布渣葉化學(xué)成分及功能活性研究進(jìn)展

張敏，李世濤，王婷婷，宮俊杰*，梁曉輝，趙煜煒

（1.龍大食品集團(tuán)有限公司，山東煙臺(tái) 265231；2.煙臺(tái)中瑞化工有限公司，山東煙臺(tái) 265299；3.山東農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，山東濟(jì)南 251100）

布渣葉化學(xué)成分及功能活性研究進(jìn)展

張敏1，李世濤2，王婷婷3，宮俊杰1*，梁曉輝1，趙煜煒1

（1.龍大食品集團(tuán)有限公司，山東煙臺(tái) 265231；2.煙臺(tái)中瑞化工有限公司，山東煙臺(tái) 265299；3.山東農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，山東濟(jì)南 251100）

布渣葉為常見中藥，是南方?jīng)霾璧闹匾现唬哂星鍩崛セ鸬淖饔?。本文?duì)布渣葉化學(xué)成分和生物活性等方面的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了整理，以期為布渣葉的進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

布渣葉；化學(xué)成分；生物活性

布渣葉為椴樹科破布葉屬破布樹的葉，味甘淡，性微寒，具有清熱去火、消食利滯的功效[1]，多用于食品、藥品及保健品，是“加多寶”“王老吉”“甘和茶”和“仙草爽涼茶”等的主要原料[2]。由于布渣葉在臨床及保健涼茶中的廣泛應(yīng)用，其化學(xué)成分及功能研究也逐漸深入開展。

1 布渣葉的主要化學(xué)成分

布渣葉化學(xué)成分較為復(fù)雜，目前研究發(fā)現(xiàn)其含有生物堿、黃酮、揮發(fā)油、有機(jī)酸等多種成分。通過不同極性的溶劑對(duì)布渣葉進(jìn)行提取，采用沉淀反應(yīng)或顏色反應(yīng)初步認(rèn)為布渣葉可能含有黃酮、生物堿、三萜、揮發(fā)油、有機(jī)酸等成分[3]。

1.1 黃酮類

黃酮類化合物是布渣葉中的主要成分。畢和平等[4]采用分光光度法測布渣葉的總黃酮，結(jié)果表明，葉中的總黃酮分別為16.94%。潘天玲等[5]對(duì)13個(gè)不同產(chǎn)地布渣葉樣品用Al(NO3)3-NaNO2-NaOH體系比色法測定其總黃酮含量，結(jié)果顯示各地總黃酮含量差異較大，平均含量為27.06mg/g，含量最高為廣西來賓55.22mg/g；含量最低為海南儋州11.2mg/g。目前通過多種柱色譜結(jié)合的方式分別從布渣葉中制備得到異鼠李素、山奈素、槲皮素、牡荊苷、異牡荊苷、佛來心苷、異佛來心苷、水仙苷、表兒茶素、5,8,4-三羥基-3-甲氧基酮-7-O-鼠李糖基葡萄糖甙和5,6,8,4-四羥基黃酮-7-O-鼠李糖甙、山柰酚-3-O-β-D-[3,6-二-（對(duì)羥基桂皮酰）]-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、異鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷及山萘酚3-O-β-D-（6-O-反式對(duì)羥基桂皮酰）葡萄糖苷等16種黃酮類成分[6-11]。

1.2 生物堿

用碘化鉍鉀、碘化汞鉀和硅鎢酸試劑沉淀法和薄層層析法可檢驗(yàn)出布渣葉中含有生物堿成分[11]。Shi-XiuFeng等[12]從布渣葉氯仿提取部分中分離制備兩個(gè)哌啶類生物堿microcosamines A和B。羅集鵬等[13]從布渣葉的氯仿提取物經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-丙酮梯度洗脫，分離得到4個(gè)生物堿，分別為N-甲基-6α-癸間三烯[1′,3′,5′]-2β-甲基-3β-甲氧基哌啶，6-癸間三烯[1′,3′,5′]-2-甲基-3-甲氧基哌啶，N-甲基-6-癸間三烯[1′,3′,5′]-2,3-二甲基哌啶，N-甲基-6-癸間三烯[1′,3′,5′]-2-甲基哌啶，分別命名為布渣葉堿Ⅰ（micropiperidine A）、布渣葉堿Ⅱ（micropiperidine B）、布渣葉堿Ⅲ（micropiperidine C）和布渣葉堿Ⅳ（micropiperidine D）。李坤平等[10]以布渣葉保護(hù)急性心肌缺血損傷有效部位為研究對(duì)象，采用硅膠及制備液相色譜等方法進(jìn)行分離純化得到芥酸酰胺。

