三碘氧化合物消毒劑殺菌測試

吳春濱 （山東省萊州市朱橋畜牧獸醫(yī)站 261400）

三碘氧化合物消毒劑殺菌測試

吳春濱 （山東省萊州市朱橋畜牧獸醫(yī)站 261400）

含三碘氧化合物的消毒劑，在有機物干擾下對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌、枯草桿菌等殺滅率均可達99.90%以上，50%小牛血清對消毒殺菌能力無影響，可用于環(huán)境消毒和帶雞噴霧消毒。而常規(guī)碘伏類消毒劑則在有機物干擾下嚴重影響效果，不能用于環(huán)境消毒和噴霧消毒。為了篩選出合適養(yǎng)殖場使用的消毒劑，對不同結構的碘伏進行消毒學測試，表明三碘氧化合物消毒劑效果較好，屬高效消毒劑。

三碘氧化合物；碘伏；殺菌效果；抗有機物；環(huán)境消毒；測試；實驗

為了篩選出合適養(yǎng)殖場使用的消毒劑，特以不同結構的碘伏進行消毒學測試，以期通過正確篩選方法來為養(yǎng)殖場提供參考，現(xiàn)將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 消毒劑

三碘氧化合物消毒劑：有效成份為三碘氧化合物，有效碘含量為3.04%。普通碘伏：有效成份為聚維酮碘，有效碘含量為3.02%。

1.1.2 實驗菌

金黃色葡萄球菌 （ATCC 6538），白色念珠菌 （ATCC 10231），大腸桿菌 （8099），枯草桿菌黑色變種芽孢 （ATCC 9372），均用含1%蛋白胨的稀釋液配成107cfu/m l的菌懸液備用，實驗菌株為保存菌株。

1.2 方法

1.2.1 中和劑選擇實驗

實驗菌選金黃色葡萄球菌和白色念珠菌，實驗分8組。實驗結果，以第6、7、8組不長菌，第3、4、5組組間菌數(shù)相差≤10%，第1組不長菌或細菌數(shù)遠低于第2組，第2組菌數(shù)≥100cfu/ml，為所用中和劑及其濃度適宜。

1.2.2 懸液定量殺菌實驗

用無菌蒸餾水將拜凈稀釋成不同濃度，取5ml于試管中，與0.1ml菌液混勻，作用至規(guī)定時間；取菌藥混合液0.5m l加入含4.5ml中和劑的試管中，混勻；作用10min后，取0.5ml接種平皿；傾注營養(yǎng)瓊脂并混勻，枯草桿菌黑色變種芽孢37℃培養(yǎng)72h，其余菌則培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)，根據消毒技術規(guī)范要求，殺滅率達99.9%則判為合格，實驗重復3次。

1.2.3 抗有機物實驗

用無菌蒸餾水將拜凈稀釋成有效碘2.5mg/L濃度，各取5m l于3只試管中，分別加入小牛血清含量為0%、25%和50%的金黃色葡萄球菌菌懸液0.1m l，混勻；按懸液定量殺菌實驗方法進行殺菌實驗，觀察有機物對消毒能力的影響，實驗重復3次。

1.2.4 現(xiàn)場實驗

對照組用無菌水噴地面；實驗組用含碘20mg/L的三碘氧化合物消毒劑噴地，5min后，用浸過中和劑的無菌棉簽在地面涂擦兩次采樣，將樣本放入原中和劑試管內作消毒前樣本；用同樣方法采得實驗樣本。10min后取0.5m l接種平皿，傾注營養(yǎng)瓊脂，37℃培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。按下式計算殺滅率：地面細菌菌落總數(shù) （cfu/地面）=平皿上平均菌落數(shù)×檢測時樣本洗液稀釋倍數(shù)。

1.2.5 養(yǎng)殖實驗

選3組相同來源相同數(shù)量的肉雞，分別為三碘氧化合物消毒劑A組、普通碘伏B組和空白對照C組。從第1日齡開始到70日齡結束，A組每天用三碘氧化合物消毒劑帶雞噴霧消毒一次，B組每天用普通碘伏消毒液帶雞消毒一次，均按1：600比例兌水稀釋噴灑。記錄各組死淘數(shù)，死淘重，用料量，用藥情況，實驗初重，小雞重量，中雞重量，大雞重量，全程料肉比，上市率，經濟效益分析。

