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      HPLC法同時測定蒙古山蘿卜綠原酸、金絲桃苷的含量△

      2016-01-27 18:10:35白音夫
      中國民族醫(yī)藥雜志 2016年11期
      關(guān)鍵詞:桃苷金絲綠原

      杜 鵑 白音夫

      (1.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020; 2.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)藥研究所,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020)

      HPLC法同時測定蒙古山蘿卜綠原酸、金絲桃苷的含量△

      杜 鵑1白音夫2*

      (1.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020; 2.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)藥研究所,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020)

      目的:HPLC法同時測定藥材中綠原酸、金絲桃苷的含量。方法:采用HPLC法測定;流動相為乙腈-水-磷酸(12:88:0.1),流速1.0mL/min,檢測波長為350nm,柱溫為30℃。結(jié)果:綠原酸在1.5 ~48 μg/mL;金絲桃苷在1.8~120μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.999;綠原酸、金絲桃苷平均回收率分別為102.2%、104.21%。結(jié)論:4種不同來源藥材,綠原酸、金絲桃苷平均含量分別為0.375%、0.048%。該方法快捷、簡便、準(zhǔn)確可作為藥材質(zhì)量評價方法。

      HPLC法;蒙古山蘿卜;綠原酸;金絲桃苷

      蒙古山羅卜Scabiosa comosa Fisch是傳統(tǒng)蒙醫(yī)藥治療肝病的藥材,可清肝明目,用于肝病,與其它藥材配伍可治療多種肝病[1]。藥材含黃酮類化合物,綠原酸是主要成分之一[2]。本文用HPLC法測定藥材中綠原酸、金絲桃苷含量,以期為藥材質(zhì)量評價提供簡便快速。

      1 儀器與試劑

      1.1 儀器:1100型高效液相色譜儀 (美國安捷倫公司),TJ-912型色譜分析平臺(太極計算機公司),IN-180型柱溫箱(上海英泰科技研究所),色譜柱(0203030蘭州化物所),電子天平(梅特勒)。

      1.2 試藥:綠原酸、金絲桃苷對照品由中國藥品生物制品檢定所提供,乙腈為色譜純,其他試劑均為分析純,水為純化水;藥材采自內(nèi)蒙古大青山圣水梁、灰騰梁、南天門林場與市售。

      2 實驗方法與結(jié)果

      2.1 色譜條件:ODS-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-水-磷酸(12:88:0.1);流速:1mL·min-1;溫度:30℃;檢測波長:350nm;進樣量10μL。在此條件下待測組分可達(dá)到基線分離。樣品中綠原酸、金絲桃苷與其它組分有較好的分離,見圖1。

      2.2 對照品溶液的制備:精密稱取綠原酸、金絲桃苷對照品適量,加甲醇分別制成0.12 mg/mL、0.15mg/mL的溶液,即得。

      2.3 供試品溶液的制備:取本品粉碎過100目篩,精密稱定200mg,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇10mL,稱重,超聲處理50min,放冷,稱重,用甲醇補足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用,即得。

      2.4 線性關(guān)系考察:精密分別量取綠原酸、金絲桃苷對照品溶液0.125,0.25,0.5,1,2,4mL和0.125,0.25,0.5,1,2, 4,8mL,加到10mL量瓶內(nèi),甲醇稀釋至刻度,搖勻,按色譜條件測定峰面積;以峰面積為縱坐標(biāo)(Y),進樣量為橫坐標(biāo)(X)做線性回歸, 回歸方程分別為Y=3574745-285223X,r=0.999 ;Y= 23257367X -484647,r=0.999。結(jié)果表明,綠原酸、金絲桃苷分別在1.5 ~48 μg/mL、1.8~120μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

      2.5 精密度實驗:吸取同一批供試品溶液,在上述色譜條件下重復(fù)進樣6次,測得綠原酸、金絲桃苷峰面積RSD分別為0.84%、0.96%。

      2.6 穩(wěn)定性實驗:取同一份供試品溶液,分別在0,2,4,8,12h進樣測定峰面積,計算綠原酸金、絲桃苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù),其RSD分別為0.93%、1.21%。結(jié)果表明,供試品在12h內(nèi)穩(wěn)定。

      2.7 重復(fù)性實驗:取同批藥材(圣水梁)按2.3項下平行制備6份樣品溶液,并按2.1項下測定,綠原酸平均含量為0.41%,RSD=1.13%;金絲桃苷平均含量為0.07%,RSD=1.24%;

      2.8 加樣回收率實驗:取同批藥材(圣水梁)已知含量的樣品6份,每份取約100mg,精密稱定,分別精密加入綠原酸對照品溶液2mL (0.22 mg/mL),金絲桃苷對照品溶液1 mL(0.075 mg/mL),按2.3項下制備樣品溶液,同法操作,測定含量,計算回收率。綠原酸平均回收率102.2%,RSD=1.04%;金絲桃苷平均回收率為104.21%,RSD=1.26%

      2.9 藥材測定:取不同采集點藥材制備供試品溶液,同時取對照品溶液隨行對照,按擬定的色譜條件測定綠原酸、金絲桃苷含量。結(jié)果,大青山圣水梁0.41%、0.07%,灰騰梁0.32%、0.03%,南天門林場0.47%、0.08%,市售0.30%、0.01%;平均含量0.375%、0.048%。

      3 結(jié)論

      綠原酸、金絲桃苷是蒙古山蘿卜的主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗肝纖維化作用,本文建立了HPLC法同時測定這2種成分的分析方法,可作為蒙古山蘿卜藥材質(zhì)量評價的指標(biāo)。

      [1]衛(wèi)生部藥典委員會.藥材標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊[S].1998,52,166,167,194

      [2]白音夫,周雪梅,周長鳳,等. 蒙古山蘿卜有效成分的分離、鑒定及含量測定[J].西北藥學(xué)雜志,2014,29(6):564-566.

      2016年8月16日收稿

      國家自然科學(xué)基金資助項目(81260659)內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金(編號:2014MS0860)

      R291.2

      B

      1006-6810(2016)11-0056-02

      *通訊作者

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