1.3 有機(jī)酸

布渣葉中的有機(jī)酸主要存在于乙酸乙酯相和正丁醇相。楊茵等[8]從布渣葉中乙酸乙酯相分離得到異香草酸、對(duì)香豆酸、阿魏酸、脫落酸。胡姱等[11]從布渣葉的正丁醇萃取部位分離并鑒定了香草酸、對(duì)香豆酸、丁香酸、咖啡酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸等成分。

1.4 甾醇

胡姱等[11]采用硅膠柱色譜方法進(jìn)行分離純化，從布渣葉的醋酸乙酯萃取部位分離并鑒定了木栓醇、豆甾醇、β-谷甾醇。

1.5 萜類

馮世秀等[6]利用硅膠柱色譜、半制備高效液相色譜正相柱相結(jié)合的方式從布渣葉氯仿萃取部分制得軟木三萜酮和阿江欖仁樹葡糖苷II兩個(gè)三萜。楊茵等[8]從布渣葉分離制備得到四個(gè)降碳倍半菇類化合物，分別為：Isololiolide、脫落酸、(3R,6R)-2-羥基-α-紫羅蘭酮和(R)-3-羥基-β-紫羅蘭酮。胡姱等[11]從布渣葉的醋酸乙酯和正丁醇萃取部位分離并鑒定了黑麥草內(nèi)酯、去氫吐葉醇等單萜。Hua Fan等[14]從乙酸乙酯相中分離制備反式山楂酸和山楂酸兩個(gè)五環(huán)三萜酸類化合物。

1.6 揮發(fā)油類

畢和平等[15]采用水蒸氣蒸餾法提取了布渣葉的揮發(fā)油，其油得率為0.63%，并鑒定了其中的15種成分，大多為脂肪酸和烴類化合物。宋偉峰等[16]對(duì)所提揮發(fā)油采用氣相色譜——質(zhì)譜法鑒定了32個(gè)成分，并用面積歸一化法計(jì)算了各成分的相對(duì)含量，主要為長鏈脂肪酸類、醇類和酮類等化合物。

2 功能成分的提取及質(zhì)量評(píng)價(jià)

目前認(rèn)為布渣葉中主要功能性成分為黃酮類化合物，在提取工藝研究方面主要以總黃酮為監(jiān)測指標(biāo)，在產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)方面主要以山奈酚、槲皮素和牡荊苷等具體黃酮成分作為指標(biāo)性成分。

2.1 功能成分的提取

潘天玲等[17]以總黃酮得率為指標(biāo)，利用單因素試驗(yàn)確定提取溶劑，通過正交試驗(yàn)法優(yōu)化超聲提取最佳條件為：70%乙醇，固液比1:30，提取溫度30℃、超聲波提取2次，每次20min，總黃酮得率為10.214%；回流提取最佳工藝為：固液比1:25，90℃，回流提取2次，每次30min，總黃酮得率為9.735%。兩種提取工藝效果相當(dāng)。李坤平等[18,19]研究了12種對(duì)大孔樹脂富集布渣葉總黃酮的工藝條件及參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明，大孔樹脂處理前后布渣葉總黃酮主成分相同，D101大孔樹脂吸附分離工藝能有效地對(duì)布渣葉總黃酮進(jìn)行富集。以十二烷基硫酸鈉（SDS）為媒介可進(jìn)行黃酮輔助提取，馬婉婉等[20]研究結(jié)果表明：微波輻射時(shí)間1min、SDS質(zhì)分?jǐn)?shù)0.16%、液固比30.75mL/g、恒溫水浴提取時(shí)間50min、酶解時(shí)間30min；韓偉等[21]研究結(jié)果表明，0.12%的十二烷基硫酸鈉，微波輻射2.5min，料液比1:35g/mL，pH5.5為最佳工藝條件；劉曦等[22]得到最優(yōu)的工藝條件：SDS質(zhì)量濃度0.8g/L，提取時(shí)間105min，液固比45mL/g，溶劑pH6.3。

2.2 質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究

曾聰彥等[23,24]采用高效液相色譜法對(duì)布渣葉中山柰素、槲皮素進(jìn)行含量測定，采用甲醇提取的方法來制備供試品溶液，取得良好效果，可用于該藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)。李坤平等[10]采用HPLC法測定了布渣葉中的槲皮素、山柰酚和異鼠李素3種水解黃酮苷元的含量，但測定其苷元的含量未能從本質(zhì)上反映出藥材的質(zhì)量；牡荊苷和異鼠李素-3-O-Κ-D-蕓香糖苷含量的分析研究，顯示不同產(chǎn)地的布渣葉藥材中二者的含量均較大；對(duì)取自9個(gè)不同產(chǎn)地的布渣葉藥材中的黃酮類成分進(jìn)行了分析，所建立的指紋圖譜可用于布渣葉藥材的質(zhì)量控制。盧鵬等[26]建立布渣葉的HPLC指紋圖譜，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件對(duì)其進(jìn)行了相似度計(jì)算，結(jié)果顯示方法學(xué)考察結(jié)果良好，建立的指紋圖譜可為布渣葉的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供依據(jù)，并對(duì)其中水仙苷、異牡荊苷、異佛來心苷、兒茶素和牡荊苷共5種成分進(jìn)行了標(biāo)注。

