夫西地酸對尋常痤瘡患者皮損表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的體外抗菌作用研究

高詩燕 路永紅 陳濤 王珊珊 何麗莎 單雨婷 周培媚 瓦慶彪 吳波 李林 陳前明 保勇 尹亞菲 陸玲

610017 成都市第二人民醫(yī)院 遵義醫(yī)學(xué)院附屬成都醫(yī)院皮膚科（高詩燕、路永紅、陳濤、王珊珊、何麗莎、單雨婷、周培媚、瓦慶彪、吳波、李林、陳前明），檢驗(yàn)科（保勇、尹亞菲、陸玲）

夫西地酸對尋常痤瘡患者皮損表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的體外抗菌作用研究

高詩燕 路永紅 陳濤 王珊珊 何麗莎 單雨婷 周培媚 瓦慶彪 吳波 李林 陳前明 保勇 尹亞菲 陸玲

610017 成都市第二人民醫(yī)院 遵義醫(yī)學(xué)院附屬成都醫(yī)院皮膚科（高詩燕、路永紅、陳濤、王珊珊、何麗莎、單雨婷、周培媚、瓦慶彪、吳波、李林、陳前明），檢驗(yàn)科（保勇、尹亞菲、陸玲）

目的探討2%夫西地酸乳膏對尋常痤瘡皮損中表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的體外抗菌活性。方法用瓊脂擴(kuò)散法作藥敏試驗(yàn)，比較夫西地酸和莫匹羅星對表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的體外抗菌活性。結(jié)果夫西地酸和莫匹羅星對表皮葡萄球菌的抑菌環(huán)直徑分別為（31.76±6.05）和（31.98±17.20）mm，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.132，P＞0.05），對痤瘡丙酸桿菌的抑菌環(huán)直徑分別為（18.15±3.24）和（3.00±0.00）mm，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=24.27，P＜0.05）。結(jié)論夫西地酸體外對尋常痤瘡患者皮損中的優(yōu)勢菌株表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌有較強(qiáng)的抗菌作用。

尋常痤瘡；梭鏈孢酸；痤瘡丙酸桿菌；表皮葡萄球菌；微生物敏感性試驗(yàn)

夫西地酸乳膏是一種治療皮膚感染藥物。研究顯示，夫西地酸對引起皮膚感染的革蘭陽性球菌尤其葡萄球菌高度敏感，對耐甲氧西林葡萄球菌有較強(qiáng)的抗菌活性，對革蘭陽性厭氧菌、百日咳桿菌、奈瑟菌、大部分脆弱擬桿菌和某些梭狀芽孢桿菌敏感，對鏈球菌、腸球菌及革蘭陰性菌中度敏感［1?3］。我們探討夫西地酸乳膏對尋常痤瘡皮損中的優(yōu)勢菌種（表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌）的體外抗菌活性，為治療痤瘡合理選擇抗生素提供一定的依據(jù)。

一、材料與方法

1.實(shí)驗(yàn)菌株：表皮葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC1228標(biāo)準(zhǔn)菌株）和痤瘡丙酸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC6919標(biāo)準(zhǔn)菌株）由衛(wèi)生部藥品和生物制品檢定所提供。表皮葡萄球菌菌株（103株）和痤瘡丙酸桿菌菌株（60株）分離自67例尋常痤瘡患者（男28例，女39例）皮損內(nèi)容物。夫西地酸乳膏（香港澳美制藥廠有限公司）：批號1306544，規(guī)格：10 g∶0.2 g；莫匹羅星軟膏（中美天津史克制藥有限公司）：批號12020744，規(guī)格：5 g∶0.1 g。

2.方法：將表皮葡萄球菌調(diào)節(jié)菌懸液濁度至0.5麥?zhǔn)媳葷岫龋∕cFarland），痤瘡丙酸桿菌調(diào)節(jié)菌懸液濁度至1.0麥?zhǔn)媳葷岫?，制備懸液時平板在有氧環(huán)境中不應(yīng)超過30 min。

