7.01)次，P<0.05〕。灌胃給藥方案中，布洛芬組〔(31.55±3.25)次〕和頭花蓼提取物組〔(28.56±2.99)次〕的扭體次數(shù)比較無差異(P>0.05)；靜脈注射方案中，頭花蓼提取物組的扭體次數(shù)〔(20.11±2.13)次〕少于布洛芬組〔(31.69±3.19)次，P<0.05〕。與灌胃給藥相比，靜脈給藥布洛芬組扭體次數(shù)無顯著變化(P>0.05)，而頭花蓼提取物組扭體次數(shù)顯著降低(P<0.05)。

2.2 不同給藥方式對二甲苯致大鼠耳廓腫脹的作用 灌胃給藥方案中，模型組、布洛芬組、頭花蓼提取物組的耳廓腫脹度分別為(13.25±2.10)mg/g、(7.61±0.45)mg/g、(6.45±1.21)mg/g，而靜脈注射方案中三組的耳廓腫脹度分別為(13.72±1.56)mg/g、(7.12±0.26)mg/g、(4.37±0.38)mg/g。不同的給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組的大鼠耳廓腫脹度均明顯低于模型組(P<0.05)。灌胃給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組的耳廓腫脹度無顯著差異(P>0.05)；靜脈注射方案中，頭花蓼提取物組的耳廓腫脹度低于布洛芬組(P<0.05)。與灌胃給藥相比，靜脈注射布洛芬組的耳廓腫脹度無顯著變化(P>0.05)，而頭花蓼提取物組的耳廓腫脹度則顯著降低(P<0.05)。

2.3 不同給藥方式對醋酸致大鼠腹腔毛細(xì)管通透性增高的作用 灌胃給藥方案中，模型組、布洛芬組、頭花蓼提取物組的OD值分別為(0.52±0.12)、(0.33±0.11)、(0.30±0.09)，而靜脈注射方案中三組的OD值分別為(0.55±0.11)、(0.37±0.12)、(0.21±0.14)。不同的給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組的OD值均明顯低于模型組(P<0.05)。灌胃給藥方案中，布洛芬組和頭花蓼提取物組的OD值無顯著差異(P>0.05)；靜脈注射方案中，頭花蓼提取物組的OD值低于布洛芬組(P<0.01)。與灌胃給藥相比，靜脈給藥布洛芬組的OD值無顯著變化(P>0.05)，而頭花蓼提取物組的OD值則顯著降低(P<0.05)。

3 討 論

頭花蓼是貴州苗族民間常用藥物，其單方制劑也得到了廣泛的臨床應(yīng)用〔7〕。國內(nèi)外對頭花蓼的報(bào)道以其化學(xué)成分的分離和臨床藥理研究居多，而對其具體的抗感染機(jī)制及抗感染有效部位的研究較少。炎癥是威脅人類健康的一種常見和多發(fā)的疾病，其病理變化包括變質(zhì)、滲出和增生〔8〕，主要表現(xiàn)為毛細(xì)血管通透性增加致病變組織腫脹、疼痛。急性炎癥通常具有紅、腫、熱、痛等變化，同時(shí)往往伴有發(fā)熱、白細(xì)胞增多等全身反應(yīng)。這些變化的實(shí)質(zhì)是機(jī)體免疫系統(tǒng)對外來異物的客觀反應(yīng)。致炎因子作用于機(jī)體后，一方面損害正常組織，使部分組織發(fā)生趨化、變形；另一方面刺激增強(qiáng)機(jī)體抗病功能，消滅致炎因子，修復(fù)受損害的組織，從而使機(jī)體內(nèi)、外環(huán)境之間達(dá)到新的平衡?；瘜W(xué)研究表明，頭花蓼所含的主要有效成分是黃酮類和酚酸類化合物，這兩種成分都具有抗菌和抗感染活性〔9,10〕。

布洛芬的解熱、鎮(zhèn)痛、抗感染作用已被臨床研究證實(shí)〔11,12〕。本研究結(jié)果表明，布洛芬和頭花蓼提取物均有抗感染作用，甚至在靜脈注射給藥方案下，其效果優(yōu)于布洛芬，可能與其減少炎性組織中前列腺素E2的生成、抑制組織炎癥中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物形成和降低NO的活力有關(guān)，具體抗感染機(jī)制有待進(jìn)一步研究。比較灌胃給藥與靜脈注射頭花蓼對3組不同炎癥大鼠模型的療效發(fā)現(xiàn)，靜脈注射給藥方案效果更佳，可明顯改善炎癥大鼠的組織腫脹、疼痛，抑制毛細(xì)血管通透性增加，具有較好的抗感染作用。頭花蓼提取物有效成分在腸道內(nèi)滯留時(shí)間較長，難以吸收，生物利用度低。而靜脈注射起效快，可經(jīng)血液循環(huán)迅速擴(kuò)散至全身，將藥物達(dá)致療效濃度，并可持續(xù)維持療效所需的恒定濃度，因此鎮(zhèn)痛、抗感染效果顯著。

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〔2016-05-11修回〕

(編輯 李相軍)

貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)基金資助(gzwkj2013-1-074)

曹 芳(1971-)，女，副教授，主要從事中草藥藥效學(xué)和藥動學(xué)方面的研究。

R284

A

1005-9202(2016)24-6065-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.008

1 黔南州藥品食品檢驗(yàn)所

2 北京大學(xué)藥學(xué)院天然藥物學(xué)系 天然藥物及仿生藥物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室