3 生物活性研究

3.1 抗氧化作用

潘天玲等[7]測定的廣西及海南共13個(gè)不同產(chǎn)地布渣葉樣品中總黃酮清除自由基活性結(jié)果為：各產(chǎn)地總黃酮樣品均具有清除DPPH活性，其自由基清除率隨總黃酮濃度的增大而提高，但其清除-OH和O2-活性與總黃酮濃度關(guān)系不明顯。HuaFan等[14]通過細(xì)胞內(nèi)試驗(yàn)DPPH、ABTS、Co(II)EDTA的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)布渣葉乙酸乙酯提取物比正丁醇提取物、水的提取物和石油醚提取物的效果要好。

3.2 降血脂作用

以血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）為指標(biāo)，考察布渣葉提取物對(duì)大鼠和小鼠實(shí)驗(yàn)性高脂血癥的抑制作用。生化藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，布渣葉能抑制高脂膳食大鼠和小樹的血清TC、TG升高，對(duì)已形成高脂血癥的大鼠有降低TC、TG作用[28,29]；并可改善肝臟脂肪變性的程度，對(duì)非酒精性脂肪肝大鼠血脂、炎癥反應(yīng)具有改善作用[30,31]。

3.3 鎮(zhèn)痛、抗炎作用

有研究表明，布渣葉對(duì)物理性及化學(xué)性刺激鼠疼痛均有明顯抑制作用[32]。布渣葉水提物各劑量組均能減緩小鼠的疼痛，與空白對(duì)照組比較差異顯著。布渣葉水提物也具有抗急性炎性反應(yīng)作用[33]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：高、中、低劑量組均能顯著的抑制由醋酸引起的組織毛細(xì)血管通透性的增加。

3.4 保護(hù)心血管作用

布渣葉水提液能增加心冠脈血流量，提高小鼠耐缺氧能力，延長缺氧鼠的存活時(shí)間，且對(duì)垂體后葉素引起的急性心肌缺血也有保護(hù)作用。布渣葉總黃酮能提高大鼠心肌缺血時(shí)心肌組織SOD、GSH-Px活性，減少M(fèi)DA的產(chǎn)生，從而減輕心肌細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減弱心肌組織缺血損傷[34]。

梅全喜等[32]提出，布渣葉具有較好的抗內(nèi)毒素作用，在臨床常規(guī)劑量下使用是安全、毒性極小的。他通過研究布渣葉浸膏對(duì)SD大鼠有母體毒性、胚胎毒性和致畸作用和對(duì)小鼠骨髓微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)、鼠傷寒沙門氏菌實(shí)驗(yàn)和大鼠致畸試驗(yàn)，表明布渣葉無致突變和致畸作用。

綜上所述，目前國內(nèi)外學(xué)者對(duì)布渣葉化學(xué)成分的研究重點(diǎn)主要集中在黃酮類，含量測定的研究主要集中在黃酮類中槲皮素、山柰酚、牡荊苷和異鼠李素等成分上，而對(duì)其生物堿、有機(jī)酸、揮發(fā)油等未有深入研究。在生物性作用研究方面大部分僅明確了相關(guān)作用，沒有明確活性成分及作用機(jī)制，應(yīng)該繼續(xù)深入進(jìn)行化學(xué)成分、質(zhì)量分析、藥理作用等方面的研究，以期為更好地開發(fā)利用該資源提供理論支持。

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Studies on the Chemical Constituents and Bioactivies ofMicrocos paniculata

ZHANG Min1,LI Shi-tao2,WANG Ting-ting3,GONG Jun-jie1*,LIANG Xiao-hui1,ZHAO Yu-wei1
(1.Longda Foodstuff Group Co.,Ltd,Yantai 265231,China;2.Yantai Zhongrui Chemcial Co.,Ltd,Yantai 265299,China; 3.Shandong Agriculture and Engineering University,Jinan 251100,China)

Microcos paniculataL.is being recommended as a healthy raw material in the production of herbal tea.In this paper,the author reviewed the chemical constituents and pharmacological activities ofMicrocos paniculata,in order to provide the references for the future research and development.

Microcos paniculataL.;chemical constituent;biological activity

S789

A

1008-1038(2016)12-0020-04

2016-11-06

張敏（1984—），女，工程師，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工與安全

*通訊作者：宮俊杰（1973—），男，高級(jí)工程師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品加工與安全控制研究