表皮葡萄球菌培養(yǎng)基：將MH瓊脂高壓滅菌后冷卻至45℃，與已配好的表皮葡萄球菌菌懸液混合（培養(yǎng)基液20 ml內(nèi)加菌懸液2 ml），充分混勻后倒入直徑為90 mm的無菌培養(yǎng)皿中制成含菌培養(yǎng)基，無菌間自然晾干。

痤瘡丙酸桿菌培養(yǎng)基：將強(qiáng)化布氏瓊脂（1 000 ml蒸餾水中加入布氏瓊脂粉末43 g、氯化血紅素貯存液1 ml及維生素K1工作液1 ml）高壓滅菌后，冷卻至45℃加入滅菌脫纖維羊血50 ml后與已配好的丙酸桿菌菌懸液（培養(yǎng)基液20 ml內(nèi)加菌懸液2 ml），充分混勻后倒入直徑為90 mm的無菌培養(yǎng)皿中制成含菌培養(yǎng)基，無菌間自然晾干。

抑菌實(shí)驗(yàn)：用直徑3 mm的打孔器在培養(yǎng)基中打兩個孔，分別加入夫西地酸乳膏和莫匹羅星軟膏，使藥膏與孔邊緣平齊并充分接觸。表皮葡萄球菌置于37℃孵箱中需氧環(huán)境培養(yǎng)24 h，痤瘡丙酸桿菌置于厭氧環(huán)境中培養(yǎng)48 h后，觀察各藥膏孔周圍抑菌環(huán)大小并記錄其直徑，抑菌環(huán)直徑取最大徑和最小徑的均數(shù)，并拍照。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用配對樣本t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.表皮葡萄球菌抑菌環(huán)比較：在MH培養(yǎng)基平板上，夫西地酸乳膏和莫匹羅星軟膏均對表皮葡萄球菌產(chǎn)生清晰的抑菌環(huán)，抑菌環(huán)直徑分別為（31.76±6.05）mm、（31.98±17.20）mm，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.132，P＞0.05）。

2.痤瘡丙酸桿菌抑菌環(huán)比較：在強(qiáng)化布氏瓊脂平板上，夫西地酸乳膏對痤瘡丙酸桿菌可見清晰的抑菌環(huán)，抑菌環(huán)直徑均數(shù)為（18.15±3.24）mm，而莫匹羅星軟膏的抑菌環(huán)直徑均數(shù)為3 mm，與藥孔的直徑相同，實(shí)際無抑菌環(huán)。表明莫匹羅星軟膏對痤瘡丙酸桿菌無明顯抗菌活性或抗菌活性很低。兩種藥物的抑菌環(huán)直徑比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=24.27，P＜0.05）。

三、討論

夫西地酸通過抑制細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成而產(chǎn)生抗菌作用，抗革蘭陽性菌活性強(qiáng)，對表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、梭狀芽孢菌屬和棒狀桿菌非常敏感，也可抗多種厭氧菌［4］。夫西地酸有很強(qiáng)的脂溶性，具備穿透生化屏障的能力。本研究體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示，夫西地酸乳膏對痤瘡患者皮損中分離出的表皮葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌均有較好的抑制作用，而莫匹羅星軟膏僅對表皮葡萄球菌有抑制作用，對痤瘡丙酸桿菌無明顯抑制作用。其原因可能是莫匹羅星軟膏對需氧革蘭陽性球菌有很強(qiáng)的抗菌活性，而對厭氧菌無明顯抑制作用，目前尚無相關(guān)報(bào)道，尚待進(jìn)一步研究。

［1］Jones RN,Mendes RE,Sader HS,et al.In vitroantimicrobial findings for fusidic acid tested against contemporary（2008?2009）gram ?positive organisms collected in the United States［J］.Clin Infect Dis,2011,52 Suppl 7:S477?S486.DOI:10.1093/cid/cir163.

