淺談奶牛乳房炎PCR 診斷技術(shù)的應(yīng)用

高清清

(江蘇省太倉(cāng)市瀏河動(dòng)物防疫站215400)

淺談奶牛乳房炎PCR 診斷技術(shù)的應(yīng)用

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奶牛乳房炎是由物理、化學(xué)或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引發(fā)的一種炎癥反應(yīng)，其中多種病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。該病廣泛存在于世界各地，其發(fā)生率至今仍相當(dāng)高。它不僅僅給世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，也給乳品工業(yè)的發(fā)展、公共衛(wèi)生以及食品安全帶來一定隱患。目前，奶牛乳房炎的防治仍以采用抗菌素進(jìn)行治療為主，臨床治療過程中由于盲目使用抗生素，致使耐藥菌株不斷產(chǎn)生，不但療效不佳，而且造成治療成本增加；還可引起乳中藥物殘留，這將大大降低經(jīng)濟(jì)效益。早期的檢測(cè)不僅能夠預(yù)防乳房炎的發(fā)病，而且也可為乳房炎治療提供有效依據(jù)，是直接提高牛奶質(zhì)量有效、切實(shí)的手段。目前奶牛乳房炎主要的診斷方法有乳汁體細(xì)胞計(jì)數(shù)、微生物鑒定、電導(dǎo)率值檢驗(yàn)、乳成分檢驗(yàn)、MTT和PCR檢測(cè)等方法。

微生物鑒定法是目前比較認(rèn)同的一種標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，但此種檢測(cè)方法檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)環(huán)境要求高，工作量大，并且極易產(chǎn)生假陰性誤判，因此目前還僅限于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，并未在奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行推廣。隨著分子生物學(xué)的廣泛發(fā)展，PCR應(yīng)用技術(shù)日益完善，PCR檢測(cè)奶牛乳房炎是目前在臨床診斷中廣泛應(yīng)用的一種分子水平方法。此次筆直應(yīng)用上海奶牛育種中心PathoProof奶牛乳房炎PCR診斷系統(tǒng)對(duì)江蘇太倉(cāng)地區(qū)部分牧場(chǎng)兩百多個(gè)樣本進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其具備以下特點(diǎn)：（1）準(zhǔn)確：100%特異性鑒別出牛奶樣本中的DNA，結(jié)果客觀，無需依賴檢測(cè)者經(jīng)驗(yàn)；實(shí)現(xiàn)定性和定量分析，如果樣本中同時(shí)存在多種病原菌，所有病原菌會(huì)被同時(shí)檢測(cè)到并報(bào)告各種細(xì)菌的比例。 （2）高效：從樣本到結(jié)果只需4～5h，包括支原體。 （3）便捷：可用于分析鮮乳及添加溴硝丙二醇防腐劑保存了3個(gè)月的牛乳樣本，樣本常溫運(yùn)輸，使牛奶跟蹤樣本 （DHI樣本）能首次用于乳腺炎檢測(cè)項(xiàng)目；可用于對(duì)奶牛治療期間的樣本進(jìn)行檢測(cè)，不受抗生素藥品的影響；不需要非常豐富的微生物鑒定經(jīng)驗(yàn)和嚴(yán)格的無菌操作環(huán)境及設(shè)備就能得到準(zhǔn)確結(jié)果。

基于該技術(shù)的特點(diǎn)，牧場(chǎng)可對(duì)乳房炎急性發(fā)病高產(chǎn)奶牛，久治不愈的、反復(fù)發(fā)作的奶牛優(yōu)先進(jìn)行采樣送檢，及時(shí)確定主要致病菌及用藥濃度，避免盲目用藥、過量用藥，縮短治療周期，減少生產(chǎn)上的損失。有條件的牧場(chǎng)也可以制定科學(xué)的計(jì)劃，結(jié)合奶牛臨床癥狀及隱性乳房炎檢測(cè)結(jié)果，定期集中采樣送檢，獲得牧場(chǎng)全年度不同季節(jié)奶牛乳房炎病原菌發(fā)病情況及其藥物敏感性的系統(tǒng)資料，為指導(dǎo)臨床合理用藥和制定來年牧場(chǎng)環(huán)境、擠奶管理計(jì)劃，提高奶牛乳房炎防治效果提供理論依據(jù)。