1.3 數(shù)據統(tǒng)計分析

實驗結果數(shù)據采用平均數(shù)，應用SPSS軟件進行差異顯著分析。

2 實驗結果

2.1 中和劑實驗結果

實驗表明，中和劑 （1%硫代硫酸鈉+1%吐溫-80+0.03mol/L pH7.2PBS）能有效中和有效碘40mg/L濃度及以下的三碘氧化合物消毒劑溶液，且中和劑與中和產物對各實驗菌均無不良影響。

2.2 殺菌效果

實驗表明，三碘氧化合物消毒劑305ppm（6000倍稀釋）殺滅細菌繁殖體只需1min，1.25ppm（240002倍稀釋）低劑量也只需要20min。殺真菌所需濃度約為殺細菌的8倍。能殺枯草桿菌黑色變種芽孢，符合高效消毒劑的要求，可以推測其殺病毒能力也強。

2.3 抗有機物

實驗表明，25%、50%的小牛血清對三碘氧化合物消毒劑殺滅作用均無影響；在對照組中，25%、50%小牛血清對含聚維酮碘的普通碘伏殺滅作用則有輕度影響；而目前含有機物25～50%的小血清對含聚維酮碘的普通碘伏消毒能力的報道均為較嚴重影響；實驗結果表明，三碘氧化合物消毒劑是抗有機物影響能力最強的碘伏類消毒劑，因此適宜于養(yǎng)殖場的環(huán)境消毒。

2.4 現(xiàn)場實驗

實驗表明，三碘氧化合物消毒劑有效碘25mg/L（1200倍稀釋）噴于地面，作用5min對地面自然菌的平均殺滅率為99.68%，達到90.00%以上，符合消毒現(xiàn)場應用實驗合格要求。而普通碘伏基本無效。

2.5 養(yǎng)殖實驗

三碘氧化合物消毒劑組在3個組別中上市率最高，中雞均重最大。料肉比方面三碘氧化合物消毒劑組與普通碘伏和空白對照組差異顯著 （P＜0.05），大雞均重三碘氧化合物消毒劑組與普通碘伏組差異極顯著 （P＜0.01）。從生產成績方面看，三碘氧化合物消毒劑組上市率最高，料肉比最低，中雞與大雞均重最大，普通碘伏組與空白對照組差異不顯著。

3 討論分析與結論

（1）實驗表明，三碘氧化合物消毒劑在低濃度下可以快速殺死細菌繁殖體、真菌、細菌芽孢，而且在高濃度有機物50%小牛血清存在上，對消毒效果也無影響，按1：1200倍稀釋現(xiàn)場消毒，5min內對環(huán)境中的自然菌可達99.9%殺滅率。根據三碘氧化合物消毒劑對芽孢有良好的殺滅作用來推測，三碘氧化合物消毒劑是可以殺病毒的，屬高效消毒劑。

（2）含聚維酮碘的普通碘伏在有機物干擾下快速失效，不適合養(yǎng)殖場環(huán)境消毒，根本原因可能是聚維酮碘、非離子表面活性劑碘和季銨鹽碘抗有機物能力差。三碘氧化合物消毒劑之所以能突破碘伏抗有機物能力差的缺陷，可能與三碘氧化合物的殺菌方式和十二烷基氧化胺載體也具有殺菌功能有關，而第一、二代碘伏 （聚維酮碘和季銨鹽絡合碘）均以游離碘殺菌，而且載體幾乎無殺菌功能。同時三碘氧化合物消毒劑中的非離子膠束微囊可直接解離有機物，表面活性劑又對病原及環(huán)境中的有機物進行清洗，因而在實驗條件下高濃度的有機物也不影響三碘氧化合物消毒劑的消毒殺菌能力。所以三碘氧化合物消毒劑適宜于對污染環(huán)境的消毒，可推薦用于養(yǎng)殖場環(huán)境消毒、器械消毒等。