［2］Sahm DF,Deane J,Pillar CM,et al.In vitroactivity of CEM?102（fusidic acid）against prevalent clones and resistant phenotypes of Staphylococcus aureus［J］.Antimicrob Agents Chemother,2013,57（9）:4535?4536.DOI:10.1128/AAC.00206?13.

［3］McGhee P,Clark C,Credito K,et al.In vitroactivity of fusidic acid（CEM?102,sodium fusidate）against Staphylococcus aureus isolates from cystic fibrosis patients and its effect on the activities of tobramycin and amikacin against Pseudomonas aeruginosa and Burkholderia cepacia［J］.Antimicrob Agents Chemother,2011,55（5）:2417?2419.DOI:10.1128/AAC.01672?10.

［4］劉蔚,蔣獻(xiàn),陳慧莉,等.高強(qiáng)度窄譜藍(lán)光對尋常痤瘡表皮分離菌的抗菌作用研究［J］.中華皮膚科雜志,2005,38（11）:683?684.DOI:10.3760/j.issn:0412?4030.2005.11.009.Liu W,Jiang X,Chen HL,Li L,et al.In vitroeffect of high intensity blue light on bacteria isolated from patients with acne vulgaris［J］.Chin J Dermatol,2005,38（11）:683 ?684.DOI:10.3760/j.issn:0412?4030.2005.11.009.

In vitroantibacterial activity of fusidic acid cream againstStaphylococcus epipermidisandPropionibacterium acnesisolates from acne vulgaris lesions

Gao Shiyan,Lu Yonghong,Chen Tao,Wang Shanshan,He Lisha,Shan Yuting,Zhou Peimei,Wa Qingbiao,Wu Bo,Li Lin,Chen Qianming,Bao Yong,Yin Yafei,Lu Ling
Department of Dermatology,Chengdu Hospital Affiliated to Zunyi Medical College and Chengdu Second People′s Hospital,Chengdu 610017,China（Gao SY,Lu YH,Chen T,Wang SS,He LS,Shan YT,Zhou PM,Wa QB,Wu B,Li L,Chen QM）;Clinical Laboratory,Chengdu Hospital Affiliated to Zunyi Medical College and Chengdu Second People′s Hospital,Chengdu 610017,China（Bao Y,Yin YF,Lu L）

ObjectiveToinvestigatetheinvitroantibacterialactivityoffusidicacidcreamagainstStaphylococcus epipermidisandPropionibacterium acnesisolates from acne vulgaris lesions.MethodsThe agar diffusion method was used to evaluate the antibacterial activity of fusidic acid cream and mupirocin ointment againstS.epipermidisandP.acnesisolates from acne vulgaris lesionsin vitro.Inhibition zone diameters were measured and compared between the two topical drugs.ResultsA significant difference was observed between the fusidic acid cream and mupirocm ointment in the inhibition zone diameters forP.acnes（18.15±3.24vs.3.00±0.00 mm,t=24.27，P＜ 0.05）,but not in those forS.epidermidis（31.76±6.05vs.31.98±17.20 mm,t=0.132,P＞0.05）.ConclusionFusidic acid cream displays strongin vitroantibacterial activity againstS.epidermidisandP.acnesisolates from acne vulgaris lesions.

Acne vulgaris;Fusidic acid;Propionibacterium acnes;Staphylococcus epidermidis;Microbial sensitivity tests

Lu Yonghong,Email:1255395583@qq.com

2016?06?07）

（本文編輯：尚淑賢）

路永紅，Email：1255395583@qq.com

10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.09.014

成都市衛(wèi)生局科研課題（2014010）；CAIM?澳美中國研究基金（痤瘡研究）

Fund programs:Scientific Research Project of Chengdu Municipal Health Bureau（2014010）;CAIM?Bright Future of China Research Fund（Acne Research）