季偉
(遼寧省凌海市余積動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所121206)
影響獸醫(yī)生物制品滅活作用的因素
季偉
(遼寧省凌海市余積動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所121206)
獸醫(yī)生物制品生產(chǎn)中的滅活,是指破壞微生物的生物學(xué)活性、繁殖能力和致病性,但盡可能不影響其免疫原性,被滅活的微生物主要用于生產(chǎn)滅活疫苗;或指破壞診斷血清或待檢血清中的補(bǔ)體活性,以避免補(bǔ)體對(duì)診斷試驗(yàn)的干擾作用。滅活的對(duì)象不同,采用的方法也不盡相同。滅活的主要方法有兩類,即物理方法和化學(xué)方法。滅活方法不同,化學(xué)滅活劑的種類又很多,作用機(jī)理也不同,因此,滅活效果受多種因素影響。
某些滅活劑只對(duì)一部分微生物有明顯的滅活作用,而對(duì)另一些微生物則效力很差。如酚類能抑制和殺滅大部分細(xì)菌的繁殖體,5%石碳酸溶液于數(shù)小時(shí)內(nèi)能殺死細(xì)菌的芽孢。真菌和病毒對(duì)酚類不太敏感。陽離子表面活性劑抗菌譜廣,效力快,對(duì)組織無刺激性,能殺死多種革蘭氏陽性菌和陰性菌,但對(duì)綠膿桿菌和細(xì)菌芽孢作用弱,其水溶液不能殺死結(jié)核桿菌。因此在選擇滅活劑時(shí),應(yīng)考慮其特異性,即應(yīng)考慮其對(duì)微生物的作用范圍。
不同種類的微生物如細(xì)菌、病毒、真菌以及革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌對(duì)各類滅活劑的敏感性并不完全相同;細(xì)菌的繁殖體及其芽孢對(duì)化學(xué)藥物的抵抗力不同;生長期和靜止期的細(xì)菌對(duì)滅活劑的敏感程度亦有差別。此外,細(xì)菌的濃度也會(huì)影響滅活的效果。微生物或毒素的總氮量和氨基氮含量對(duì)滅活也有一定影響。一般含氮量越高,甲醛等滅活劑的消耗量就越大,滅活脫毒速度越慢。
以甲醛為例,甲醛濃度越高,滅活脫毒越快,但抗原損失量亦較大。有人證明,加0.5%甲醛溶液脫毒的類毒素,其結(jié)合力僅相當(dāng)于0.2%甲醛溶液脫毒類毒素結(jié)合力2/3。有時(shí)可以采用分次加入甲醛溶液進(jìn)行滅活、脫毒比較緩和的方法。即將甲醛溶液分?jǐn)?shù)次加入,加量由小至大,pH由低而高,溫度由室溫開始,逐步提高到允許的最高溫度,這樣對(duì)于保護(hù)抗原的免疫原性有一定好處。
通常情況下,滅活作用隨滅活溫度上升而加速。在低溫時(shí),溫度每上升10℃,細(xì)菌死亡率可成倍增加。每升高10℃,金屬鹽類的滅活作用增加2~5倍,石碳酸的殺菌作用增加5~8倍。但是,如果溫度超過40℃或更高,對(duì)微生物的抗原性將有不利影響。
滅活時(shí)間與滅活劑濃度和作用溫度密切相關(guān)。一般隨著滅活劑濃度及作用溫度升高,滅活時(shí)間則縮短。在生物制品生產(chǎn)中,應(yīng)以保證制品安全和效力,采用低滅活劑劑量、低作用溫度和短時(shí)間處理為最佳。
在微酸性時(shí)滅活速度慢,抗原性保持較好,在堿性時(shí)滅活速度快,但抗原性易受破壞。滅活初期損失較快,以后逐漸減慢,尤其甲醛溶液濃度高時(shí),在堿性溶液中抗原性損失更大。pH對(duì)細(xì)菌的滅活作用有較大影響。pH改變時(shí),細(xì)菌的電荷也發(fā)生改變,在堿性溶液中,細(xì)菌帶陰電荷較多,陽離子表面活性劑的殺菌作用較大。在酸性溶液中,則陰離子的殺菌作用較強(qiáng)。同時(shí),pH也影響滅活劑的電離度。未電離的分子一般較易通過細(xì)菌細(xì)胞膜,滅活效果較好。
被滅活的病毒或細(xì)菌液中,如果含有血清或其它有機(jī)物質(zhì),會(huì)影響滅活劑的滅活能力。因?yàn)橛袡C(jī)物能吸附于滅活劑的表面或者與滅活劑的化學(xué)基團(tuán)相結(jié)合。受此影響最大的為苯胺類染料、汞制劑和陽離子去污劑。一旦汞制劑與含硫氫基化合物相遇或季銨鹽類與脂類結(jié)合,則明顯降低這些滅活劑的滅活作用。
總之,了解影響滅活作用的因素,在獸醫(yī)實(shí)際生產(chǎn)中適當(dāng)避免不正確的操作,使獸醫(yī)生物制品發(fā)揮最大的作用,給養(yǎng)殖業(yè)帶來最高的經(jīng)濟(jì)效益。